基于上转发光免疫层析技术的常见食源性致病菌快速检测方法研究与评价

目的：研制针对4种常见食源性致病菌：甲型副伤寒沙门菌（ Salmonella paratyphi A）、乙型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi B）、大肠埃希菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7）、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的基于上转发光免疫层析技术（ UPT－LF）的快速定量检测试纸，并对其检测性能进行评价。方法以上转发光纳米颗粒（ UCP－NPs）作为示踪物，基于双抗体夹心检测模型，研制针对上述4种靶标菌的UPT－LF试纸；以4种靶标菌的系列浓度标准菌悬液作为标准样品，评价试纸的敏感性、特异性、线性和精密性，并进行模拟染菌食品的检测，评价模拟样品阳性检出率。结果针对4种靶标菌的UPT－LF试纸均具有良好的线性，相关系数r为0．985～0．996；检测敏感性达105～106 CFU／ml，与其他近缘菌株无交叉反应；对乳制品、饮料、小食品、水产、肉类等细菌污染的食品检出率较高。结论该研究建立的对4种常见食源性致病菌进行快速检测的UPT－LF，简便快速，具有良好的敏感性、特异性和线性定量能力，操作性能可满足食品安全检测的要求。  

老年糖尿病药物治疗进展

老年糖尿病是指60岁以后发生或之前发病而延续到60岁以后的糖尿病，绝大多数为2型糖尿病。据调查，60岁以上老年人群2型糖尿病患病率为11．3％，糖耐量减低发生率为11．6%。  

1例红皮病型银屑病合并败血症及代谢综合征患者的护理

对1例银屑病合并代谢综合征的患者并发败血症的原因进行分析,认为进食刺激性食物导致多处皮损是造成此次感染的主要因素.护理人员采取针对性护理措施,严格执行保护性隔离、加强皮肤及口腔黏膜的护理、注重饮食的护理和强调心理护理的重要性,患者康复出院.因此,行之有效的护理措施是促进患者早日康复的关键.  

基于上转发光免疫层析技术快速检测单核细胞增生李斯特菌

目的：建立可快速检测单核细胞增生李斯特菌（ Listeria monocytogenes， LM）的上转发光免疫层析技术（ up-converting phosphor technology based lateral flow assay ， UPT-LF），即LM-UPT-LF。方法针对LM特异的p60蛋白制备单克隆抗体，并与上转发光纳米颗粒（ up-converting phosphor nanoparticles ， UCP-NPs）共价偶联作为结合物，采用双抗体夹心免疫层析模式建立LM-UPT-LF，并对其敏感性与特异性进行评价。结果建立了可快速检测LM的LM-UPT-LF平台，在样本＜10 cfu、10～99 cfu、100～1000 cfu绝对LM污染量条件下可分别在培养20、18、16 h检出阳性。其他13种食源性致病菌在高浓度（109 cfu／ml）时无非特异性交叉。结论所建立的LM-UPT-LF操作简便快速，具有良好的敏感性和特异性，适用于一线病原调查与检测。  

糖尿病患者围手术期的血糖控制

糖尿病患者围手术期血糖控制与预后息息相关，临床数据显示糖尿病患者术后感染、切口不愈合等并发症明显高于普通人群。本文就围手术期血糖波动对机体的影响及如何控制围手术期血糖近年来的研究进展进行综述。  

应用同源重组技术构建小鼠Cchl1a3基因R528H突变型打靶载体的策略

目的构建小鼠Cchl1a3基因R528H突变型基因敲入打靶载体,模仿低血钾周期性麻痹患者中的对应发现。方法采用置换型载体,分为长短、短臂设计（1.5～2.0kb）,以便用聚合酶链反应（PCR）方法筛选中靶载体和ES细胞（embrgonic stem cell）。首先以Cchl1a3基因为模板设计引物,并引入与质粒内插入位点酶切序列相配的内切酶序列,扩增用于套取的同源臂a和b,以及用于插入筛选基因和实行定点突变的同源臂c和d,c和d首尾相接,用点突变特异性PCR在c内实现R528H突变。将a和b定向插入pBR322,借助于温度敏感的pSC101-BAD-gba-（tet）质粒的表达Red/ET重组酶,使其与携带Cchl1a3基因的细菌人工染色体（BAC）实现同源重组,套取含目的突变点、长约8kb的Cchl1a3的基因片断,形成pBR322-Cchl1a3。将c和d定向插入PL451质粒Frt-Neo-Frt片段两侧,酶切c-Frt-Neo-Frt-d片断纯化后,再与pBR322-Cchl1a3质粒一同转入含Red/ET重组酶基因的大肠杆菌EL250菌株,在重组酶的催化下再次实现同源重组,在Cchl1a3基因的给定位点实现R528H突变并插入包含筛选基因和重组酶识别位点的Frt-Neo-Frt片断,完成载体的构建。载体构建过程中,酶切位点变化导致的片断程度改变作为初筛,PCR产物测序结果作为最后的鉴定依据。结果打靶载体符合设计要求。结论运用点突变特异性PCR,结合Red/ET重组技术构建基因定点突变的基因敲入型打靶载体,在重组酶催化下仅需要2次同源重组即可完成。该策略成熟简便,省时省力,构建的载体易于鉴定。  

改变胰岛素注射部位消除频发低血糖1例

1临床资料 患者，男性，26岁，因“发现血糖升高6年，反复意识丧失5年”于2009年11月入院。患者于2003年12月无明显诱因出现头晕、乏力、嗜睡，腹胀，体质量下降，查尿糖（＋＋＋＋）、尿酮体（＋＋＋＋），空腹血糖20．0mmol／L，餐后2h血糖28mmol／L，  

非胰岛细胞肿瘤性低血糖

非胰岛细胞瘤性低血糖（NICTH）泛指由胰岛细胞瘤之外的其他肿瘤导致的低血糖症,肿瘤分泌的非胰岛素物质代替胰岛素发挥胰岛素的降血糖作用,导致低血糖发生,而机体本身的胰岛素分泌却受到抑制。最主要的非胰岛素物质是肿瘤分泌大分子的胰岛素样生长因子-2（bIGF-2）,它与正常的胰岛素样生长因子IGF-2不同,不能与IGF结合蛋白形成大分子的复合物,而是以小分子或游离方式存在于组织间液中,易于IGF受体结合,刺激肝外组织过度利用葡萄糖,致使低血糖发生。其具有发病年龄大、症状重、巨大肿瘤、胰岛素分泌受抑制、bIGF-2高分泌等特点。治疗以手术为主,如不具备手术指征,应以缓解低血糖发作为目标。  

自身免疫性多腺体综合征合并骨髓异常增生综合征1例

患者,女性,67岁.因多饮、多尿、多食,易饥伴消瘦15年,加重1周于1993年10月17日入院.1978年因上述症状诊断为“糖尿病Ⅱ型”,给予饮食治疗及磺脲类降糖药治疗,症状无改善,改用胰岛素治疗症状缓解.1986年因怕冷、乏力、纳差,查T_3、T_4低于正常,促甲状腺素(TSH)增高,诊断为“原发性甲状腺功能低下”,给甲状腺素片替代治疗后症状消失.同年因心慌气短、活动后加重,查Hb46g/L,  

甲亢合并硬皮病1例报告

甲减合并硬皮病偶见报道,但以甲亢合并硬皮病更为罕见,国内曾报道1例以甲亢起病而后转为甲减伴硬皮病.我们所见1例甲亢伴硬皮病发病二年无甲减的证据,现报告如下.