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1.
①目的筛选出跳舞草外植体的最佳消毒方案及愈伤组织诱导的最佳条件。②方法以跳舞草的叶片为实验材料,利用离体培养技术,分析了不同消毒时间和培养条件对跳舞草愈伤组织诱导的影响。③结果外植体最佳的消毒方案为:75%的酒精消毒30 s;愈伤组织诱导的最佳条件为:MS,NAA:0.02 mg/L,BA:2 mg/L,糖:30 g/L,琼脂:6 g/L。④结论为进一步建立跳舞草组培快速繁殖体系奠定了基础。 相似文献
2.
3.
目的:研究不同激素配比对远志根、茎、叶愈伤组织诱导的影响,并对远志根、茎、叶愈伤组织中的黄酮量进行测定分析。方法:以MS为基本培养基,分别以远志无菌苗的根、茎、叶为外植体,应用正交试验法确定2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),萘乙酸(NAA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)这3种激素对远志根、茎、叶不同部位愈伤组织诱导及其黄酮积累量的影响。结果:2,4-D,NAA,6-BA对远志根、茎、叶愈伤诱导率均有显著影响。叶的最佳愈伤诱导组合为MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;茎的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+3. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA;根的最佳愈伤诱导组合为MS+1. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA。2,4-D,NAA,6-BA对远志茎愈伤组织中黄酮积累均影响显著,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+0. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; NAA,6-BA对远志叶愈伤组织中黄酮积累影响均显著,而2,4-D则无明显影响,以MS+3. 0 mg·L~(-1)2,4-D+2. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 0 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合; 3种激素分别对远志根愈伤组织中黄酮积累无明显影响,以MS+2. 0 mg·L~(-1)2,4-D+1. 0 mg·L~(-1)NAA+1. 5 mg·L~(-1)6-BA为最佳黄酮积累组合。结论:在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织诱导率均达100%,其中尤以远志叶愈伤组织长势最好,其次分别是远志茎和远志根。在该条件下远志根、茎、叶愈伤组织中黄酮量分别达到21. 31,24. 56,23. 61 mg·g-1。 相似文献
4.
5.
目的建立凹叶厚朴Magnolia officinalis subsp.biloba快速繁殖体系。方法以选育的优质凹叶厚朴种胚为初始外植体,采用单因素及正交试验筛选不同基本培养基,不同植物调节剂(6-BA、NAA、IBA、IAA),获取最适种胚启动培养基,丛芽增殖培养基和生根培养基。结果适宜种胚萌发的启动培养基为B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,出芽率达87.0%;适合丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,增殖系数可达6.2;适合生根的培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg/L,30 d生根率可达84%。结论建立了凹叶厚朴快速繁殖体系,为凹叶厚朴优质种苗的工厂化育苗奠定了基础。 相似文献
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7.
为保存野生资源,满足栽培对种苗的需要,以牛蒡嫩茎为材料,应用组织培养的方法,进行了嫩茎愈伤组织诱导与分化、分化芽生根、试管苗的生根继代及移栽和定植的研究。结果表明:MS+6-BA0.3mg.L-1+2,4-D2.0mg.L-1是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基;MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+AgNO31.2mg.L-1是愈伤组织分化培养的理想培养基;White+NAA0.1mg.L-1+IAA0.2mg.L-1是不定芽生根培养、试管苗生根继代培养及快速繁殖的理想培养基。试管苗易移栽和定植易成活,且定植的试管苗保持了野生牛蒡的所有生物性状。 相似文献
8.
目的:比较胎牛血清fibs)和血清替代物一一KnockoutTMSR(KSR)对睾丸组织生长发育的影响。方法:未成熟大鼠睾丸组织分别采用FBS和KSR连续培养5周,观测培养睾丸组织大体面积,苏木素伊红(HE)染色观察睾丸组织学形态及生殖细胞发育,并测量曲细精管直径。TUNEL法凋亡实验观察培养5周睾丸组织中的凋亡细胞,RT—PCR检测精子发生不同阶段的标准化标志基因Kit、Sycp3、Crispl。结果:KSR组睾丸组织体外持续生长,曲细精管逐渐增大,培养5周观察到精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、圆形精子细胞,RT.PCR检测到Kit、Sycp3、Crispl的表达。FBS组睾丸组织随着培养时间延长逐渐萎缩,培养5周曲细精管出现明显坏死,培养睾丸组织中Sycp3、Crispl表达不稳定。结论:KSR更有利于未成熟睾丸组织培养中生殖细胞从精原细胞发育成精子细胞,并能长期维持生殖细胞发育及睾丸组织生长。 相似文献
9.
10.
LIU Yu-zhen LÜ Xiu-ping PAN Zi-xuan ZHANG Wei CHEN Zhao-ri WANG Hui LIU Hu ZHANG You-zhong 《中华医学杂志(英文版)》2013,126(17):3344-3347
Background Cervical keratinocytes are recovered at a low numbers and frequently associated with contaminating human fibroblasts which rapidly overgrow the epithelial cells in culture with medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS). However, it is difficult to initiate keratinocyte cultures with serum-free keratinocyte growth medium alone because cell attachment can be poor. Therefore, the culture of these cells is extremely difficult. In this study, we described a modified culture medium and coated culture plastics for growing normal human cervical epithelial cells in vitro. Methods Normal cervical epithelial tissue pieces were obtained and digested with type I collagenase to dissociate the cells and a single cell suspension produced. The cells were cultured on plastic tissue culture substrate alone or substrate coated with collagen type I from rat tail, with modified keratinocyte serum-free medium (K-SFM) supplemented with 5% FBS. After attachment, the medium were replaced with K-SFM without FBS. The expression of basal keratins of the ectocervical epithelium, K5, K14 and K19 were assayed by immunofluorescence with monoclonal antibodies to identify the cell purity. Results Our results indicate that cells attached to the culture plastic more quickly in K-SFM supplemented with 5% FBS than in K-SFM alone, as well as to tissue culture plastic coated with collagen type I than plastic alone. The modified medium composed of K-SFM and 5% FBS combined with a specific tissue culture plastic coated with collagen type I from rat tail was the best method for culture of normal cervical epithelial cells. K5, K14 and K19 were assayed and keratinocyte purity was nearly 100%. Conclusion A novel, simple and effective method can be used to rapidly obtain highly purified keratinocytes from normal human cervical epithelium. 相似文献