长链非编码RNA ZFAS1在食管癌中的表达及作用机制研究

目的探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1（zinc finger antisense 1,ZFAS1）在食管癌中的表达及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法分别检测癌旁组织和食管癌组织、正常食管上皮细胞和食管癌细胞的ZFAS1表达水平,通过细胞增殖活性检测、细胞划痕实验及流式细胞仪检测细胞凋亡技术,评价干扰食管癌细胞表达ZFAS1对细胞增殖、迁移及凋亡的影响,采用荧光素酶报告基因验证微小RNA（microRNA,miRNA）miR-302b-3p是ZFAS1的作用靶点,Western蛋白印迹法检测ZFAS1及miR-302b-3p作用下c-Jun氨基末端激酶2（c-Jun N-terminal kinase 2,JNK2）、胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R）、白细胞介素-1受体相关激酶4（interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK-4）和上皮细胞激酶（epithelial cell kinase 2,EphA2）蛋白的表达变化。结果与癌旁组织相比,食管癌组织表达ZFAS1水平升高（t=19.40,P<0.001）,与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞表达ZFAS1水平增加（t=13.80,P<0.001）,通过抑制细胞表达ZFAS1发现,与NC干扰组相比,显著降低ZFAS1干扰组细胞增殖活性（t值分别=2.933,8.568,10.04,均P<0.05,）及迁移能力（t=13.96,P<0.001）,且细胞凋亡率升高（t=10.68,P<0.001）。ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p调节JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2蛋白的表达。结论ZFAS1在食管癌组织中表达显著增加,具有促进食管癌细胞增殖、迁移,抑制凋亡的能力,且ZFAS1可通过靶向miR-302b-3p激活JNK2、IGF-1R、IRAK4和EphA2,有望成为治疗食管癌的潜在靶点。     

hsa_circ_0016788对结直肠癌迁移和侵袭的影响

目的探讨hsa_circ_0016788对结直肠癌迁移和侵袭的影响。方法对cDNA芯片（含80例结直肠癌组织和15例癌旁正常组织）进行RT-PCR检测,比较结直肠癌组织与癌旁正常组织中hsa_circ_0016788的表达差异,同时分析结直肠癌组织中hsa_circ_0016788表达与患者临床特征的关系及预后影响。构建敲减hsa_circ_0016788表达的结直肠癌细胞株HCT116,并对其迁移和侵袭功能进行测定。结果结直肠癌组织中hsa_circ_0016788相对表达量明显高于癌旁正常组织（P＜0.05）,且与患者N分期、TNM分期有关（均P＜0.05）,与患者年龄、性别、T分期等均无关（均P＞0.05）。体外细胞实验敲减hsa_circ_0016788后,结直肠癌细胞株HCT116迁移、侵袭能力均明显下降（均P＜0.05）。在所有结直肠癌患者及Ⅱ、Ⅲ期患者中,hsa_circ_0016788高表达者生存率均明显低于低表达者（均P＜0.05）。结直肠癌组织中hsa_circ_0016788高表达是影响患者预后的独立危险因素（RR=22.712,P＜0.05）。结论hsa_circ_0016788可能促进了结直肠癌细胞的迁移和侵袭,其高表达提示结直肠癌患者预后不良。     

Lnc-OC1和miR-34在结直肠癌组织中的表达及相关性

目的: 研究长链非编码RNA 卵巢癌相关1(long non coding RNA ovarian cancer associated 1,Lnc OC1)在结直肠癌组织中的表达及其与患者预后的关系。方法: 购得80例结直肠癌组织和15例癌旁组织的cDNA芯片,采用实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,qRT PCR)检测结直肠癌组织中Lnc OC1和微小RNA 34(microRNA 34,miR 34)的表达;分析Lnc OC1表达与患者临床病理参数之间的关系;并分析Lnc OC1表达与miR 34表达二者间的相关性。结果： Lnc OC1在结直肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织(t=19.315,P<0.001),且结肠癌组织中Lnc OC1的表达与淋巴结转移及TNM分期相关(P均＜0.001);Lnc OC1表达与miR 34表达二者呈明显负相关(r=-0.967,P＜0.001);Lnc OC1高表达患者总体生存率较Lnc OC1低表达患者明显降低(P＜0.001);结直肠癌组织中Lnc OC1表达是患者预后的独立危险因素。 结论： Lnc OC1在结直肠癌组织中呈高表达,提示结直肠癌患者预后不良。     

肺癌组织UCHL1高表达与不良预后相关

目的：探讨泛素C末端水解酶L1(UCHL1)在肺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法：Oncomine数据库筛选UCHL1基因在肺癌中的表达;STRING数据库构建UCHL1互作网络并进行富集分析;GEPIA数据库和免疫组化分析肺癌及癌旁组织UCHL1蛋白的表达;Kaplan Meier-Plotter分析UCHL1和相关蛋白与患者总生存率（OS）的关系;χ2检验分析UCHL1表达与肺癌患者临床特征的相关性;Cox回归模型预测肺癌患者OS的危险因子。结果：Oncomine数据库研究表明UCHL1在肺癌中显著性上调;STRING数据库筛选出与UCHL1互作得分前10的蛋白;UCHL1及相关蛋白主要富集于蛋白去泛素化、宿主细胞成分、泛素蛋白连接酶结合和泛素介导的蛋白质水解通路;UCHL1及相关蛋白（UCHL3、SNCA）在肺癌中存在差异表达;UCHL1低表达患者的OS明显增高,SNCA低表达患者的OS降低;UCHL1表达与患者性别和病理分期显著相关;UCHL1表达和N分期是肺癌患者OS的独立危险因素。结论：UCHL1在肺癌组织中表达上调并与肺癌患者不良预后相关,有可能成为肺癌患者治疗以及判...     

细胞学检查在中老年乳腺导管内病变诊断的意义

大部分乳腺恶性肿瘤的发生起源于导管上皮,随着科学的进步与科学技术的发展,导管上皮的早期病变已受到关注,本研究试图通过观察中老年人乳腺导管上皮以寻求早期诊断方法.通过对导管内视镜下导管上皮进行收集,行各种细胞学检查,认为液基细胞学检查更具有优势,对常见的乳腺疾病,如乳腺导管扩张症、乳管炎、乳腺导管内乳头状瘤、癌前病变、乳腺癌等都具有较高的诊断价值,尤其对癌前病变在未形成肿块之前可通过细胞学检查确诊,可作为老年乳腺疾病普查的好方法.     

人类表皮生长因子受体 2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响

目的 研究人类表皮生长因子受体2(HER2)对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 2018年11月至2019年6月,运用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化的正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达;将空载体(pcDNA 3.1)、HER2过表达载体(pcDNA 3.1-HER2)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)、HER2小干扰RNA(si-HER2)用脂质体法转染至SGC-7901细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Tran-swell小室检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中p16、p21、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达.结果 与正常胃上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达[(3.02±0.28),(2.51±0.21),(2.36±0.19)比(1.00±0.08)]明显升高,其中SGC-7901细胞中的表达最高(P<0.05);过表达HER2后,SGC-7901细胞的增殖[(1.12±0.09)比(0.61±0.06)]、迁移[(170±15)比(100±9)]和侵袭[(130±12)比(75±6)]能力均明显上调,细胞的凋亡力[(8.03±0.69)％比(19.46±1.44)％]明显下调(P<0.05);敲减HER2则可下调SGC-7901细胞的增殖[(0.59±0.05)比(0.89±0.08)]、迁移[(55±5)比(100±8)]和侵袭[(36±4)比(75±6)]能力,上调细胞的凋亡[(16.82±1.15)％比(8.01±0.65)％]能力(P<0.05).重要的是,过表达HER2可明显抑制SGC-7901细胞中增殖抑制蛋白p16、p21,迁移侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9,凋亡促进相关蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3的表达,敲减HER2具有相反的作用.结论 HER2可促进胃癌细胞的增殖、迁移侵袭,抑制凋亡,其可能与调控功能增殖、迁移侵袭及凋亡相关蛋白表达有关.     

基底细胞型乳腺癌患者肿瘤内树突状细胞呈HLA-DR抗原表达细胞的临床意义

观察基底细胞型乳腺癌患者肿瘤内树突状细胞、呈HLA-DR抗原表达细胞引起的抗肿瘤免疫并探讨其临床意义。方法:应用免疫组织化学二步法检测基底细胞型乳腺癌患者肿瘤组织内S-100蛋白阳性的树突状细胞及呈HLA-DR抗原阳性表达的细胞。结果:基底细胞型乳腺癌患者肿瘤组织内缺乏树突状细胞（2/22,占9.09%）,数量明显少于非基底细胞型乳腺癌患者（138/138,占100%）,癌细胞的HLA-DR抗原阳性表达（4/22,占18.1%）明显少于非基底细胞型乳腺癌（106/138,占76.8%）。结论:基底细胞型乳腺癌患者肿瘤组织缺乏由树突状细胞、淋巴细胞及HLA-DR抗原阳性表达的癌细胞引起的特异性抗肿瘤免疫,这与基底细胞型乳腺癌患者预后差可能密切相关。