伴足细胞尿的IgA肾病的临床病理特征

目的 探讨伴足细胞尿的IgA肾病（IgAN）患者的临床病理特点。方法 入选IgAN患者36例,其中男性20例,女性16例,平均年龄（34．1±12．2）岁。10例健康志愿者为健康对照。足细胞排泄的定量检测采用尿沉渣涂片免疫组化染色直接计数。进行尿液足细胞排泄与肾脏病理的相关分析。结果 （1）IgAN患者尿细胞podocalyxin阳性率为61%,健康对照组为0（P＜0．05）。（2）与非大量蛋白尿（＜3．0 g/24 h）IgAN患者比较,大量蛋白尿（≥3．0 g/24 h）IgAN患者的尿液足细胞检测阳性率、尿液足细胞排泄数、足细胞与尿肌酐的比值以及足细胞占尿液小管上皮细胞的百分数均显著增高（P＜0．05）。IgAN患者足细胞排泄水平与蛋白尿水平呈正相关（r=0．446,P=0．007）。（3）与无足细胞尿的患者比较,伴足细胞尿的IgAN患者的蛋白尿水平显著增高,血浆白蛋白水平显著降低,肾小管上皮细胞与尿肌酐的比值亦显著增高（P＜0．05）。但伴与不伴足细胞尿的2组IgAN患者在年龄、性别、血压、Scr、血红蛋白水平以及血浆脂质代谢等方面差异均无统计学意义（P＞0．05）。（4）尿足细胞的排泄与细胞新月体或细胞纤维性新月体、小球血管襻腔狭窄和足突广泛融合病变有关,而与系膜、内皮细胞病变及局灶基底膜增厚无关。伴足细胞尿的患者肾小球和肾小管间质纤维化更明显（P＜0．05）。伴有新月体的患者其尿液足细胞排泄水平、尿液上皮细胞和管型的排泄均增加（P＜0．05）。结论 足细胞尿不仅是IgAN患者肾小球损伤的结果,也是IgAN患者活动性损伤的指标。足细胞尿排泄的水平与蛋门尿水平呈正相关,与肾脏病理类型也有一定的关系。     

司维拉姆对慢性肾脏病血管钙化及病死率的影响

尽管透析技术有了很大进展,而终末期肾病(end-stage renal disease, ESRD)患者血磷的控制仍面临很大挑战。为了控制血磷水平,不恰当的饮食控制可能会导致更高的病死率,因此合理应用磷结合剂非常必要。传统的磷结合剂由于其副作用逐渐被淘汰。作为非含钙非含铝磷结合剂的代表药物,司维拉姆能在降磷的同时降低血低密度脂蛋白(low tehsith lipoprotein, LDL)水平及高钙血症的风险。此外,司维拉姆对冠状动脉钙化积分(coronary artery calcification, CAC)的进展可能也有保护作用,可以降低慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)患者心血管事件发生率。对65岁以上的血液透析患者,司维拉姆或许会显著降低全因病死率。磷结合剂的选用应确立个体化治疗方案,对于患有严重血管及其他软组织钙化、高钙血症、高脂血症的CKD患者,应优先选择司维拉姆来降低血磷水平。     

RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路在高磷环境调节内皮细胞凋亡的机制

目的 研究高磷环境下内皮细胞凋亡的可能调控机制和信号通路。方法 人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）在正常磷（1.0 mmol/L）、高磷（3.0 mmol/L）、正常磷+辛伐他汀（simvastatin,SV,1.0 mmol /L+SV）及高磷+SV (3.0 mmol /L+SV）培养基中培养24 h,Western Blot评价Ras同源物基因家族成员A（ Ras homolog gene family, member A, RhoA）,Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1/2 ( rho-associated coiled coil forming protein kinase 1/2, ROCK1/2 ),细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase-mitogen activated protein kinase, ERK-MAPK）、磷酸化细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶（ phosphorylated-ERK-MAPK, p-ERK-MAPK）、p38丝裂原活化蛋白激酶 ( p38-Mitogen Activated Protein Kinase , p38-MAPK)、磷酸化 p38-丝裂原活化蛋白激酶 （phosphorylated-p38-MAPK, p-p38-MAPK ）、以及精氨酸酶1（arginase1,ARG1）和一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase, NOS ）蛋白的表达,比色法和膜联蛋白V/碘化丙啶双染法 ( Annexin V-FITC/ propidium iodide, Annexin V-FITC/PI ) 检测ARG活性和细胞凋亡率。结果 高磷组RhoA,ROCK1/2,p-ERK MAPK,ARG1表达均上调, ARG活性升高,NOS表达下调,细胞凋亡增加;RhoA抑制剂SV能抑制高磷环境下p-ERK MAPK的活化和ARG1 的表达,降低ARG1活性,促进NOS表达,减少内皮细胞凋亡。结论 高磷环境HUVECs可通过RhoA/ROCK途径激活p-ERK MAPK的表达, 增加ARG活性,抑制NOS表达,引起内皮细胞凋亡;SV可以通过抑制RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路,改善内皮细胞凋亡。     

黄芪水提物对健康人尿钠排泄的影响及机制研究

目的 探讨黄芪水提物（ARE）对健康人的利尿利钠作用及其机制。方法 采用双盲交叉试验。12名健康男性志愿者口服生理盐水（10ml／kg）后随机分为ARE组和安慰剂组，2周洗脱期后再进行试验。结果 与安慰剂组相比，ARE组尿钠排泄量（UNaV）在1．5h和2h分别增加73％和43％，2h时达高峰[（0．30±0．05）比（0．21±0．02）mmol／min，P〈0．05]，4h时作用基本消失。尿钠排泄分数（FENa）和尿氯排泄量（UαV）也显著增加，均在2h达高峰，而尿量、尿钾及尿肌酐排泄量在服药4h内均无增加，12h和24h尿量及尿电解质排泄量也无改变。口服ARE后血浆心钠素浓度（pANP）、尿环磷酸鸟苷排泄量（UcGMPPV）及UcGMP V／pANP比值均在2h显著增加（P〈0．05）。U Na V与血浆pANP、UcGMPV及UcGMPV／pANP比值正相关（P均〈0．05），而与Ccr无相关（r=0．153，P〉0．05）。结论 ARE能增加健康人尿钠排泄，其机制与ARE促进ANP产生以及增加ANP肾脏活性有关。     

尿酸排泄分数与肾功能关系的研究

目的 探讨慢性肾脏病患者中,尿酸排泄分数与肾功能的关系。方法 搜集检测24h尿相关指标的慢性肾脏病患者245例,根据尿酸排泄分数（fraction excretion of uric acid, FEUA）的四分位数间距分为4组（FEUA 1~4）,分析尿酸排泄分数与肾功能的关系。运用相关性分析,研究FEUA与预估肾小球滤过率（eGFR）、24h尿蛋白的关系。采用Logistic回归方法分析各临床指标与肾功能的关系。结果 随着FEUA的逐渐升高,eGFR逐渐降低;而且FEUA与eGFR负相关（r=-0.591, P<0.0001）;FEUA与24h尿蛋白正相关（r=0.408,P<0.0001）。Logistic回归表明,FEUA与肾功能相关（OR=1.085,95%CI=1.008~1.167,P=0.035）。结论 在慢性肾脏病患者,FEUA是肾功能的危险因素;而且FEUA水平越高,肾功能越差。     

高磷诱导内皮细胞凋亡的代谢组学以及MAPK通路研究

目的研究高磷对血管内皮细胞代谢影响并观察MAPK通路变化情况。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）24 h,分为正常浓度组（1.0 mmol/L）、高磷浓度组（3.0 mmol/L）。通过气相色谱/质谱（gas chromatography/mass spectrometry,GC/MS）方法分析代谢物图谱,并采用正交信号校正和偏最小二乘判别分析方法（OSC-PLS-DA）。根据OSC-PLS-DA模型的变量权重（variable importance for projection,VIP）〉1及显著性差异检验结果筛选出差异性代谢物。同时用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western印记法检测MAPK通路ERK1/2、p-ERK1/2、p38 M APK、p-p38 M APK、JNK、p-JNK蛋白表达。结果鉴别出16个显著差异物质,涉及碳水化合物、氨基酸以及脂质代谢通路紊乱;与1.0 mmol/L Pi组相比,3.0 mmol/L Pi组细胞凋亡率明显升高（P〈0.05）,p-ERK1/2蛋白表达明显升高（P〈0.05）,p-p38 M APK蛋白表达明显下降（P〈0.05）,ERK1/2、p38 M APK、JNK和p-JNK蛋白表达无明显改变。结论高磷诱导内皮细胞凋亡是通过上调p-ERK信号通路及下调p-p38MAPK信号通路的活性来实现的。