两种猕猴桃果汁对^60Co—γ照射小鼠骨细胞的保护作用

选用两种不同品种的猕猴桃果汁,观察并比较了其对60Co-γ射线照射后小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓细胞DNA合成及染色体畸变的影响.     

硝基还原酶/CB1954自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞杀伤效应的实验研究

目的:体外观察大肠杆菌硝基还原酶/[5-(1-氮丙啶)-2,4-二硝基苯甲酰胺](以下简称NTR/CB1954)自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞的杀伤效应,探索一种新的宫颈癌基因治疗方法.方法: 利用PCR技术从Escherichia coli K12的基因组中扩增出编码NTR的基因nfsB,酶切后,连接到真核表达载体pcDNA3上,获得重组载体pcDNA3-nfsB,lipofectamineTM2000脂质体转染法将pcDNA3-nfsB转染Hela细胞,筛选稳定表达细胞株,应用RT-PCR以及SDS-PAGE检测NTR在Hela细胞中的表达,MTT法检测NTR/CB1954对Hela细胞活力的影响,流式细胞术检测亚二倍体细胞率改变,PI/Hoechest33258双染荧光显微镜下观察Hela细胞凋亡率.结果: 成功构建了真核表达载体pcDNA3-nfsB,获得稳定表达NTR的Hela细胞株,在mRNA水平以及蛋白水平检测到NTR在Hela细胞中的表达,NTR/CB1954自杀基因系统明显影响Hela细胞的活力,增加了Hela细胞的凋亡率.结论: NTR/CB1954自杀基因系统对Hela细胞在体外通过凋亡产生明显的杀伤效应.     

苯并（a）芘对人血淋巴细胞的遗传损伤作用研究Ⅱ、苯并（a）芘DNA损伤作用研究

本研究第2部分，应用DNA共价结合试验．非程序DNA合成(UDS)试验、DNA解螺旋荧光分析(FADU)试验和DNA复制合成抑制(DRSI)试验，综合检测了苯并(a)芘(BaP)对人血淋巴细胞的DNA损伤作用．人血淋巴细胞来源和分离方法，UDS，FADU、DRSI试验的细胞染毒浓度和条件均与本研究第1部分相同．     

辐射损伤对HRAD17基因转染不同类型细胞的影响

目的 探讨HRAD17在DNA辐射损伤修复及辐射诱导的凋亡中的作用。方法 利用基因转染技术，对小鼠成纤维细胞NIH3T3和人宫颈癌HeLa细胞均分别转染pDOR-neo载体，pDOR-HRAD17s（正义）和pDOR-HRAD17a（反义）质粒，G418筛选获得阳性克隆。转染后各组细胞去血清培养48h同步化后给予。Co7射线10Gy照射，吸收剂量率为2．54Gy／min，加入完全培养基继续培养，并于0、6、12、14、36和48h收集固定细胞，碘化丙啶（PI）避光染色后，流式细胞仪检测细胞DNA量。结果 在辐射损伤后，转染正义HRAD17的成纤维细胞主要发生G1／S期阻滞，转染正义HRAD17的肿瘤细胞主要发生G2/M期阻滞；转染正义HRADl7的细胞凋亡比例降低，转染反义HRAD17的细胞凋亡比例升高。结论 HRAD17同时参与细胞周期G1／S和G2/M期阻滞，并抑制辐射损伤诱导的细胞凋亡。     

γ射线联合HSV-tk/GCV基因治疗系统抗肿瘤体外实验研究

目的研究γ射线与人单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）／丙氧鸟苷（GCV）基因治疗系统联合应用对Lewis肺癌细胞的杀伤作用及其可能机制。方法以脂质体介导法将含HSV—tk基因的真核表达质粒体外转染小鼠Lewis肺癌细胞，建立稳定表达的细胞株；RT-PCR检测细胞tk基因表达；Hoechst33258/PI荧光活染、流式细胞术检测γ射线与HSV-tk／GCV系统单独及联合作用下的细胞凋亡；集落形成法检测细胞存活曲线，反映放射敏感性变化；同时检测旁观者效应及γ射线对该效应的影响。结果HSV-tk／GCV系统对转染基因的Lewis细胞（Lewis-Hytk细胞）具有选择性杀伤作用。γ射线与HSV-tk／GCV系统联合应用可使Lewis-Hytk细胞的凋亡和坏死率显著高于二者单独作用之和。0．1μg/ml GCV可使Lewis-Hytk细胞的放射敏感性明显增高（SER=1．47）。γ射线可增强HSV-tk/GCV系统的旁观者效应，二者联合作用后的Lewis-Hytk细胞的培养液对未处理过的Lewis细胞具有杀伤作用。结论γ射线与HSV-tk／GCV系统联合应用对Lewis肺癌细胞具有协同杀伤效应。γ射线增强HSV—tk／GCV系统的旁观者效应可能是其协同效应产生的机制之一．     

两种猕猴桃果汁对~(60)Co-γ照射小鼠骨髓细胞的保护作用

选用两种不同品种的猕猴桃果汁,观察并比较了其对６０Ｃｏ－γ射线照射后小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓细胞ＤＮＡ合成及染色体畸变的影响。１　材料与方法１．１　猕猴桃品种及果汁制备实验选用的猕猴桃Ａ为从新西兰选种、国内某地出产的ＦｒｕｉｔｉｎｇＭａｌｅ猕猴桃;猕猴桃Ｂ为江西农科院育种、浙江临海市出产的魁蜜种猕猴桃。果实制成匀浆,经４℃、８０００ｒ／ｍｉｎ离心１５分钟制得果汁。１．２　动物及分组处理选用昆明种雄性小鼠,体重１８～２２ｇ,北京医科大学动物部提供。实验分８组,染色体畸变试验分４组。阴性对照和照射…     

HPV18E6基因沉默对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响

目的：观察RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达对宫颈癌Hela细胞牛长和凋亡的影响，探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法：针对HPV18E6 mRNA序列合成一对60bp的编码siRNA的DNA模板和一对60bp的非特异性对照DNA模板，构建pSUPER—siRNA和pSUPER—com重组质粒，瞬时转染Hela细胞；采用RT—PCR法检测质粒转染后细胞HPV18E6基因表达的变化，用蛋白免疫印迹法检测转染后Hela细胞p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达变化，以细胞计数法检测细胞生长情况，Hoechest／PI双荧光活细胞染色法检测细胞凋亡。结果：pSUPER—siRNA质粒转染能有效降低HPV18E6在mRNA水平的表达，转染后48小时，抑制效率达70％以上；转染后细胞053、p21和Bax蛋白表达显著增加，Bcl-2蛋白表达减少。RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达后，Hela细胞增殖受到明显抑制，细胞凋亡率明显增加。结论：pSUPER—siRNA质粒转染可有效抑制HPV18E6在人宫颈癌Hela细胞中的表达，抑制Hela细胞生长并促进其凋亡。以HPV18E6为靶点的RNA干扰技术可望成为宫颈癌基因治疗的新途径。     

两种猕猴桃汁抗~（60）Co－γ射线遗传损伤作用的比较

两种猕猴桃汁抗６０Ｃｏ－γ射线遗传损伤作用的比较＊薛宏伟徐厚恩杨业鹏高广花贾凤兰许多研究表明，猕猴桃汁及以其为主配成的饮料或口服液具有明显的抗致突变和抗癌作用，并有一定的广谱性［１］。猕猴桃果实中维生素Ｃ含量一般较高，其含量已成为评定猕猴桃健康效益的...     

苯并（a）芘对人血淋巴细胞的细胞遗传学损伤研究

以不同浓度苯并（ａ）芘（ＢａＰ）对人血淋巴细胞进行体外染毒，运用微核（ＭＮ），染色体畸变（ＣＡ）和姊妹染色单体交换（ＳＣＥ）试验，综合评价了ＢａＰ对人血淋巴细胞的细胞遗传学损伤作用，结果表明，经Ｓ９代谢活化，ＢａＰ可诱发细胞ＮＭ率，ＣＡ率和ＳＣＥ率显著增高，并呈现明浓度－反应关系。上述三指标的变化相互间呈高度正相关。三项指标中与ＢａＰ染毒浓度的对数值呈高度正相关。三项指标中ＳＣＥ试验的浓度－反应关     

硝酸镧灌胃3个月对大鼠骨髓细胞的致染色体畸变作用

目换：为深入探讨稀土元素镧长期摄入的遗传毒性和蓄积作用，在观察了硝酸镧灌胃一个月对大鼠骨髓细胞微核形成和染色体畸变的影响（资料见《中国毒理学会第三届全国学术会议论文摘要集》56页）后，进一步开展了硝酸镧灌胃3个月对大鼠骨髓细胞致染色体畸变作用的实验研究。方法：采用3级雄性Wistar大鼠为实验动物，设3个硝酸镧染毒剂量组和阴性对照组、阳性对照组。每组10只动物。每日灌胃1次，连续灌胃90d。常规方法制备骨髓细胞染色体标本，观察染色体畸变细胞率和染色体畸变率。结果：染色体畸变分析结果显示，经口染毒3个月，硝酸镧每日2mg/kg组骨髓细胞染色体畸变率与阴性对照组相比无显著性差异；而每日20mg/kg和200mg/kg组染色体畸变率较阴性对照组明显增高并呈高度显著性差异（P＜0．01）。并且，20mg/kg组较2mg/kg组，及200mg/kg组较20mg/kg组染色体畸变率也表现出显著增高，呈现剂量－效应关系。与硝酸镧灌胃1个月各相应剂量组比较，灌胃3个月的染色体畸变率仅略有升高，但无显著性差异。硝酸镧致大鼠骨髓细胞染色体畸变的主要类型是单体型断头和断裂。结论：硝酸镧灌胃染毒3个月，在每日20mg/kg及以上剂量可诱发大鼠骨髓细胞染色体畸变，主要表现为染色单体型断裂，且具有明显剂量－效应关系。但灌胃3个月与灌胃1个月比较未呈现出明显蓄积或累加作用。