苦瓜提取物联合脂肪干细胞移植对顺铂所致大鼠肾损伤的影响

目的探讨苦瓜提取物联合脂肪干细胞移植对顺铂所致大鼠肾脏损伤的保护机制。方法复苏培养脂肪干细胞后行PKH-26标记。制备顺铂肾损伤大鼠模型,随机分为模型组、脂肪干细胞组、苦瓜提取物组、联合治疗组,15只/组,随机选取15只大鼠作为对照组。造模成功后24 h脂肪干细胞组大鼠经尾静脉注射0.5 mL 1×108/L脂肪干细胞悬液,苦瓜提取物组大鼠灌胃80 mg/kg苦瓜提取物,联合治疗组大鼠同时给予脂肪干细胞悬液和苦瓜提取物,对照组和模型组尾静脉注射0.5 mL DMEM/F12培养液,1/d,连续进7 d。7 d后检测大鼠血肌酐、血尿素氮水平和尿N-乙酰-β-D-葡萄（N-acetyl-b-D-glucosaminidase,NAG）、尿γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)、尿蛋白含量,取大鼠肾组织行苏木精-伊红染色、TUNEL染色、RT-PCR及Western Blot检测。结果与对照组比较,模型组血肌酐、血尿素氮含量及尿NAG、γ-GT、尿蛋白升高(P<0.05),苦瓜提取物组、脂肪干细胞组以上指标含量较模型组降低(P<0.05),联合治疗组明显降低(P<0.05)。联合治疗组的病理改善情况优于脂肪干细胞组和苦瓜提取物组,脂肪干细胞组和苦瓜提取物组较模型组改善,但不及联合治疗组。PKH-26标记的脂肪干细胞,联合治疗组多于脂肪干细胞组,模型组及苦瓜提取物组未见PKH-26阳性细胞。TUNEL细胞凋亡数结果显示模型组最多,而对照组最少,且联合治疗组低于苦瓜提取物组和脂肪干细胞组(P<0.05)。与对照组比较,模型组RAGE、ROS、Bax的mRNA和蛋白表达水平上调（P<0.05）,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平下调（P<0.05）。与模型组比较,苦瓜提取物组、脂肪干细胞组RAGE、ROS、Bax的mRNA和蛋白表达水平下调（P<0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调（P<0.05）。联合治疗组RAGE、ROS、Bax的mRNA和蛋白表达水平下调较苦瓜提取物组、脂肪干细胞组明显（P<0.05）,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平上调亦明显（P<0.05）。结论苦瓜提取物联合脂肪干细胞移植可能通过调控RAGE-ROS信号通路减少肾细胞凋亡发挥对顺铂致大鼠肾损伤的保护作用。