自噬在高糖条件下视网膜色素上皮细胞表达血管内皮生长因子促进RF/6A细胞血管生成中的作用

目的　研究高糖条件下诱导的人视网膜色素上皮细胞株（ARPE-19）自噬对其表达血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），及恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞（RF/6A）迁移和管腔形成的影响。方法　根据不同干预将ARPE-19细胞随机分为对照组、高糖组及3-甲基腺嘌呤（3-MA）+高糖组。对照组细胞在无糖DMEM培养基中常规培养24 h，高糖组细胞在DMEM培养基中加入30 mmol·L^-1葡萄糖溶液处理24 h，3-MA+高糖组细胞先用10 mmol·L^-1 3-MA处理24 h，然后更换培养基再加入30 mmol·L^-1葡萄糖溶液处理24 h。Western blot法检测细胞自噬标志性蛋白微管相关蛋白1 轻链 3（microtubule-related protein 1 light chain 3，LC3）II型和I型的比值(LC3-II/LC3-I)、Beclin-1及细胞中自噬相关基因3（autophagy-related gene 3，Atg3）的蛋白表达。ELISA法检测ARPE-19细胞上清液中VEGF的蛋白表达。比较三组ARPE-19细胞LC3-II/LC3-I、Beclin-1、Atg3及VEGF的蛋白表达量。然后将以上三组ARPE-19细胞上清液分别加入RF/6A细胞培养基中，将RF/6A细胞也按以上方法分组，分别采用Transwell法及Matrigel胶法检测并比较三组RF/6A细胞迁移数及细胞管腔形成数。结果　对照组、高糖组和3-MA+高糖组ARPE-19细胞中LC3-II/LC3-I比值分别为0.405±0.095、0.932±0.024和0.635±0.048；Beclin-1蛋白相对表达量分别为0.205±0.035、0.590±0.120和0.425±0.082；Atg3蛋白相对表达量分别为0.277±0.035、0.539±0.071和0.389±0.019。ARPE-19细胞上清液中VEGF的蛋白表达量三组分别为（44.03±9.08）ng·L^-1、（205.70±17.90）ng·L^-1和（112.52±21.06）ng·L^-1；RF/6A细胞迁移数三组分别为（125.60±6.35）个、（153.60±19.20）个和（67.40±7.95）个；细胞管腔形成数三组分别为（12.22±0.84）个、（18.44±1.68）个和（5.44±0.51）个；整体比较差异均有统计学意义（均为P<0.01）。与对照组相比，高糖组ARPE-19细胞的LC3-II/LC3-I比值、Beclin-1及Atg3蛋白相对表达量均明显增加（均为P<0.01），VEGF表达水平均明显升高（P<0.01），RF/6A细胞迁移数和管腔形成数均明显增加（均为P<0.01），3-MA+高糖组ARPE-19细胞中LC3-II/I比值、Beclin-1和Atg3蛋白相对表达量、VEGF表达量、RF/6A细胞迁移数和细胞管腔形成数均较高糖组明显降低（均为P<0.01）。结论　高糖激活ARPE-19细胞自噬，进而上调VEGF的表达并促进RF/6A细胞迁移和管腔形成，自噬抑制剂3-MA可抑制ARPE-19细胞自噬，并下调VEGF的表达从而抑制RF/6A细胞的血管形成能力。     

基于社区居民健康档案的糖尿病视网膜病变远程筛查模式

糖尿病视网膜病变是糖尿病患者致盲的主要原因，早期发现对预后至关重要。利用社区居民健康档案对糖尿病患者进行眼底筛查，尤其是远程筛查模式对于早期发现本病及进行相关医学研究，具有重要价值。     

近视眼球壁的异常改变及其分子机制研究进展

近年来患有近视的人不断增多。 由于近视严重的并发症及发生逐渐低龄化, 其已成为我国重点 关注的问题。 多项研究显示, 随着近视的进展, 眼球壁会产生一些异常改变。 文章就近视眼球壁的异常改 变及其细胞分子机制进行综述, 为进一步研究近视发病机制和近视防控提供依据。     

复方血栓通治疗糖尿病视网膜病变研究进展

复方血栓通是由三七、丹参、黄芪、玄参组成的中药制剂。大量临床研究证实了复方血栓通在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)治疗中的有效性,但对其治疗机制尚不完全清楚。近年来,学者进行了大量基础研究,证实了复方血栓通胶囊可通过抗氧化损伤、抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达、上调色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表     

眶蜂窝织炎63例分析

目的 探讨眶蜂窝织炎的致病原因、致病菌及并发症.方法 回顾性病例系列研究.回顾性分析西京医院自1960年至2008年收治的63例眶蜂窝织炎住院患者的临床资料,对其性别、年龄、致病途径、致病菌及并发症进行分析.结果 63例患者中,男性48例（76.2%）,女性15例（23.8%）;10岁以下年龄组患者较多（22例,34.9%）;单眼发病多见（61例,96.8%）;32例（50.8%）患者伴有明显眼球突出.致病途径以周围组织炎症蔓延最多见（47.6%）,其他包括血行感染（19.0%）、眼部外伤（15.9%）和眼部手术后并发感染（3.2%）.30例患者进行了细菌培养,仅18例（60.0%）细菌培养为阳性.致病菌有4类,以葡萄球菌属最为多见（14例,77.8%）,尤以金黄色葡萄球菌为主（8例,44.4%）,此外还有绿脓杆菌（11.1%）、甲型溶血性链球菌（5.6%）和中间型弗氏枸橼酸杆菌（5.6%）.本组有19例（30.1%）发生并发症,包括败血症（12.7%）、暴露性角膜炎（4.8%）、全眼球炎（4.8%）、化脓性脑膜炎（4.8%）和海绵窦栓塞性静脉炎（3.2%）等.结论 眶蜂窝织炎多见于10岁以下儿童患者,以单眼眼球突出为主要表现,致病途径以眶周组织结构感染蔓延为主.细菌培养阳性率较低,以金黄色葡萄球菌为主要致病菌.本病可发生严重并发症,宜早期积极给予广谱抗生素治疗,如脓肿形成应及时切开引流.     

放射性视网膜病变的认识及研究进展

放射性视网膜病变是指人体接触放射线或放射治疗后发生的一类视网膜病变.在中国,多见于鼻咽癌的放射治疗后.虽然随着放射设备的改进和放射治疗技术的进步,治疗的靶向性明显提高,不良反应减少,但疗效的提高使患者的生存时间逐渐延长,而最终表现出放射性视网膜病变的发病率增高.因放射性视网膜病变的眼底改变与一些常见视网膜血管病变有相似之处,故临床易被忽视或误诊;而没有统一规范的治疗方案,往往最终导致无法挽救的视力丧失.因此,应引起眼科和肿瘤科医师的重视.就放射性视网膜病变的发病机制、临床表现、辅助检查、诊断和鉴别诊断以及治疗方法,尤其是近年来最新的治疗进展进行综述.     

自噬与血管生成的研究进展

血管生成主要包括病理性及生理性血管生成2个方面,新生血管形成在多种疾病致病中发挥重要作用,主要包括肿瘤血管、眼底新生血管疾病（黄斑变性、糖尿病视网膜病变等）,在新生血管形成中自噬起到重要作用。肿瘤生长及侵袭转移与新生血管形成具有密切的相关性,自噬性细胞死亡可能会在一定程度上对血管生成造成抑制,而自噬也可以增强抗肿瘤药物作用。但是,肿瘤组织自噬水平的提高,同时会保护肿瘤组织,导致抗肿瘤药物的耐药,通过调节自噬能够更有效地控制肿瘤。在眼底新生血管疾病中,自噬参与了新生血管形成,通过抑制自噬能够更有效地控制眼底新生血管。     

糖尿病视网膜病变分级诊疗措施初探

糖尿病视网膜病变是糖尿病患者群体在临床病程的持续发展演化过程中,因多种因素的影响而发生的严重并发症,是临床中引致病理性致盲事件发生的重要因素,切实做好针对糖尿病视网膜病变发生的管理干预工作,对于控制和降低患者严重并发症的发生具有重要意义。2017年国家卫生计生委办公厅为了做好糖尿病视网膜病变防治工作,结合糖尿病分级诊疗要求,研究制定了《糖尿病视网膜病变分级诊疗服务技术方案》,通过分级诊疗制度的实施,有助于早期发现糖尿病视网膜病变,并给予早期干预,从而降低患者的疾病负担。但是在该服务技术方案实施过程中,具体的实施措施仍有待进一步细化、完善。该文针对糖尿病视网膜病变分级诊疗的措施,进行初步探讨。     

自噬抑制剂3-MA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞表达TNF-α的抑制作用

目的研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对缺氧条件下人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将体外培养的ARPE-19细胞随机分为对照组、缺氧组和3-MA+缺氧组,对照组细胞在常氧条件下培养,缺氧组细胞在缺氧箱(1%O2/5%CO2/94%N2)中进行培养,3-MA+缺氧组先在培养基中加入10 m M 3-MA,然后置于缺氧箱中继续培养。采用Western blot法检测各组细胞的自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 B (LC3B)、Beclin-1及p62的表达;采用ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α的浓度。结果 (1)对照组、缺氧组、3-MA+缺氧组细胞的TNF-α浓度分别为(59. 46±5. 22) pg/ml、(135. 80±11. 30) pg/ml和(105. 88±10. 42) pg/ml,总体比较差异有统计学意义(F=50. 53,P=0. 000),缺氧组的TNF-α浓度明显高于对照组和3-MA+缺氧组,差异均有统计学意义(均P <0. 01),3-MA+缺氧组的TNF-α浓度高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 01)。(2)对照组、缺氧组、3-MA+缺氧组细胞中的LC3B-II/LC3B-I值、Beclin-1值及p62值分别为(0. 20±0. 03、0. 58±0. 07和0. 40±0. 09)、(0. 32±0. 04、0. 97±0. 05和0. 78±0. 06)和(1. 03±0. 02、0. 32±0. 10和0. 78±0. 08),组间总体比较差异均有统计学意义(LC3B-II/LC3B-I:F=21. 73,P=0. 002; Beclin-1:F=149. 34,P=0. 000; p62:F=69. 53,P=0. 000)。缺氧组细胞中LC3B-II/LC3B-I值和Beclin-1值均明显高于对照组和3-MA+缺氧组,差异均有统计学意义(均P <0. 05),3-MA+缺氧组的LC3B-II/LC3B-I值和Beclin-1值均高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。缺氧组细胞中p62值明显低于对照组和3-MA+缺氧组,差异均有统计学意义(均P <0. 01),3-MA+缺氧组的p62值低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论缺氧激活RPE细胞自噬并促进其TNF-α的表达,自噬抑制剂3-MA可在一定程度上抑制自噬进程,从而发挥抑制细胞表达TNF-α的作用。     

脂肪因子Chemerin促进RF/6A细胞增殖、迁移和管腔形成

目的：研究Chemerin对体外培养的恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞（RF/6A细胞）增殖、迁移和管腔形成的影响。方法：实验研究。取体外培养的生长良好的RF/6A细胞用于实验,将细胞随机分为4组,分别是对照组、5 ng/ml浓度Chemerin组、10 ng/ml浓度Chemerin组、20 ng/ml浓度Chemerin组。在RPMI-1640 培养液中进行培养24、48 h后,采用MTT法检测细胞增殖,划痕法检测细胞迁移,基质胶法检测细胞管腔形成。多组间比较采用单因素方差分析。结果：MTT检测结果提示,同对照组比较,10、20 ng/ml浓度Chemerin能够显著促进细胞增殖,组间差异均有统计学意义（P ＜0.05）,5 ng/ml浓度组与对照组差异无统计学意义;划痕法检测细胞迁移结果提示,同对照组比较,3 种Chemerin浓度均能够显著促进细胞迁移,呈剂量依赖性,组间差异均有统计学意义（P ＜0.05）;基质 胶法检测细胞管腔形成结果提示,同对照组比较,3 种Chemerin浓度均能够显著促进细胞管腔形成,呈剂量依赖性,组间差异均有统计学意义（P ＜0.05）。结论：脂肪因子Chemerin能够促进RF/6A细胞增殖、迁移和管腔形成,提示Chemerin在视网膜新生血管形成中起重要作用。