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1.
易青  宁喜斌 《卫生研究》2022,(3):470-475
目的 建立沙门菌、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌三重PCR检测方法。方法 3株菌在本实验室自行研制的共增菌培养基(SSV培养基)混合培养16 h,分别对沙门菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、副溶血性弧菌collagenase基因设计特异性引物,建立三重PCR体系,通过对引物浓度、退火温度及循环次数进行优化,从而建立最优体系,并从特异性、重复性、灵敏性3个方面对体系进行评价。结果 三重PCR体系中,invA、nuc、collagenase引物浓度分别为10、12.5和12.5 nmol/L;最佳退火温度为55.6℃;目标菌的引物特异性好,且体系的检测灵敏度高,3株菌在三重PCR体系中的灵敏度都在102 CFU/mL以上。结论 建立的三重PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好。  相似文献   
2.
目的 研究海绵Callyspongia sp.共附生真菌Nigrospora sp.中化学成分以及生物活性。 方法 利用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备型反相高效液相色谱(RPLC)等方法对该菌株乙酸乙酯提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)等技术并结合文献报道数据分析鉴定化合物结构;采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测化合物的PD-1/PD-L1结合抑制活性。结果 分离得到7个已知化合物,分别为punctaporonin D (1),punctaporonin E (2),punctaporonin F (3),desuccinoylpunctaporonin C (4),(20S, 22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 (5),(22E, 24R)-麦角甾-3β-羟基-5α, 9α-环氧-7, 22-二烯-6-酮 (6),麦角甾-7, 22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇 (7)。在体外生物活性检测中,化合物6显示出PD-1/PD-L1结合抑制活性,其IC50值为22.5 μmol/L。结论 化合物4为新天然产物,化合物1-3和化合物6为首次从该属真菌中分离得到。化合物6显示PD-1/PD-L1结合抑制活性。  相似文献   
3.
目的 建立贝类中GI、GII诺如病毒快速检测与分群方法。 方法 对比分析6株主要流行的GI、GII诺如病毒及参考诺如病毒的基因序列,筛选保守区域引物,优化建立SYBR Green I荧光定量检测与熔解曲线快速分群方法,并对实际样品检测验证。结果 引物P289/290可同时检测GI、GII诺如病毒,SYBR Green I荧光定量检测方法在病毒浓度103~109 copies 之间呈现良好的线性关系(R2=0.993,P<0.01),熔解曲线Tm值可区分GI和GII不同基因群的诺如病毒(F=7 507.60,P<0.05 )。120份贝类样品阳性检出率5.83%,其中阳性结果测序鉴定与快速分群方法结论一致。 结论 该方法成本低、检测快速、分群准确,具有良好重复性,适用于贝类中GI、GII诺如病毒的快速检测与分群。  相似文献   
4.
目的 研究斜发沸石(Cp)对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用.方法 48只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组(给予蒸馏水,不照射)、辐照模型组(给予蒸馏水,照射)、300mg/kg 523组(照射前24h给予尼尔雌醇200mg/kg,照射后4h给予尼尔雌醇100mg/kg,其余天数给予蒸馏水灌胃,照射)、56mg/kg沸石组(给予56mg/kg沸石水溶液,照射)、167mg/kg沸石组(给予167mg/kg沸石水溶液,照射)和500mg/kg沸石组(给予500mg/kg沸石水溶液,照射).以灌胃方式连续给药7d,采用137Csγ射线对小鼠进行一次性全身照射,剂量率为0.75Gy/min,总剂量为4.0Gy.照射后继续灌胃给药14d.用血细胞分析仪测定外周血象;测定脏器指数、骨髓DNA含量;检测小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;流式细胞仪检测骨髓造血干细胞含量.结果 经137Csγ射线照射后10d,与辐照模型组相比,56mg/kg沸石组与167mg/kg沸石组红细胞数量明显升高(P<0.05,P<0.01),56mg/kg沸石组与500mg/kg沸石组白细胞数量明显升高(P<0.01);照射后14d,与辐照模型组相比,沸石各给药组小鼠血清中SOD活性显著升高(P<0.05,P<0.01),167mg/kg沸石组与500mg/kg沸石组GSH-Px活性明显升高(P<0.01),56mg/kg沸石组与500mg/kg沸石组骨髓细胞DNA含量明显升高(P<0.05,P<0.01),沸石各给药组骨髓造血干细胞含量明显升高(P<0.01).结论 斜发沸石对亚急性辐射损伤小鼠具有一定保护作用.  相似文献   
5.
谁最容易营养失衡 肥胖者在“食不厌精、脍不厌细”的今天,很多人,尤其是肥胖人群早就把“营养不良”四个字抛诸脑后。而事实上,营养不良的准确定义是“营养缺乏、过多或不平衡的总称”。营养低下和营养过剩都是营养不良的范畴。营养低下是指由于长期缺乏一种或多种营养素所造成的严重营养不足情况,并因此出现了相应的临床表现或病症,实为营养缺乏病;而营养过剩则是指由于食物与营养物质的摄入超过了机体的生理需要,而表现在体内过多堆积,造成肥胖等情况。所以很多肥胖人群往往自认为营养不良与自己毫不相关,而事实也恰因为这一观念让这部分人陷入营养不良的陷阱。  相似文献   
6.
目的 对分离自西沙隋氏蒂壳海绵共附生真菌Penicilliumchrysogenum的次级代谢产物进行化学成分及其生物活性研究,以期发现结构特异并且活性良好的次级代谢产物。方法 对隋氏蒂壳海绵共附生真菌Penicilliumchrysogenum用真菌2号培养基发酵,发酵后的菌丝体采用溶剂提取、萃取和现代色谱分离纯化手段,再运用现代核磁波谱技术并结合高分辨质谱鉴定化合物结构。基于微阵列技术的表面等离子体共振成像(SPRi)系统,检测化合物与肿瘤相关蛋白的相互作用,并提供化合物与肿瘤相关蛋白的结合动力学数据。结果 通过分离隋氏蒂壳海绵共附生真Penicilliumchrysogenum的菌丝体提取物,从中分离鉴定了7个单体化合物,鉴定结果为conidiogenone(1)、2-acetylquinazolin-4(3H)-one(2)、15β-hydroxyl-(22E,24R)-ergosta-3,5,8,22-tetraen-on(3)、ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(4)、 2-((2E,4E)-hexa-2,4-dienoyl)-5,6-dihydroxy-4,6-dimethylcyclohex-4-ene-1,3-dione(5)、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(6)、2-(1-hydroxyethyl)quinazolin-4(3H)-one(7)。结论 化合物3和6是从Penicillium属内第一次分离得到,化合物4是从真菌Penicilliumchrysogenum中第一次分离得到,化合物5与肿瘤蛋白VEGFR-1、FGFR有亲和作用,KD的数值分别为7.78×10-3和1.44×10-1 μmol/L。  相似文献   
7.
目的用高效液相色谱法(HPLC)对海洋新型纤溶化合物FGFC1(fungi fibrinolytic compound 1)的药物代谢动力学和组织分布进行成药性的初步评价。方法分析柱HPC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温为40℃;流动相为乙腈-水(0.1%三氟乙酸)45∶55(V/V)和85∶15(V/V),流速1 m L·min-1;检测波长265 nm。前肢静脉给予比格犬3种剂量(7.5、5.0、2.5 mg·kg-1)的FGFC1,于不同的时间点取血,用HPLC测定血浆和组织中FGFC1的浓度并计算其药物代谢动力学参数和组织分布情况。结果 FGFC1的消除半衰期(T1/2β)分别为(49.035±2.171)、(48.422±2.113)及(48.811±2.372)min;达峰浓度Cmax分别为(56.48±6.23)、(48.63±5.53)、(13.64±2.76)mg·L-1;机体总消除率(CL)分别为(0.006 2±0.000 4)、(0.007 1±0.000 8)、(0.009 2±0.000 6)L·min-1·kg-1;平均保留时间(MRT)分别为(28.17±1.16)、(26.23±0.35)、(28.66±0.84)min。组织分布研究结果表明FGFC1在静脉给药后迅速分布到全身各处,最高药物浓度水平在肝脏中检出。结论FGFC1在比格犬体内呈现良好的药代动力学特性和组织分布特点,表现出较高的成药性特征,值得进一步研究。  相似文献   
8.
电子自旋共振波谱法对鲍鱼的辐照鉴定研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的建立检测鉴定辐照鲍鱼的电子自旋共振(ESR)波谱法。方法采用电子自旋共振波谱法研究辐照鲍鱼ESR波谱特征和定量特征峰。结果未经辐照和辐照鲍鱼ESR图谱差异明显;未经辐照鲍鱼的g值范围:g=2.0055~2.0060;辐照鲍鱼的g1值范围:g1=(2.0027±0.0001),g2值范围:g2=(1.9994±0.0001);在0.5~10kGy范围内,ESR特征峰信号强度与吸收剂量成正相关,左侧峰为定量特征峰,检测限≤0.5kGy;吸收剂量高于10kGy时则难以定量;ESR特征峰和g值可定性判定鲍鱼是否经过辐照处理。结论 ESR波谱法是鉴定辐照鲍鱼的有效方法。  相似文献   
9.
袋泡茶;中泡方便卫生、清洗简单,因此广受年轻白领的欢迎。但国人干百年来的饮茶传统对茶叶的形状要求极高,近期网络上传言称:“袋泡茶都是用茶渣烘干制成的,不少品牌袋泡茶使用回收茶和二次茶……”这些负面消息让袋泡茶“躺着中枪”。究竟袋泡茶的茶叶是如何加工而成?平日里饮用又是否安全、健康?带着这样的疑问,我们请教了上海海洋大学食品学院教授周培根。  相似文献   
10.
目的 评价通关藤中4种C21甾体化合物(通关藤苷I、通关藤苷G、通关藤苷H和17β-通关藤苷元B)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol(A2780/T)耐药的逆转作用及相关机制。方法 将人卵巢癌A2780/T细胞分为对照组、C21甾体单用组、紫杉醇单用组、C21甾体联合紫杉醇组(1:1),MTT法检测细胞增殖能力,中效原理分析两药联用效应(Fa)与合用指数(CI)的关系;划痕实验观察细胞迁移能力;流式细胞术及Hoechst 33258染色检测细胞周期和凋亡情况;RT-PCR、Western blot法分别检测ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2 mRNA及P-gp表达水平;药物外排实验检测A2780/T细胞内紫杉醇及罗丹明123的蓄积量。结果 4种C21甾体单用或与紫杉醇联用均能抑制A2780/T细胞增殖,且呈剂量依赖效应。通关藤苷G、通关藤苷H与紫杉醇联用48 h具有协同效应,能够显著抑制A2780/T细胞迁移、阻滞细胞于G2/M期、促进细胞凋亡,显著抑制ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2 mRNA水平,下调P-gp表达,显著促进了紫杉醇及罗丹明123在A2780/T细胞内的蓄积。结论 通关藤苷G、通关藤苷H与紫杉醇联用均产生协同效应,可逆转人卵巢癌A2780/T细胞对紫杉醇的耐药性,其机制可能与降低基因ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2及P-gp的表达水平,促进紫杉醇在A2780/T细胞内蓄积有关。  相似文献   
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