虎杖MYB转录因子PcMYB1的表达特性和功能研究

目的对虎杖中1个新的R2R3-MYB转录因子基因PcMYB1进行转录活性鉴定和表达特性分析,并在转基因拟南芥中进行功能研究。方法利用酵母单杂交实验分析PcMYB1的转录活性;荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测虎杖中PcMYB1的表达模式;利用Wiesner染色和溴乙酰法检测PcMYB1转基因拟南芥中的木质素含量;RT-PCR技术分析PcMYB1转基因拟南芥木质素合成相关基因的表达。结果酵母单杂实验结果表明,PcMYB1具有转录抑制活性;RT-PCR结果显示PcMYB1在虎杖根、茎、叶中均有表达,在叶中表达量最高,并且紫外照射处理可诱导叶片中PcMYB1的表达;与野生型拟南芥相比,转基因拟南芥的株高降低了24.07%,木质部的细胞染色程度浅,转基因拟南芥木质素含量降低了14.81%,参与木质素合成的AtC4H、AtC3H、AtF5H、AtCOMT、AtCAD基因表达下调。结论 PcMYB1具有转录抑制活性,对植物木质素合成具有负调控作用。     

罗马洋甘菊吉马烯A合成酶基因的克隆与表达分析

目的从罗马洋甘菊Chamaemelum nobile中克隆萜类化合物合成关键酶吉马烯A合成酶(germacrene A synthase,GAS)cDNA全长,并对其进行生物信息学和组织表达分析。方法基于前期对罗马洋甘菊转录组测序结果,设计特异性引物,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增得到GAS的cDNA全长,利用生物信息学手段对其核苷酸和编码的氨基酸序列进行分析,并预测其编码的蛋白质的理化性质和功能。通过实时定量PCR技术(qRT-PCR)检测罗马洋甘菊GAS基因(CnGAS)在罗马洋甘菊不同组织的表达水平。结果扩增得到的罗马洋甘菊吉马烯A合成酶基因的cDNA全长为1 785 bp,命名为CnGAS(GenBank登录号为KU589283),包含1个1 683 bp的开放阅读框(ORF),编码561个氨基酸,预测的相对分子质量和等电点分别为6 470和5.21。CnGAS基因编码的氨基酸序列与其他植物的GAS蛋白高度同源,且含有DDxx D保守序列。系统进化树表明CnGAS基因与菊科植物的GAS基因的亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示CnGAS基因在罗马洋甘菊各组织中均有表达,且花中表达量最高。结论从罗马洋甘菊中克隆得到CnGAS基因,分析了该基因在不同组织中的表达水平,为罗马洋甘菊萜类化合物的生物合成代谢途径的研究奠定了基础。     

苦荞遗传多样性分析与核心种质筛选--测试文章

利用SSR分子标记技术,对来自西藏、陕西、四川、贵州等4省区的210份苦荞品种进行遗传多样性研究。结果表明,所选用的50对SSR引物中,有16对引物多态性良好,共扩增出178个条带,其中多态性条带达118个,占总数的66.3%;210份苦荞种质的遗传变幅为0.62～0.98,平均值为0.80,在遗传相似系数为0.88处可划分为5大类。聚类结果显示,来自同一地区的苦荞品种显示出聚为一类的趋势,表明苦荞的遗传信息受地理分布的影响较大;第V类所聚的41份分别来自西藏（27份）、陕西（8份）和贵州（6份）的品种表现出较为丰富的遗传多样性,与其他种质相比,这41份材料不仅遗传差异较大,而且遗传来源广泛,可作为苦荞核心种质筛选的基础。     

羊角拗甙对钉螺生理生化的影响

以不同浓度的羊角拗甙（Strophanthus divaricatus）对钉螺糖原和总蛋白含量的影响进行了研究。结果显示大干0．80g／L羊角拗甙能够显著降低钉螺体内的糖原含量，减少幅度为10．69％～74．94％；羊角拗甙也能够在一定程度上降低钉螺体内的蛋白质含量，降低为5．79%～14．22％．但不及前者显著。试验表明植物羊角拗的杀灭钉螺作用可能主要与降低钉螺组织细胞中能量代谢有关。     

湖北省洪湖市家畜血吸虫感染危险因素非条件logistic回归分析

目的 了解日本血吸虫病在重度流行区对家畜的感染情况及其危险因素.方法 追踪观察两组牛群在1个感染季节后的感染情况、螺情、接触疫水及疫水变化等因素,对其进行了单因素与多因素非条件logistic回归分析.结果 基线感染率为17.33%,其中黄牛感染率(17.69%)高于水牛感染率(16.98%).接触疫水处水体尾蚴密度(OR=10.40,95% CI: 2.43～44.50)、年龄(OR=0.194, 95% CI: 0.770～0.049)、性别(OR=2.120,95% CI:1.009～4.453)有无治疗过(OR=1.277,95% CI:0.938～2.754)、7～10月疫水接触指数(OR=2.083,95% CI:1.12～3.89)、牧地距阳性螺点距离(OR=2.614,95% CI:1.11～6.16)等为主要危险因素.结论 在日本血吸虫病重度流行区存在较快感染趋势,且家畜血吸虫感染危险因素顺序为:接触疫水处水体尾蚴密度、年龄、放牧地点距阳性釘螺存在点距离、7～10月疫水接触情况.     

乙型脑炎病毒NS5蛋白原核表达与亚细胞定位研究

目的对乙型脑炎病毒NS5蛋白进行原核表达和亚细胞定位研究。方法通过PCR扩增乙型脑炎病毒NS5基因,并将之克隆至原核表达载体pET-28a（＋）中,构建的重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞,经IPTG诱导表达目的蛋白。将表达产物纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备NS5蛋白特异性的多克隆抗体。同时,构建NS5基因与绿色荧光蛋白（EG-FP）融合表达的真核表达质粒pcDNA-NS5-EGFP,将之转染BHK-21细胞,利用激光共聚焦荧光显微镜观察NS5蛋白在BHK-21细胞中的亚细胞定位。结果 NS5蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达蛋白分子量大小约为103kD,该蛋白在真核细胞中的表达呈颗粒状不均匀分布于整个细胞,且颗粒状主要分布在细胞质中。结论成功表达乙型脑炎病毒NS5蛋白,并对NS5蛋白的亚细胞定位进行了分析,为进一步研究NS5蛋白提供依据。     

荆州市农村地区生活饮用水卫生状况调查

<正>湖北省荆州市地处江汉平原,缺少大型工业投资项目,近年来引进了诸多生产地条钢和化工原料等污染严重的工业项目,农村饮用水安全受到了严重威胁。2005—2009年,荆州市由中     

四倍体菘蓝基因组DNA甲基化的甲基化敏感扩增多态性分析

目的 分析四倍体菘蓝Isatis indigotica基因组DNA甲基化水平和模式。方法 采用甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP）方法,对四倍体菘蓝基因组DNA的甲基化水平和模式进行分析。结果 筛选36对MSAP选择性引物进行扩增,共得到1 733条清晰的条带。二倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为24.05%,四倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为23.70%。检测到83个（4.86%）CCGG位点在四倍体菘蓝基因组中发生了DNA甲基化模式的改变,其中37个（2.13%）位点发生了超甲基化,36个（2.08%）位点发生了去甲基化。结论 二倍体和四倍体菘蓝在CCGG位点上存在胞嘧啶甲基化状态的改变。     

溃疡性结肠炎中白细胞移动抑制因子免疫荧光抗体染色技术的应用

目的:探索致敏源2,4-二硝基氯苯(DNCB)建立的具有迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)特征的实验性结肠炎模型肠神经元中LMIF的表达。方法:结肠石蜡切片LMIF的免疫荧光测定。结果:溃疡性结肠炎肠神经系统和神经免疫介导物白细胞移动抑制因子(LMIF)在DNCB所致实验性结肠炎中有重要表达;抗体滴度1∶300的表达效果较好。结论:LMIF是神经免疫的重要介导物。