蛇床子素对人鼻咽癌细胞CNE2细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响，寻找鼻咽癌综合治疗的新思路。方法  以蛇床子素不同梯度浓度处理CNE2细胞，采用MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡，RT-PCR和Western blot分别测定Bax、Bcl-2mRNA和蛋白的表达水平。结果　蛇床子素处理CNE2细胞24、48、72 h对细胞增殖均有不同程度抑制作用，且呈时间、剂量依赖性（P <0.05）。蛇床子素干预CNE2细胞48 h后，流式细胞术结果表明细胞凋亡率显著升高（P <0.01），RT-PCR与Western blot检测提示Bax mRNA、蛋白表达显著增加，而Bcl-2 mRNA及蛋白明显下调（P <0.01），均呈浓度依赖性。结论　蛇床子素对CNE2细胞具有抑制增殖和促进凋亡的生物学效应。     

CEA与CA15-3联合检测在乳腺癌诊断中的临床意义

目的:探讨癌胚抗原(carcinoembryo antigen,CEA)与肿瘤相关糖类抗原15-3(carbohydrate antigen15-3,CA15-3)联合检测在乳腺癌诊断中的应用价值。方法:采用电化学发光方法检测116例乳腺癌患者与94例乳腺良性肿瘤患者血清中CEA与CA15-3水平并进行统计学分析。结果:乳腺癌患者血清中CEA与CA15-3水平明显高于乳腺良性肿瘤对照组(P<0.01);二者联合检测诊断敏感性显著提高(P<0.05);治疗后CEA与CA15-3含量与治疗前相比显著无明显变化(P>0.05)。结论:CEA与CA15-3联合检测可提高乳腺癌诊断敏感性,对临床诊断与疗效评价有一定的应用价值。     

外周血循环RNA与肿瘤诊断

 研究发现外周血循环RNA含量在多种恶性肿瘤患者血清中特异性升高,是潜在的肿瘤诊断的生物学标志和药物治疗靶点。通过分子生物学技术检测肿瘤循环RNA,将为恶性肿瘤的早期诊断与筛查、预后评价和疗效监测提供敏感高效、方便快捷、特异、无创或微创的检测方法。     

联合检测血清CEA与CYFRA21-1在肺癌诊断中的应用

目的：探讨癌胚抗原（CEA）与细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）联合检测在肺癌诊断中的应用价值。方法：采用电化学发光方法检测116例肺癌患者与10例正常人血清中CEA与CYFRA21-1的水平。结果：肺癌患者血清中CEA与CYFRA21-1水平明显高于健康对照组（P〈0.05）;CEA与CYFRA21-1在肺癌中的检测率分别为41.2%与42.6%,二者联合检测敏感性与准确性均有明显提高;治疗后CEA与CYFRA21-1含量与治疗前相比显著降低（P〈0.05）。结论：CEA与CYFRA21-1联合检测可明显提高肺癌诊断阳性率,对临床诊断与疗效评价有一定的应用价值。     

肺癌肿瘤抑制因子1与肿瘤的发生发展

肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)介导细胞间相互黏附、胞内信号传导及免疫调节,在抑制肿瘤细胞侵袭和转移方面发挥着重要作用.TSLC1作为分子诊断标记物和药物治疗靶点,具有极大的应用潜力,探索其在肿瘤发生发展中的作用及其机制已成为当今的研究热点之一.     

表皮生长因子受体2和血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌中人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达与胃癌的发生、发展的关系,及作为分子靶点指导胃癌患者临床用药的意义。方法采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)的方法检测103例胃癌患者HER2及VEGF的状态,同时联合荧光原位杂交的方法检测HER2的状态,并与患者的临床资料进行相关性分析。结果①胃癌中HER2扩增率约为11%(11/103),在阳性病例中IHC与荧光原位杂交(fluorescentin situ hydridization,FISH)方法的符合率为90%,具有相关性(P<0.01);②HER2的扩增与胃癌的病理分级、淋巴结转移与否及Lauren分型相关(P<0.05);③胃癌中VEGF表达阳性率约为24%(25/103),VEGF的阳性表达与肿瘤的浸润深度、病理分级、Lauren分型相关(P<0.05);④HER2的表达与VEGF的表达不相关(P>0.05)。结论 HER2、VEGF的阳性表达与胃癌特别是分化较好的胃管状腺癌的发生、发展密切相关。联合检测HER2及VEGF在胃癌(特别是肠型胃癌)中的表达对了解胃癌的发生、发展,及靶向药物曲妥珠单抗和贝伐单抗的选择具有重要意义。     

三氧化二砷对鼻咽癌BALB/c小鼠移植瘤的放射增敏作用

目的通过动物移植瘤模型探讨三氧化二砷对鼻咽癌的放射增敏作用。方法将荷SCNE-1鼻咽癌的BALB／c小鼠随机分为对照组和综合组，对照组给予单纯放射治疗，不给予药物处理，下设空白对照、2、4和6Gy4个不同的放射剂量亚组；综合组所有动物均行药物治疗，下设药物对照组(单纯用药，不照射)、2、4和6Gy4个不同的放射剂量亚组，综合组于肿瘤成活后连续6d经腹腔注射三氧化二砷，药物剂量为4mg/kg鼠重；第7天移植瘤局部给予140kV深部x射线一次性照射。每组(或亚组)各4只小鼠。结果对照组中2、4和6Gy亚组移植瘤体积达到照射前4倍的时间(TCT4)较空白对照组分别延长了1．7、7．8和11．8d；综合组移植瘤TCT4较药物对照组分别延迟了2．2、13．2和24．2d。生长延迟4、8和10d时的肿瘤生长延迟增敏比分别为1．55、1．71和1．77。结论三氧化二砷在BALB／c小鼠体内对鼻咽癌移植瘤有放射增敏作用。     

蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响

目的研究蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,并探讨其调节CNE2细胞上皮问质转化（EMT）的分子机制。方法体外培养CNE2细胞,以0、20、40、80μg／ml蛇床子素分别处理CNE2细胞24、48h后,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、Transwell实验分别检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以0μg/ml蛇床子素处理组为对照组。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting方法分别检测EMT标志物上皮钙黏着蛋白（E-eadherin）、波形蛋白（vimentin）及Writ／β-eatenin信号通路组分B．eatenin、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）的转录和蛋白表达水平。结果作用24h和48h后,0、20、40、80μ/ml蛇床子素处理组细胞增殖抑制率分别为0．00％±0．00％、7．45％±0．87％、14．12％±2．29％、27．26％±0．43％和0．00％士0．00％、13．44％±0．84％、29．03％±0．78％、57．49％±1．70％,差异均有统计学意义（F=174．33,P〈0．001;F=1041．40,P〈0．001）,进-步两两比较,差异均具有统计学意义（均P〈0．01）。采用不同浓度的蛇床子素（0、20、40、80μg/ml）处理CNE2细胞48h后,细胞迁移细胞数分别为52．13±4．49、29．00±4．49、18．50±1．93、13．75±2．77,差异有统计学意义（F=200．37,P〈0．001）,进-步两两比较,差异均具有统计学意义（均P〈0．01）。采用不同浓度的蛇床子素（0、20、40、80μg/ml）处理CNE2细胞48h后,细胞侵袭数分别为46．63±2．87、24．13±2．87、16．75±5．29、11．00±1．77,差异有统计学意义（F=131．92,P〈0．001）,进-步两两比较,差异均具有统计学意义（均P〈0．01）。采用不同浓度的蛇床子素（0、20、40、80μg/ml）作用于人鼻咽癌CNE2细胞48h后,β-cadherinmRNA（1．00±0．13、2．61±0．03、3．12±0．09、3．60±0．06;F=20．92,P〈0．001）和E-cadherin蛋白表达（0．22±0．03、0．35±0．01、0．60±0．04、0．82±0．03;F=178．63,P〈0．001）差异有统计学意义,进-步两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。同时,采用不同浓度蛇床子素（0、20、40、80μg/ml）处理CNE2细胞48h后,vimentin的mRNA表达（1．00±0．12、0．68±0．03、0．56±0．01、0．40±0．09;F=9．48,P〈0．010）、B-eatenin的mRNA表达（1．00±0．14、0．78±0．04、0．69±0．07、0．46±0．12;F=4．84,P〈0．050）和eyelinD1的mRNA表达（1．00±0．09、0．82±0．03、0．58±0．09、0．40±0．03;F=9．49,P〈0．010）差异均有统计学意义,各组间进-步两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;vimentin的蛋白表达（0．85±0．02、0．74±0．01、0．34±0．01、0．27±0．01;F=610．58,P〈0．001）、B-eatenin的蛋白表达（0．83±0．00、0．44±0．02、0．39±0．00、0．23±0．03;F：985．74,P〈0．001）、cyelinD1的蛋白表达（0．86±0．02、0．67±0．00、0．35±0．01、0．25±0．0l;F=910．57,P〈0．001）差异均有统计学意义,各组间进-步两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论蛇床子素可抑制CNE2细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能与调节Wnt／β-catenin信号通路进而抑制EMT过程有关。     

吉西他滨对人鼻咽癌耐药细胞放射敏感性的影响

中国南方的鼻咽癌以低分化或未分化性非角化癌(WHO分型Ⅱ和Ⅲ型)多见,对放化疗敏感,但是对于首程含顺铂(DDP)的治疗后复发或转移的患者,以顺铂为基础的化疗疗效欠佳,这在很大程度上是由于肿瘤细胞产生了耐药性.     

三氧化二砷抑制人鼻咽癌细胞侵袭的体外实验研究

 目的 观察三氧化二砷(As₂O₃)对人鼻咽癌细胞株HNEl-LMPl侵袭、转移的影响。方法 鼻咽癌细胞在含3μmol／L的As₂O₃培养基中培养48小时。然后在无含砷的培养基中继续培养48小时后，收集此时间点贴壁的细胞作为研究对象；用细胞-基质黏附实验、细胞运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭实验检测As₂O₃对HNEl-LMPl细胞黏附、运动及侵袭能力的影响；用激光共聚焦的方法检测EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(LMPl)的表达情况。结果 肿瘤细胞-基质黏附实验结果显示，经As₂O₃处理的HNEl-LMPl细胞，其黏附能力(平均吸光度为0．524±0．09)低于对照组细胞(平均吸光度为0．665±0．14)，两者相比有差异(P<0．05)。运动实验和肿瘤细胞重组基底膜侵袭结果均显示，经As₂O₃处理后，穿过游离的聚乙烯吡咯烷酮膜(PVP-F)的肿瘤细胞数明显减少(P<0.01)，同时As₂O₃能够下调LMPl的表达。结论As₂O₃具有抗人鼻咽癌细胞株转移的潜力，其机制可能与抑制LMPl的表达相关。