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在大肠杆菌中高效表达人I型免疫缺陷病毒p24蛋白 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 表达人I型免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白p24,为制备抗p24单克隆抗体及其诊断抗原奠定基础。方法 将编码HIV-1p24蛋白的p24^gag基因片段,克隆到原核表达载体pET-17b的T7噬菌体启动子下游,构建重组表达质粒,转化大肠肝菌BL2(DE3),IPTG诱导表达,表达产物以SDS-PAGE,Westernblotting及点免疫印迹分析,结果 构建成功重组表达质粒pET24经I 相似文献
2.
《中国人兽共患病杂志》1999,27(1):4-p24
In order to study the
capsid protein (p24) of human immunodeficiency virus type 1(HIV-1),a plasmid vector
pET24,containing the p24gaq gene fragment encoding the p24 protein under the
control of the bacteriophage T7 promoter ,was constructed.The pET24 plasmid-highly
expressed a 30kDa protein of s10-p24 spanning 284 amino acid residues.The total amount of
the fusion protein was approximately 38.4% of the total celluar protein in Escherchia coli
BL21(DE3).Westein blotting and,immunodot blotting indicated that the recombinain protein
could be relognized by anti-p24 monoclonal antibody and HIV-1 positive sera
respectively.It is significance for preparing specific antibody,and diagnostic usage. 相似文献
3.
目的: 制备纯化重组蛋白mFcγRⅢ,并鉴定其生物学活性.方法: 从克隆载体mRⅢ-T中扩增mFcγRⅢ胞外区,构建原核表达载体pETmRⅢ,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot对重组表达蛋白进行鉴定;表达产物通过包涵体纯化后用稀释方法复性;ELISA检测复性蛋白活性.结果: 成功构建了重组表达质粒pETmRⅢ,纯化和复性了重组蛋白mFcγRⅢ;复性的重组蛋白mFcγRⅢ具有较强的体外活性.结论: 原核重组蛋白mFcγRⅢ复性后具有较强的体外结合配体特性,为探索重组蛋白治疗自身免疫病奠定了基础. 相似文献
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旋毛虫ES抗原特异性蛋白两个结构基因的序列分… 总被引:5,自引:2,他引:5
获取旋毛虫ES抗原的结构基因,对其鉴定和克隆,并研制旋毛虫基因组抗原。先用反转录PCR技术获取目的基因,经序列测定和酶切分析后,再用重组DNA技术分别将目的基因与融合表达载体pEX31C、pEX31B及表达载体PBV2连接,评价在大肠杆菌中的表达效果和鉴定表达产物的异性。 相似文献
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