应用MALDI-TOF-MS自建鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱数据库的研究

目的运用MALDI-TOF-MS技术建立鲍氏志贺菌的蛋白指纹图谱并将其添加至数据库,实现对临床细菌的快速鉴定,便于临床医生对疾病进行快速而有效的控制。方法采用甲酸萃取法进行鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱的添加,研究不同的标本前处理方法对鉴定结果的影响,并用新分离的鲍氏志贺菌和大肠埃希菌对图谱进行验证。结果采用新的图谱鲍氏志贺菌提取法鉴定准确率为95%,直接涂抹法准确率为79%,对大肠埃希菌的鉴定准确率为97%。鲍氏志贺菌不同处理方法的鉴定准确率比较,差异有统计学意义(P(0.05)。结论新添加的鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱能快速准确地鉴定鲍氏志贺菌,此图谱可以应用于鲍氏志贺菌的临床快速诊断。     

2011～2015年某院肺炎克雷伯菌的分布特点及耐药性分析

目的：探讨2011～2015年海军总医院肺炎克雷伯菌的临床分布情况及耐药性变迁,为临床用药提供参考依据。方法选取海军总医院2011～2015年临床分离出的肺炎克雷伯菌,分析其检出率、科室分布情况、标本来源、抗菌药物耐药性及对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的变化趋势。结果2011～2015年肺炎克雷伯菌的检出株数和分离率呈逐年上升趋势,标本主要来源于重症监护室、高压氧科、呼吸内科、放射肿瘤科、肾脏病科等10个科室,其中高压氧科检出率最高,其次是呼吸内科、重症监护室;送检标本以痰液和尿液为主,分别占送检标本的59．7％和21．4％;2011～2015年肺炎克雷伯菌耐药性呈逐年上升趋势。该菌对哌拉西林、氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦和头孢呋辛酯耐药率较高,对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南和妥布霉素的耐药率较低;对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率逐年不断上升,泛耐药肺炎克雷伯菌呈快速上升趋势。结论肺炎克雷伯菌耐药现象严重,尤其耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌近年来明显增加,应加强对其耐药性监测,指导临床合理用药。     

基于激光散射技术的血流感染革兰阳性球菌快速检测的准确性分析

目的 评估一种新的快速检测血流感染革兰阳性球菌的方法,并评价其鉴定和药敏的准确性。方法 收集中国人民解放军总医院第六医学中心门诊及住院患者141例革兰阳性球菌血培养阳性样本,应用激光散射技术联合基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对其进行快速直接鉴定,同时联合VITEK 2 Compact微生物仪进行直接快速药敏试验（简称快速直接法）,并与常规方法比较,对快速直接法的鉴定率、药敏的分类一致性（categorical agreement, CA）和错误率进行分析。结果 快速直接法对革兰阳性球菌鉴定率为93.6%,其中葡萄球菌属91.8%,肠球菌属94.1%,链球菌属100.0%。金黄色葡萄球菌无错误,凝固酶阴性葡萄球菌在一般错误（minor errors, MIE）中3例、严重错误（major errors, ME）中5例和极严重错误(very major error,VME) 中2例;屎肠球菌在MIE中3例,粪肠球菌在MIE中1例。在85株葡萄球菌中,快速直接法检测头孢西丁阴性一致率为100%（16/16）,阳性一致率为97.1%(67/69),总体一致率为97.6%（83/85）;检测诱导克林霉素耐药阴性一致率为92.2%（47/51）,阳性一致率为94.1%(32/34),总体一致率为92.9%（79/85）。结论 基于激光散射技术联合MALDI-TOF MS和VITEK 2 Compact,能够快速准确得到鉴定和药敏结果,有助于血流感染快速诊断。     

2007-2012年临床分离鲍曼不动杆菌耐药性及Ⅰ类整合子变化分析

目的检测我院2007年1月-2012年12月临床分离鲍曼不动杆菌耐药性及Ⅰ类整合子变化。方法对2007—2012年分离的鲍曼不动杆菌分为2007—2008、2009—2010、2011—2012年3个时间阶段,采用纸片扩散法研究其对12种常用抗菌药物的耐药性;在3个时间段分离的菌株中分别随机选取100株,采用聚合酶链反应扩增检测Ⅰ类整合子。结果 3个时间段分别检测鲍曼不动杆菌为191、279、527株。鲍曼不动杆菌对12种常用抗菌药物耐药性增长明显(P<0.05)。Ⅰ类整合子阳性菌检出率逐年增加,且Ⅰ类整合子阳性菌耐药性明显高于阴性菌(P<0.01)。结论我院鲍曼不动杆菌耐药性较高,Ⅰ类整合子和多药耐药检测比例增加明显,需要加强医院感染的检测和耐药菌监控,进一步规范抗菌药物使用。     

2007-2011年医院临床分离鲍曼不动杆菌分布特征及耐药谱变迁

目的通过2007—2011年鲍曼不动杆菌在本院内分布特征和耐药状况的分析,为医院各临床科室预防院内感染及对本菌感染的细菌学诊断和 治疗提供系统的、准确的依据。方法回顾性分析我院2007—2011年住院和门诊患者送检的标本中分离到的774株鲍曼不动杆菌的分布及药敏结果。 结果标本来源以呼吸道为主,占864%;科室分布以重症监护病房分离率最多,占32.4%。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2009年的46 4%下降至2011年的132%,对米诺环素的耐药率从2008年的684%下降至2011年的112%,对多黏菌素B的耐药率从2009年的60%下降至2011 年的32%。结论鲍曼不动杆菌已成为引起感染和医院感染的仅次于铜绿假单胞菌的非发酵菌之一,耐药情况不容乐观,应引起临床各科室高度重 视。严格规范鲍曼不动杆菌感染的抗菌治疗,减少因治疗而诱导耐药酶产生导致的耐药菌,防止耐药种类和耐药菌株的逐年攀升。     

重症监护病房与其他科室鲍曼不动杆菌耐药性对比分析

目的 对比分析重症监护病房（ICU）与其他科室送检标本中鲍曼不动杆菌的耐药性,以指导临床用药.方法 对我院2011年6月-2012年6月ICU与其他科室送检标本中分离的鲍曼不动杆菌进行药物敏感性对比分析.结果 本研究共分离出鲍曼不动杆菌234株,其中ICU 62株,其他科室172株,ICU与其他科室痰标本中鲍曼不动杆菌检出率均占首位,分别达83.9％和90.7％;ICU及其他科室鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,耐药率除阿米卡星较低外,对其他药物的耐药率均超过50％,对亚胺培南-西司他汀钠和美罗培南耐药率ICU分别为80.6％和85.5％,其他科室分别为59.3％和54.6％,差异均有统计学意义（P＜0.05）;对头孢呋辛钠、头孢唑林钠、呋喃妥因、氨苄西林耐药率均为100％.泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率ICU与其他科室分别为3.2％和1.2％,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 应加强对ICU与其他科室多重耐药鲍曼不动杆菌的动态监测,尤其应加强ICU的感染控制.     

2006-2013年海军总医院血培养真菌感染分析

目的：了解海军总医院检验科血培养标本中真菌感染状况及药敏结果,为临床诊断及合理用药提供参考。方法对本院2006年1月~2013年12月血培养真菌阳性标本进行回顾性分析。结果从临床送检的血培养标本检出真菌114株,菌株主要为白色念珠菌（37.7%）,热带念珠菌（28.9%）,光滑念珠菌（21.0%）;连续8年真菌感染血培养阳性呈逐年增长趋势,2013年检出最高（22株）;体外抗真菌药敏试验的敏感率从高到低依次为：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、伏立康唑、伊曲康唑、氟康唑,其中两性霉素B抗菌活性最好,100%敏感。30株真菌感染血培养标本检测了血清（1,3）-β-D葡聚糖,阳性率为53.3%（16/30）。结论引起真菌血症的病原体主要是念珠菌,联合血清学检测有助于辅助诊断真菌血症,真菌药敏试验结果给临床治疗提供了有参考价值的信息。     

2007-2011年血流感染病原菌分布 及耐药率变迁情况分析

目的探讨我院2007-2011年血流感染病原菌分布及耐药率情况,为临床经验用药提供依据。方法采用全自动血培养仪进行血液培养,阳性标本分离培养后用全自动微生物分析系统VITEK 2 Compact进行菌种鉴定,药物敏感性试验采用手工琼脂扩散敏感试验(kirbry-bauer,K-B)和仪器卡片法,对结果进行数据统计分析。结果 5年间我院血流感染的病原菌以革兰阴性杆菌为主占52.6%,革兰阳性菌和真菌分布占42.8%和4.6%;除金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌外,其他病原菌分离率无明显上升趋势,耐药分析显示耐药率整体稳定;病原菌对大部分临床常用抗生素具有较高的耐药率,未出现明显上升趋势。结论及时关注血流感染病原菌分布情况及耐药动态,对于控制耐药菌的传播、指导临床经验用药具有非常重要的意义。     

2007～2011年肺炎克雷伯菌的感染分布及耐药性分析

目的:对近5年临床肺炎克雷伯菌感染分布情况和耐药性进行分析.方法:2007年1月～2011年12月从临床标本中分离出的肺炎克雷伯氏菌相关资料进行回顾性分析.结果:645株肺炎克雷伯菌主要来自痰液,占69.5％,其次为尿液及血培养,分别占14.0％、8.4％;主要分布于高压氧科、呼吸内科、ICU,分别占14.3％、10.2％、9.1％;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出179株,检出率为27.8％.结论:肺炎克雷伯菌由于产ESBLs菌株易检出率高,对常用抗菌药物多呈耐药性,对肺炎克雷伯菌进行及时准确鉴定和药敏分析,把握耐药趋势,对指导临床合理用药有重大意义.