神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的 研究神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的可行性。方法 取孕龄为12－16天的母鼠，从胎脑中分离神经细胞，进行培养、鉴定。用出生7天的SD大鼠的新生鼠制作缺氧缺血性脑损伤的动物模型，7天后接受神经干细胞移植（移植组，n＝16只），同时设置对照组，只注射磷酸缓冲液（对照组，n=8只），8－10周后，作Y迷宫实验检测大鼠的学习能力和记忆能力。取脑组织作免疫组织化学检查。结果 从大鼠胎脑中成功培养出神经干细胞，培养条件下呈悬浮状态生长，形成神经球，绝大多数的细胞表达神经干细胞的标志物神经巢蛋白（nestin）。接爱神经干细胞移植组大鼠的学习能力、记忆能力和对照组相比，有明显提高，差异具有显著性（P＜0.05）。接受神经干细胞移植大鼠组织中可见存活的移植细胞，并和宿主脑组织融合在一起。结论 在体外培养条件下，可从胎脑组织中培养出神经干细胞，移植到缺氧缺血性脑损伤大鼠脑内后，细胞与宿主的脑组织融合在一起，动物的学习、记忆能力有改善。移植神经干细胞是治疗缺氧缺知性脑损伤的有效方法之一。     

皮肤来源的前体细胞培养和向神经元分化的观察

目的　研究皮肤来源的前体细胞 (SKPs)的体外培养方法 ,为神经移植提供一种新的细胞来源。方法　分离培养小鼠皮肤组织的细胞 ,在无血清的培养基中培养 ,用机械方法对细胞进行传代 ,免疫细胞化学方法对细胞进行鉴定。结果　从成年和幼年的小鼠皮肤组织中分离培养出SKPs ,这种细胞在体外可以长期增殖和传代 ,体外培养可超过 8代 ,这种细胞大部分表达纤维粘连蛋白 ,约50 %的细胞表达巢蛋白。在有血清的培养基中培养 ,约 5%的细胞分化为神经元样细胞 ,表达神经元特异性烯醇化酶和神经微丝 ,部分细胞分化为脂肪细胞 ,其余的细胞分化为成纤维细胞样细胞。结论　皮肤组织中存在的前体细胞可在体外稳定增殖 ,能够分化为神经细胞、脂肪细胞和成纤维细胞样细胞。这种前体细胞有潜力成为神经移植的一种细胞来源     

表达胶质细胞源性神经生长因子的骨髓基质干细胞的神经分化潜能

有研究表明，骨髓基质干细胞(BMSC)可以向神经细胞分化，且易于获取，因此被认为是治疗中枢神经系统疾病理想的细胞载体。我们以胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)为目的基因，采用阳离子脂质体转染方法，对BMSC的基因工程化和神经分化潜能进行了初步研究。     

成人经胼胝体-穹隆间入路术后近期记忆力变化

患者女性,19岁。因间断性头痛3年于2004年7月入院。1年前在外院诊断为左丘脑囊肿,行左额叶皮层造瘘囊肿切开引流术,术后症状无缓解。1年后复查头颅MRI示左丘脑囊肿增大,囊壁无增强,囊内无瘤结节,左额皮层造瘘坏死区;松果体区圆形低信号占位,增强后囊壁明显增强,约1．5cm×1．5cm×1．5cm(图1)。查体:记忆力正常,四肢肌力和肌张力正常,病理征阴性。诊断:左丘脑囊肿;松果体囊     

缺血性脑损伤后大鼠脑中脂质体介导外源基因的表达

目的 探讨在短暂、局灶性脑缺血后，脂质体介导的外源基因能否在大鼠脑组织中有效的表达。方法 将大鼠—侧大脑中动脉栓塞1h以制作短暂、局灶性脑缺血模型。根据行为实验来判定模型制作是否成功。将含报告基因LacZ的质粒和脂质体的复合体注入实验组大鼠的脑脊液中，对照组只注射脂质体。7d后取动物脑组织，通过组织化学和逆转录酶—多聚酶链反应(RT—PCR)等方法来鉴定外源基因是否表达。结果 转染LacZ基因的缺血性脑损伤大鼠脑组织中，其表达产物β—半乳糖苷酶在皮质、皮质下区域的细胞及脉络丛中均呈阳性表达；在缺血中心区域，表达β—半乳糖苷酶的细胞数很少；在缺血周边区域，表达β—半乳糖苷酶的细胞数较多；而非缺血区域表达β—半乳糖苷酶的细胞明显较缺血中心区域为多；其脑组织中LacZ mRNA在RT—PCR实验中亦呈阳性。只注射脂质体的缺血大鼠脑组织中，β—半乳糖苷酶和LacZ mRNA的检测均为阴性。结论 缺血性脑损伤发生后，脂质体介导的外源基因可在脑组织中有效表达。脂质体介导的基因转染可能是治疗缺血性脑损伤的一种有效方法。     

脊髓髓内室管膜瘤的外科治疗

目的研究脊髓髓内室管膜瘤的显微外科手术技术。方法本文回顾分析了手术治疗318例脊髓髓内室管膜瘤的临床资料。结果全切除肿瘤311例,近全切除7例。随访129例,其中痊愈65例,症状明显减轻46例,症状无变化9例,症状加重7例,术后复发2例。无手术死亡。结论应用显微技术可以全切大多数髓内室管膜瘤。椎板成形术可提高术后脊柱稳定性,全切或近全切患者术后不需放疗。     

Fas L转基因神经细胞异种移植治疗癫痫

目的以Fas配体转基因小鼠的胚胎海马神经细胞作为供体，异种移植治疗大鼠癫痫模型，研究Fas-配体表达对异种神经组织移植免疫排斥反应的影响。方法脑室注射海人酸损伤海马CA3区建立癫痫模型。转基因小鼠胚胎15d的海马组织移植到癫痫大鼠的双侧海马区。大鼠-大鼠同种移植组和野生型小鼠-大鼠异种移植组及生理盐水移植组作为对照。在移植后8周进行三等分臂迷宫和跳台实验检测癫痫模型的行为改善情况。结果RT-PCR检测移植的神经细胞中有人Fas配体的表达。转基因移植组与移植前相比有显著地改善（P〈0．01），异种移植及生理盐水组行为学无改善，转基因移植组与异种移植及生理盐水组相比有显著地改善（P〈0．01），但没有同种移植恢复的效果好。结论Fas配体的表达可以抑制或延缓宿主脑内对异种神经细胞的排斥反应。     

Culture of skin-derived precursors and their differentiation into neurons

To investigate the culture method of skin-derived precursors (SKPs) and to explore a new cell sourcefor cell transplantation of central nervous system.     

中枢神经系统疾病的细胞替代治疗

中枢神经系统的自我修复能力非常有限,主要是因为成熟的神经细胞缺乏再生的能力,尽管成年脑内有神经干细胞存在,但不足以弥补损伤神经元的缺失。由于这些原因,人们希望通过移植新的细胞以代替那些因为损伤或疾病而丢失的细胞,从而修复神经系统功能。在大多数情况下,移植的神经元或神经干细胞发挥治疗作用多依赖于它们在组织和功能上与宿主脑组织的融合。只有当神经元处于发育阶段（成熟前期）时植入脑内,它们才会存活和良好生长。它们和宿主脑组织建立起交互联系（reciprocal connectivity）的能力也依赖于宿主的年龄,宿主处于胚胎阶段时这种能力最大,随宿主年龄的增大,这种能力逐渐减弱。尽管如此,在成年脑组织中,移植的神经元也能建立起相应的功能联系,并且当宿主神经通路受损时这种能力明显增加,提示神经元分化和建立交互联系的机制在发