木脂素对醋酸铅染毒小鼠生精功能影响

目的探讨木脂素对醋酸铅染毒小鼠生精功能的影响及其作用机制。方法将昆明种雄性小鼠60只随机分为对照组、模型组、阳性对照组、木脂素组,除对照组外,其余3组小鼠均腹腔注射醋酸铅(40 mg/kg),连续10 d,建立雄性小鼠生精障碍模型;造模后第2 d开始,阳性对照组小鼠腹腔注射绒毛膜促性腺激素(500 IU/kg),木脂素组小鼠给予木脂素(200 mg/kg)灌胃,对照组及模型组小鼠灌胃等量生理盐水,连续30 d;末次给药24h后,处死小鼠,取睾丸和附睾,检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷(ATP)酶含量。比较各组小鼠精子存活率。苏木精-伊红染色观察睾丸组织形态。结果与对照组比较,模型组小鼠精子活率[(53.2±1.3)%]降低,LDH、SOD、Mg2+、Ca2+-ATP酶活性[分别为(0.18±0.03)U/gprot、(16.80±2.23)U/mgprot、(31.03±4.87)、(8.12±1.24)μmol Pi/(mgprot·hour)]降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,木脂素组小鼠精子活率[(68.7±2.2)%]升高;LDH、SOD、Mg2+、Ca2+-ATP酶活性[分别为(0.23±0.09)U/gprot、(23.01±3.86)U/mgprot、(64.21±10.49)、(17.20±5.18)μmol Pi/(mgprot·hour)]升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论木脂素对醋酸铅所致生精障碍小鼠的生殖功能具有一定保护作用,其机制可能与抗氧化损伤有关。     

苦参总黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠的影响

该文研究了苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对D-半乳糖致衰老小鼠的影响,并探讨其作用机制。将60只小鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组(阳性对照组)、苦参总黄酮低、中、高剂量组。采用D-半乳糖(160 mg·kg^-1)颈背部皮下注射连续30 d建立亚急性衰老小鼠模型,造模同时,苦参总黄酮低、中、高剂量组分别灌胃苦参总黄酮(150,300,600 mg·kg^-1),连续30 d。采用跳台试验、避暗试验来检测小鼠的学习记忆能力,检测脑组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶-B(MAO-B)、Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并且HE染色,光镜下观察脑海马齿状回区组织结构的变化。结果发现,与模型组比较,苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能明显延长避暗潜伏期、跳台潜伏期,苦参总黄酮各剂量组及脑复康组均减少避暗错误次数,苦参总黄酮高剂量组及脑复康组可减少跳台错误次数(P<0.05或P<0.01)。苦参总黄酮中、高剂量组及脑复康组能提高衰老小鼠脑组织中SOD和Na⁺-K⁺-ATP酶活性,降低脑组织中MAO-B的活性、MDA及TNF-α含量,降低衰老小鼠血清中LDH活性(P<0.05或P<0.01)。苦参总黄酮各剂量组及脑复康组脑组织中Ca²⁺-ATP酶活性增强,同模型组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。病理可见模型组海马齿状回细胞数目减少,细胞排列稀疏,细胞形态欠完整,胞浆稀少,胞核与胞浆界限欠清晰,细胞核深染,固缩不规则形,核仁不明显。苦参总黄酮组及脑复康组海马组织形态较模型组改善。可见,苦参总黄酮能改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与通过减少TNF-α含量而增强抗氧化作用,从而稳定细胞膜、降低脑内MAO-B活性有关。     

HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

目的研究HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法构建靶向HIP1的shRNA表达载体pSilence-shHIP1,应用脂质体转染到PC-3细胞,RT-PCR检测HIP1基因沉默效果,Western blotting确认有效作用靶点。通过细胞划痕实验和细胞生长曲线研究HIP1基因对PC-3细胞增殖的影响。结果转染PC-3细胞后,沉默HIP1基因效率达83%(P<0.01);Western blotting证实该基因片段为抑制HIP1的有效作用靶点。细胞划痕实验和生长曲线显示HIP1基因沉默可抑制PC-3细胞的增殖。结论 pSilence-shHIP1表达载体可特异性地抑制HIP1基因的表达,沉默HIP1基因可抑制PC-3细胞增殖和迁移。     

氯化钴对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响

目的：观察氯化钴（CoCl₂）作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响,并阐述其可能机制。方法：体外培养SKOV3细胞株,随机分为对照组、CoCl₂组、顺铂（DDP）组和CoCl₂联用DDP （联合）组,CoCl₂组细胞以200 μmol·L^-1 CoCl₂作用4 h后换普通细胞培养基培养20 h,DDP组细胞以含10 mg·L^-1 DDP的细胞培养基培养24 h,联合组细胞以200 μmol·L^-1 CoCl₂作用4 h后更换含10 mg·L^-1 DDP的细胞培养基继续培养20 h。MTT法检测各组细胞存活率,免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α（HIF-1α）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性表达强度,Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子（Ca²⁺）水平,免疫蛋白印迹（Western blotting）法观察凋亡相关蛋白细胞色素C （cyto C）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved caspase3）蛋白表达水平,Muse^®凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率。结果：与对照组比较,CoCl₂组细胞存活率无明显变化（P>0.05）,其余2组细胞存活率明显下降（P<0.05）;且联合组高于DDP组（P<0.05）。与对照组比较,CoCl₂组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强（P<0.05）;DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强（P<0.05）。与对照组比较,DDP组和联合组细胞Ca²⁺水平升高（P<0.05）;且DDP组高于联合组（P<0.05）。与对照组比较,CoCl₂组细胞中cyto C、caspase3和cleaved caspase3蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）,DDP组细胞中cyto C、caspase3和cleaved caspase3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;且联合组低于DDP组（P<0.05）。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;联合组细胞凋亡率较DDP组降低（P<0.05）。结论：CoCl₂可以通过抑制DDP诱导的人卵巢癌SKOV3细胞株iNOS表达增强来减少线粒体途径凋亡的发生,降低其顺铂敏感性。     

支气管肺癌黏膜Cath D、SP-A和GLUT-1的表达及临床意义

目的 了解支气管肺癌活组织黏膜组织蛋白酶D(Cath D)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的表达. 方法 支气管镜下钳取异常组织黏膜41例,经光镜病理确诊为支气管肺癌38例(其中小细胞肺癌10例,鳞状细胞癌28例),炎症3例.用SP免疫组织化学方法检测Cath D、SP-A和GLUT-1的表达. 结果 ①Cath D:小细胞癌-6例(60%),++4例(40%);鳞状细胞癌-4例(14%),+2例(7%),++8例(28%),+++14例(50%).小细胞癌与鳞状细胞癌对Cath D的表达有明显差异(P<0.01),后者明显高于前者.鳞状细胞癌分化程度不同,Cath D的表达有明显差异(P<0.05),分化程度越低,表达越高;②SP-A:+++3例(炎症),++20例(高分化鳞癌15例,中分化鳞癌5例),+6例(中分化鳞癌),-12例(小细胞癌10例,低分化鳞痛2例);③GLuT-1:小细胞癌-6例,+2例,+++2例;鳞状细胞痛-5例,+7例,++11例,+++5例;炎症+++3例.小细胞癌与鳞状细胞癌对GLUT-1的表达有明显差异(P<0.05),后者明显高于前者;不同分化程度的鳞状细胞癌,GLUT-1的表达无差异(P>0.05);炎症与鳞癌GLUT-1表达有明显差异(P<0.05)与小细胞癌则无差异(P>0.05). 结论 Cath D有助于鳞状细胞癌的诊断和分化程度的评估,SP-A可能有助支气管黏膜炎症与高恶度肿瘤组织的鉴别,GLUT-1在鳞状细胞癌有高表达,有助于鳞状细胞癌的诊断和鉴别诊断.     

微波辐射非热效应诱导人肺癌A549细胞自噬的研究

目的探讨微波辐射非热效应对人肺癌A549细胞自噬的影响。方法用冰浴法制备微波辐射非热效应模型,剂量为100 W-12 mV/cm2、150 W-18 mV/cm2和200 W-21 mV/cm2,照射10分钟;24小时后,免疫印记法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的变化,泛素化蛋白表达变化;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和p62的变化。结果微波辐射非热效应作用A549细胞,导致自噬相关蛋白Beclin-1表达增加,LC3和p62活化。结论微波辐射非热效应能够诱导人肺癌A549细胞发生自噬。     

鼻咽癌病人的围手术期护理

鼻咽癌是我国常见的恶性肿瘤,近年来,老年鼻咽癌发病率呈逐年上升趋势.鼻咽癌的首选治疗方法为放射治疗,但放射治疗后仍然有极高的复发率,对于这样的病人,通常会采取手术治疗.由于手术部位隐匿,手术方法相对复杂,故对围手术期的护理有非常高的要求.     

钙离子在顺铂诱导宫颈癌HeLa细胞自噬反应中的作用

目的：采用钙释放抑制剂联合化疗药物作用于宫颈癌HeLa细胞,探讨钙离子（Ca²⁺）在肿瘤细胞自噬反应中的作用,为辅助肿瘤治疗和药物研发提供依据。方法：选择处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,随机分为对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂联合2-APB组（联合组）。MTT法检测HeLa细胞生存率,钙离子荧光探针法检测HeLa细胞胞浆和线粒体中游离Ca²⁺水平,共聚焦显微镜检测HeLa细胞中自噬相关蛋白LC3和P62的共定位情况。结果：MTT法检测,与对照组比较,顺铂组和联合组HeLa细胞生存率明显降低（P<0.05）;与顺铂组比较,联合组HeLa细胞生存率明显升高（P<0.05）。钙离子荧光探针法检测,与顺铂组比较,联合组细胞株胞浆和线粒体中游离Ca²⁺水平及LC3和P62蛋白共定位荧光强度明显降低。结论：化疗药物可诱导肿瘤细胞发生自噬,联合钙释放抑制剂给药可以降低肿瘤细胞自噬水平,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。     

杨梅素通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡

目的：观察杨梅素与mdivi-1分别或联合作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞凋亡和线粒体分裂情况,探讨杨梅素诱导SKOV3细胞凋亡的机制。方法：体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、mdivi-1组、杨梅素组和联合给药组,mdivi-1组以50 μmol·L^-1 mdivi-1作用1 h后更换普通细胞培养液继续培养23 h,杨梅素组以50 g·L^-1杨梅素作用24 h,联合给药组以50 μmol·L^-1 mdivi-1作用1 h后更换含50 g·L^-1杨梅素的细胞培养液继续培养23 h。MTT法检测各组细胞存活率;Muse^®凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blotting）观察细胞色素C（Cyt C）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）、动力相关蛋白1（DRP1）和分裂蛋白1（FIS1）表达水平;MitoTracker^® Red荧光探针特异性标记线粒体观察各组细胞线粒体分裂情况。结果：与对照组比较,杨梅素组细胞存活率明显降低（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合给药组细胞存活率明显升高（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞凋亡率升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组细胞凋亡率明显降低（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞中Cyt C和caspase3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组Cyt C和caspase3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,杨梅素组细胞线粒体分裂程度增强;与杨梅素组比较,联合用药组线粒体分裂程度下降。与对照组比较,杨梅素组细胞中DRP1和FIS1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与杨梅素组比较,联合用药组DRP1和FIS1蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：杨梅素可通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡。     

大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响

目的 观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因.方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C组,每组10只.模型组、大蒜素组和维生素C组小鼠以100 mg/kg体重剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,对照组小鼠注射同体积生理盐水,每日1次,同期大蒜素组以20 mg/kg剂量腹腔注射大蒜素注射液,维生素C组以50 mg/kg剂量腹腔注射维生素C,对照组及模型组腹腔注射同体积生理盐水,共持续6周.给药结束后采集标本,Western blot法检测卵巢组织FSHR与LHR表达水平,免疫荧光法观察active Caspase-3表达变化.结果 与对照组相比,模型组FSHR与LHR表达水平明显升高(P＜0.05),active Caspase-3表达增强,大蒜素组FSHR与LHR表达水平(与β-actin比较)分别为0.63±0.07和0.82±0.06,较模型组明显下降(P＜0.05),active Caspase-3表达亦有减弱趋势.结论 大蒜素能下调FSHR与LHR表达水平,提示其一定程度上延缓了D-半乳糖所致小鼠卵巢的衰老,该作用可能与其减少卵巢细胞凋亡有关.