基于Arlequin软件的HLA单倍型分析研究

目的应用Arlequin软件进行HLA单倍型的分析。方法将HLA-A和B两基因座位的等位基因分型数据进行格式转换,编辑成.arp格式输入文件,导入Arlequin软件进行分析计算。结果用Arlequin软件进行HLA单倍型分析,直接得出各单倍型及等位基因的频率和统计表,分析得出19种HLA-A等位基因、39种HLA-B等位基因和128种A-B单倍型。结论 Arlequin软件可用于HLA单倍型的计算,该方法具有简便、快速、广谱、可操作性强的特点。     

涎腺癌肉瘤3例临床病理观察

目的探讨涎腺癌肉瘤的临床病理特点,加深对该肿瘤的认识。方法回顾性分析3例涎腺癌肉瘤的临床病理资料,并进行随访。结果 3例中男性2例,女性1例。年龄66~68岁,平均年龄67岁,中位年龄67岁。2例以无痛性肿物就诊,1例肿物伴疼痛。3例分别发生于右侧腮腺、左侧颌下腺及右侧咽旁间隙。均无涎腺多形性腺瘤病史。组织学上,3例中1例以肉瘤为主,1例以癌为主,1例肉瘤与癌比例相当。肉瘤成分,2例为平滑肌肉瘤,1例为纤维肉瘤;癌成分,3例均包括导管癌和鳞状细胞癌,其中1例还包括少量未分化癌。3例肿瘤中均未发现多形性腺瘤成分。免疫组化:肉瘤成分vimentin均(+),癌成分CK均(+);导管癌AR均(+)。3例中1例肉瘤成分与未分化癌成分呈CK和vimentin双(+)。随访2例,随访时间3~5个月,未出现复发及转移。失访1例。结论涎腺癌肉瘤发病罕见,确诊需依靠组织病理检查,免疫组化染色有助诊断。文献表明该肿瘤恶性程度高,预后差,需长期随访。     

柯萨奇病毒A16型灭活疫苗保护效果研究北大核心CSCD

目的:研究柯萨奇病毒A 16型候选疫苗株(CA 16-KM)经灭活后免疫小鼠,对病毒攻击的保护效果。方法:用Vero细胞进行CA 16-KM株培养,病毒收获后经浓缩、蔗糖密度梯度离心进行纯化及β-丙内酯灭活,用酶联免疫吸附法(ELISA法)对灭活后的CA 16-KM病毒液进行抗原含量的测定并在Vero细胞上盲传3代对灭活后CA 16-KM毒株的残余毒力进行检测。灭活后的病毒加入氢氧化铝佐剂(质量浓度为1 mg·mL^(-1)),经离心及PBS重悬,制成实验性灭活疫苗。分别于第0天和第14天经肌肉注射免疫8周龄ICR母鼠,对照组用等体积PBS代替。分娩后24 h内的新生乳鼠用100 LD_(50)的CA 16强毒株(CA16-CC)经颅内注射进行攻毒,攻毒后连续21 d观察其临床症状,研究该灭活疫苗对新生乳鼠的保护效果。结果:经β-丙内酯灭活后的CA 16-KM在Vero细胞上盲传3代均无细胞病变效应(CPE)出现,灭活后的CA 16-KM抗原含量为320 EU·mL^(-1)。经注射实验性疫苗的乳鼠攻毒后全部存活,表明CA 16-KM株制备的灭活疫苗诱导的免疫反应可对新生乳鼠产生100%的保护作用。结论:β-丙内酯对CA 16-KM毒株的灭活效果较好;CA 16-KM疫苗候选株灭活后具有良好的免疫原性,可以保护新生乳鼠抵抗CA 16病毒的攻击,也许是研制CA 16灭活疫苗的理想毒株。     

柯萨奇病毒A组16型感染性滴度检测用国家参考品的制备及标定

目的 制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品.方法 将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品.3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定,用细胞培养法检测CA16感染性滴度,用Behrens-K(a)rber法计算半数细胞感染量(50％ cell culture infective does,CCID50).同时,将CA16参考品分别置于-20、4、22～25(室温)和37℃条件下或反复冻融,进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究.结果 制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.CA16参考品于-60℃保存12个月、-20℃保存6个月和4℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降,表明稳定性较好;在22～25℃(室温)和37℃条件下,CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4％和4.4％,而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降;对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8％/次.结论 成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品,将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.     

100例RhD初筛阴性孕妇D放散型表型筛查及基因型分析

目的对100例Rh D阴性孕妇进行D放散型(Del)表型筛查及基因型分析,同时进行抗体筛查和鉴定,以指导Del血型孕妇的产前监测。方法 2016年2月—2016年11月期间,收集100例多次妊娠且初筛为Rh D阴性的孕妇外周血标本,采用抗球蛋白凝胶卡法检测Rh D血型,抗球蛋白凝胶卡法进行直接抗球蛋白试验;采用Rh血型分型卡检测Rh CE抗原;抗球蛋白凝胶卡法进行不规则抗体筛查及抗体鉴定。采用吸收放散试验进行Del血型表型鉴定,同时采用序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)进行RHD*01EL.01(RHD*1227A)等位基因检测,应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)对Del表型标本RHD基因合子型进行进一步分析;对D变异型标本,进行D抗原表位检测(D-Screen)和RHD基因10个外显子的PCR扩增及直接测序分析。结果 100例标本中检出Del表型27例(27%),均没有产生抗-D,其中21例Rh CE抗原分型为Ccee(77.8%),4例为CCee(14.8%),2例为Cc Ee(7.4%);25例RHD基因型为RHD*01EL.01/01N.01(92.6%),2例RHD*01EL.01/RHD*01EL.01(7.4%)。此外还检出D变异型4例(4%),其中包括2例部分DⅥ3,1例弱D25和1例弱D15,均未产生抗-D。检出Rh D真阴性血型69例,其中产生抗-D 9例(12.7%),且有2例合并抗-C;产生抗-c E合并抗-Jkb1例。结论携带有RHD*01EL.01等位基因的"亚洲型"Del血型孕妇在Rh D阳性胎儿的免疫刺激下,很可能不会产生抗-D,属于完全性Del(complete Del)血型。     

术中冰冻病理诊断对眼睑肿物切除的价值探讨及病理类型分析

目的 探讨送检术中冰冻病理诊断（frozen sections, FS）的眼睑肿物病理类型及其对眼睑肿物和切缘的诊断准确率,分析FS与石蜡病理诊断不一致的常见原因。方法 选取2016年12月至2021年12月首都医科大学附属北京同仁医院送检FS眼睑肿物标本561份,分析眼睑肿物的病理类型,并以石蜡病理诊断为金标准,分析FS对眼睑肿物和切缘的诊断准确率。结果 561份标本中,左眼280份,右眼281份;上睑225份,下睑311份,内眦18份,外眦7份;肿物最大直径1～35 mm,平均（15.1±9.4）mm。其中良性病变165份（29.4%）,位居前三位的分别为炎性病变、色素痣和脂溢性角化病;恶性病变396份（70.6%）,位居前三位的分别为基底细胞癌、皮脂腺癌和鳞状细胞癌。FS对肿瘤和切缘的诊断准确率分别为97.1%、99.3%,肿瘤延迟诊断率为6.2%。肿瘤诊断不一致类型为误分类（60.0%,9/15）、假阴性（26.7%,4/15）及假阳性（13.3%,2/15）。诊断不一致的原因为解读失误（73.3%,11/15）、制片失误（26.7%,4/15）。结论 送检FS的眼睑肿物以恶性...     

从“久病入络”论慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化演变

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种常见的慢性呼吸系统疾病,临床表现为持续存在的、不完全可逆的、进行性加重的气流受限;而肺间质纤维化以弥漫性肺泡炎症和间质纤维化为特征。目前,慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化患者较常见。久病入络理论体系由来已久,后世医家深受"久病入络"理论体系的影响并加以创新。基于"久病入络"理论的认识,结合肺的生理病理特点,能够很好的用于阐述慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化患者的演变过程。该文将分别从病机、病变部位、病理变化、疾病性质四方面进行论述,有利于深入分析两种疾病之间的关联,对慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化患者的治疗有重要临床意义,为化瘀通络治法提供理论依据。     

从脏腑辨证论治间质性肺疾病

间质性肺疾病(ILD)是一组以肺泡单位的炎症和间质纤维化为基本病变的异质性非肿瘤和非感染性肺部疾病的总称。中医认为间质性肺疾病的病变部位主要在肺,与肝、脾相关联,随着疾病的进展,日久则及心、肾。本病在不同发展阶段,可累及不同脏腑,造成不同外在表现,这些与脏腑间的相互作用关联密切。脏腑辨证,是在认识脏腑生理功能、病理特点的基础上,将四诊收集的资料分析整合,从而辨明疾病所在脏腑部位及其病性的辨证方法。基于脏腑辨证认识ILD的病机、发生发展规律,采取相应治则治法,使中医更好地用于ILD的治疗。     

全自动冷冻切片染色机在病理科的应用

正冷冻切片因其操作简便快捷,可以快速得到诊断报告,因此在临床中常用于术中快速病理诊断,有利于决定手术方式和手术范围,也可使患者免受二次手术的痛苦~[1,2]。多年来,冷冻切片的染色一直以传统手工染色为主。然而随着临床技术的发展,手术患者逐渐增加,冷冻送检标本数量明显攀升。短时间内制作大量冷冻切片给病理技术人员带来了很大的挑战。本文使用全自动冷冻切片染色机对本科室常     

比较不同方法在检测Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达中的应用北大核心CSCD

胶原是构成人体细胞外基质的重要组成部分,其主要类型为Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原。胶原的异常沉积可见于多种病理改变中,如在皮肤增生性瘢痕和器官纤维化等疾病过程中,均伴有肌成纤维细胞的分化和胶原表达的上调,最终造成组织收缩和瘢痕形成,影响机体正常功能。检测胶原表达的方法多种多样,在选择使用何种方法时常常使实验人员难以抉择。我们通过体外培养骨髓间充质干细胞（bone marrow－derived mesenchymal stem cell,BMSC）,经过诱导刺激使其向肌成纤维细胞分化,并使用多种方法检测其Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达,并对各方法的优缺点进行比较。