慢性应激抑郁大鼠海马CA1神经元突触可塑性研究

目的 探讨慢性轻度不可预见应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型大鼠海马CA1区神经元的突触可塑性改变.方法 将20只雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机等分为CUMS组和对照组,前者连续28天每天随机接受不同的应激,对照组同样条件下饲养但不给应激,至第28天进行行为测评后处死,在日立(H7500)透射电镜下测量海马CA1神经元突触界面结构参数.结果 CUMS抑郁大鼠海马CA1神经元突触活性区长度(216.64±20.19 nm)及突触后致密物厚度(42.4±5.23 nm)显著小于对照组(321.58±12.27nm,69.6±4.77 nm),差异有统计学意义(P＜0.05),突触界面曲率及宽度与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性应激性抑郁大鼠存在海马CA1区神经元突触可塑性的改变.这提示抑郁症的发病机制可能与海马神经元突触可塑性相关.     

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清皮质醇、促肾上腺皮质激素水平及其临床意义

目的 探讨急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清皮质醇(COR)、促肾上腺皮质激素(ACTH)水平的变化及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法动态检测33例DEACMP患者血清COR、ACTH的水平,并与32例急性一氧化碳(CO)中毒后未发生DEACMP患者和32例正常对照者进行比较;采用日常生活能力量表(ADL)、常识-记忆-注意测验(IMCT)、长谷川痴呆量表(HDS)动态检查DEACMP患者的病情变化.结果 DEACMP组急性期血清COR水平明显高于急性CO中毒组和正常对照组(均P＜0.05);ACTH水平明显高于急性CO中毒组(P＜0.05),与正常对照组比较无显著差异(P＞0.05).DEACMP组恢复期血清COR、ACTH水平较急性期均有不同程度的降低,但只有COR水平有显著差异(P＜0.05).DEACMP组急性期ADL、HDS、IMCT评分与恢复期比较均有显著差异(均P＜0.01).DEACMP组急性期、恢复期血清COR水平变化与HDS和ADL评分变化之间呈显著正相关(P＜0.05).结论 DEACMP患者血清COR、ACTH水平动态变化与病情变化基本一致,动态检测血清COR、ACTH水平变化可作为DEACMP病情变化和治疗效果的生物学指标之一.     

条件性位置厌恶大鼠伏隔核壳区多巴胺及其代谢产物3，4二羟基苯乙酸水平变化

目的探讨伏隔核壳区（AcbSh）多巴胺（DA）及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）在吗啡依赖戒断所致厌恶动机中的作用,揭示阿片依赖戒断的厌恶动机机制。方法40只SPF级雄性Sprage．Dawley大鼠分为实验组（吗啡＋纳洛酮,MN组）与对照组（吗啡＋生理盐水,MS组;生理盐水＋纳洛酮,sN组）,连续6．5d吗啡注射（10mg／kg,bid,IP）一次纳洛酮催瘾（0．3mg／kg,IP）,同时搭配条件性位置训练箱建立条件性位置厌恶（CPA）大鼠模型。在立体定位术后3-5d,CPA建立前、后收集AcbSh中的细胞外液,采用高效液相色谱-电化学方法对透析液中DA及DOPAC浓度进行测定。结果连续6．5d的吗啡注射与纳洛酮一次催瘾搭配,实验组大鼠表现出明显的厌恶动机,在伴药侧的时间[（230．01±24．76）S]明显缩短,与实验前[（566．04±19．80）s]相比,差异具有统计学意义（t=11．889,P〈0．01）。CPA建立后,MN组AcbSh中DA水平（1．72±0．10）明显升高,与MS组（0．95±0．05）和sN组（0．09±0．06）相比差异有统计学意义（F=42．319,P〈0．01）;MN组DOPAC水平（1．56±0．07）与MS组（1．19±0．04）、SN组（1．07±0．02）相比,明显升高,差异具有统计学意义（F=25．375,P〈0．01）。结论AcbSh中DA及DOPAC可能参与CPA的建立,中脑边缘系统的多巴胺机制可能在物质依赖厌恶动机中起到十分重要的调节作用。     

HPLC法同时测定舒眠胶囊中酸枣仁皂苷A和槲皮苷的含量

目的:建立同时测定舒眠胶囊中酸枣仁皂苷A和槲皮苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18反相柱,柱温为30℃,流动相为甲醇-乙腈-缓冲液(20:30:50,V/V/V),流速为1.5ml/min,检测波长为256nm,进样量为20μl。结果:酸枣仁皂苷A、槲皮苷检测质量浓度分别在10.168～101.68mg/L(r=0.9998)、9.285～92.85mg/L(r=0.9999)范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为99.7%、99.5%,RSD分别为1.98%、2.21%(n=6)。结论:该方法简便,结果准确,重复性及回收率均理想,可用于舒眠胶囊的质量控制。     

人体血浆中氨磺必利含量的简便测定法

目的 建立反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定人体血浆中氨磺必利的含量.方法 色谱柱为美国DiamonsilR(250 mm×4.6 mm,5μm)C18反相柱;流动相为甲醇-乙腈-缓冲液(6ml三乙胺加入1 000 ml水中,冰醋酸调pH值为6.8) =30∶50∶20,流速为1.1 ml/min;检测波长275 nm.结果 氨磺必利血浆浓度在2.1～ 268.8 ng/ml范围内,线性关系良好,标准曲线为C=1.039 6 F-0.020 7(r=0.999 7,n=8),定量下限2.1 ng/ml.结论 RP-HPLC法具有快速、简便、灵敏度高、重现性好等优点,可以广泛用于氨磺必利临床研究和不良反应监测.     

孕期酒精暴露对子代大鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基表达的影响

目的 研究孕期酒精暴露对子代大鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)表达的影响.方法 按照随机数字表法,将雌性SD大鼠随机分为正常对照组、饮酒对照组和孕期酒精暴露组,每组各8只;饮酒法建立大鼠孕期酒精暴露模型,子代成年后,采用Y-型迷宫测试子鼠学习记忆成绩;采用聚合酶链反应分析子鼠海马组织NR2B mRNA的表达;采用免疫荧光法检测子鼠海马区NR2B蛋白表达.结果 (1)各组子鼠成年后学习记忆成绩的差异有统计学意义(F=4.566,P＜0.05),孕期酒精暴露组子鼠学习记忆成绩[(43.00±15.33)次]比正常对照组[ (25.13±12.35)次]和饮酒对照组[(26.12±11.95)次]明显下降(P均＜0.05);(2)各组子鼠成年后海马组织中NR2B mRNA表达差异有统计学意义(F=29.795,P＜0.01),孕期酒精暴露组子鼠海马区NR2B mRNA表达(0.97±0.14)较正常对照组(0.52±0.10)和饮酒对照组(0.62±0.12)明显上升(P均＜0.01);孕期酒精暴露组子鼠海马区NR2B蛋白表达明显增加.结论 孕期酒精暴露对子代大鼠的神经损伤可能与NMDA受体亚基NR2B蛋白表达的上调有关.     

香菇多糖对慢性应激抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及可能机制研究

目的:通过观察香菇多糖对慢性应激抑郁模型小鼠行为,海马组织内5-HT1A受体表达,MDA含量及SOD活力以及血清中TNF-α和IL-6含量的影响,探讨LNT抗抑郁症的作用机制。方法:取健康成年昆明种小鼠40只,雄性,体质量(20±2)g,SPF级,根据1%蔗糖水偏嗜度随机分成4组,即正常对照组(Normal controls,NG)、模型对照组(Model control,MG)、LNT剂量组(L-LNT,2.5 mg/kg;HLNT,5.0 mg/kg)。在每天造模实验开始前1 h灌胃给药,连续给药28 d,各实验组均按1.0ml/100 g体重给药。应用轻度不可预见性的慢性应激制作抑郁模型,并加以改良。正常对照组,不给刺激,饮食饮水正常。而模型组及实验干预组动物配合孤养,禁食、禁水(24 h),并接受不可预知的应激刺激,在28 d的实验中,每天每只动物随机仅给予一种刺激。造模后强迫游泳应激实验记录游泳不动时间,酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-6的含量,NBT法检测总SOD活性,硫代巴比妥酸(Thiobarbituric acid,TBA)法检测MDA含量,免疫蛋白印记(Western blot)技术检测5-HT1A受体表达水平。结果:MG小鼠在陌生环境中摄食潜伏期显著延长,给予LNT干预后,能够缩短慢性应激导致小鼠在陌生环境中摄食潜伏期的延长,显著缩短慢性应激导致小鼠在水中应激游泳不动时间的延长,5-HT1A受体表达增强,LNT干预组SOD升高,MDA含量下降,血清中TNF-α和IL-6明显减少,与模型MG组相比上述各项指标的改善均有统计学显著意义(P0.05或P0.01)。结论:LNT能显著缓解慢性应激模型小鼠抑郁症状,增加小鼠的自主活动时间;LNT增加SOD,拮抗MDA含量可能与LNT抗抑郁作用的机制有关。     

Th17细胞的活化机制

目前研究发现免疫Th17细胞在多种自身免疫性疾病中占据重要地位。本文就Th17细胞的活化机制做一综述,以了解自身免疫性疾病中可以促使Th17细胞活化的影响因素,为该类疾病的诊断和治疗提供新的思路。     

丁苯酞对慢性酒精中毒大鼠海马内硫化氢和纤维状肌动蛋白的影响

目的探究丁苯酞(NBP)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力、海马内硫化氢(H2S)和纤维状肌动蛋白(F-actin)含量的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,除对照组外,将含酒的水作为大鼠唯一水来源,并逐渐增加酒精含量,采用自由饮用方法建立慢性酒精中毒模型。42 d后按慢性酒精中毒大鼠戒断评分表于末次饮酒后6 h检测大鼠模型,NBP低、中、高剂量组大鼠灌胃不同剂量NBP(大约14 d),饮酒结束后利用Y型电迷宫测试酒精中毒大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织H2S和F-actin的含量。结果与对照组大鼠学习记忆成绩(40.38±5.97)、H2S含量(23.25±3.61)和F-actin在阳性细胞中的表达相比,模型组大鼠学习记忆成绩(83.25±5.47)和H2S含量(43.86±6.95)均升高,F-actin的阳性表达降低(P<0.01)。与模型组大鼠相比,NBP中、高剂量组大鼠学习记忆成绩(64.75±4.71)、(70.00±4.72)和H2S含量(32.21±5.32)、(36.78±7.29)nmol/g均降低,F-actin的阳性表达升高(P<0.01)。结论 NBP能够减轻慢性酒精中毒大鼠对酒精的依赖,缓解酒精对大鼠学习记忆能力的影响,可能与NBP影响H2S和F-actin的含量有关。     

急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清S1OOB蛋白、胶质纤维酸性蛋白水平及其临床意义

目的 研究急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清S100B蛋白、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平的动态变化及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法动态测定33例DEACMP患者血清S100B蛋白、GFAP水平,用日常生活能力量表(ADL)、常识-记忆-注意测验(IMCT)、长谷川痴呆量表(HDS)动态检查DEACMP患者病情变化,并与32例急性一氧化碳(CO)中毒后未发生迟发性脑病患者进行比较.结果 (1)DEACMP组急性期血清S100B蛋白[(0.60±0.21) ng/ml]、GFAP水平[(226.58±90.05)ng/ml]明显高于急性CO中毒组[分别为(0.50±0.20) ng/ml,( 183.04±73.01 )ng/ml]和DEACMP组恢复期[分别为(0.51±0.16) ng/ml,( 183.25±81.76) ng/ml],差异具有统计学意义(均P＜0.05).(2)DEACMP组血清S100B蛋白和GFAP水平在急性期和恢复期均有显著相关性(急性期r=0.466,P=0.006;恢复期r=0.365,P=0.037).(3)DEACMP组急性期血清S100B蛋白、GFAP水平无效组明显高于其他各组(均P＜0.05).(4) DEACMP组急性期ADL、HDS、IMCT评分[分别为(45.21±9.69)分,(8.26±6.31)分,(9.91±7.52)分]与恢复期[分别为(33.67±13.62)分,(15.91±10.83)分,(19.06±10.37)分]比较,差异具有统计学意义(均P＜0.01).结论 DEACMP存在二次脑损伤,胶质激活在DEACMP脑损伤中可能起着重要作用;S100B蛋白、GFAP水平可能与预后有关.