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1.
目的 基于核酸试纸条技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因的方法。 方法 煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物并通过克隆转化鉴定PCR产物,建立并组装核酸试纸条,评价核酸试纸条的特异性、灵敏度和稳定性。 结果 蜡样芽胞杆菌DNA浓度为300 mg?L-1,纯度约为1.60。PCR产物阳性条带经切胶回收、克隆转化和测序比对,与GenBank数据库中已登记的entFM相似性为100%。在pH值7.0条件下,每100 μL 胶体金溶液加入3.3 μg链霉亲和素浓度标记,质控线浓度为1.8 g?L-1,检测线浓度为1 g?L-1时,硝酸纤维素膜上质控线与检测线均可与PCR产物反应出现清晰的红色条带。按照最适条件组装成核酸试纸条,PCR产物6 μL,样品展开液100 μL,检测10 min后可观察结果。核酸试纸条特异性与电泳结果一致,仅蜡样芽胞杆菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌和沙门氏菌皆无交叉反应,为阴性结果;灵敏度检测,核酸试纸条DNA质量浓度同时降至10-3 mg?L-1仍可准确检测,普通PCR电泳结果显示DNA质量浓度同时降至10-1 mg?L-1出现目的条带,核酸试纸条比普通PCR灵敏度提高100倍;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测稳定性一致。 结论 建立的核酸试纸条检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因灵敏度高、特异性强且具有良好稳定性,适用于快速鉴别蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因。  相似文献   
2.
《Vaccine》2022,40(30):4038-4045
PurposeAs protection from COVID-19 following two doses of the BNT162b2 vaccine showed a time dependent waning, a third (booster) dose was administrated. This study aims to compare the antibody response following the third dose versus the second and to evaluate post-booster seroconversion.MethodsA prospective observational study conducted in Maccabi Healthcare Services. Serial SARS-CoV-2 Spike IgG tests, 1,2,3 and 6 months following the second vaccine dose and one month following the third were obtained. Neutralizing antibody levels were measured in a subset of participants. Per individual SARS-CoV-2 Spike IgG titer ratios were calculated one month after the booster administration compared to titers one month following the second dose and prior to booster.ResultsAmong 110 participants, 56 (51%) were women. Mean age was 61.7 ± 1.9 years and 66 (60%) were immunocompromised. One month after third dose, IgG titers were induced 7.83 (95 %CI 5.25–11.67) folds and 2.40 (95 %CI 1.90–3.03) folds compared to one month after the second, in the immunocompromised and immunocompetent groups, respectively. Of the 17 immunocompromised participants who were seronegative after the second dose, 4 (24%) became seropositive following the third. Comparing the titers prior to the third dose, an increase of 50.7 (95 %CI 32.5–79.1) fold in the immunocompromised group and 25.7 (95 %CI 19.1–34.7) fold in and immunocompetent group, was observed.ConclusionA third BNT162b2 vaccine elicited robust humoral response, superior to the response observed following the second, among immunocompetent and immunocompromised individuals.  相似文献   
3.
4.
目的:观察肾康注射液联合青霉素与替米沙坦治疗肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者的效果。方法:选取134例肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者为研究对象,按随机数字表法将其分成观察组与对照组各67例。对照组给予青霉素联合替米沙坦治疗,观察组在对照组基础上加用肾康注射液治疗,比较两组临床疗效、治疗前后肾功能指标[血管内皮生长因子(VEGF)、胱抑素C(CysC)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)]水平和不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为97.01%(65/67),明显高于对照组的85.07%(57/67),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组VEGF、CysC和MCP-1水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾康注射液联合青霉素与替米沙坦治疗肾小球肾炎合并急性间质性肾炎患者可提高治疗总有效率,降低肾功能指标水平,其效果优于青霉素联合替米沙坦治疗。  相似文献   
5.
目的 探讨耳穴贴压对腹部术后胃肠功能紊乱家兔模型的作用机制,为耳穴贴压治疗腹部术后胃肠功能紊乱提供参考。 方法 将30只SD清洁型家兔采用随机数字表法分为空白组、模型组、耳穴组各10只。耳穴组于造模成功后耳穴贴压胃、大肠、耳中穴,每日按压3次,每次每穴30 s,连续干预7 d;模型组进行造模手术未进行耳穴贴压;空白组不给予任何处理。 结果 耳穴组术后首次排便时间及肠鸣音恢复时间显著早于模型组(均P<0.05)。三组术后6 h、3 d及7 d血清皮质醇浓度的干预效应、时间效应、交互效应显著,模型组及耳穴组术后6 h及3 d血清皮质醇浓度显著高于空白组,且术后3 d耳穴组显著低于模型组(均P<0.05)。干预后,三组小肠推进率、C-kit蛋白阳性表达、iNOS活性有显著差异,其中耳穴组、空白组小肠推进率、C-kit蛋白阳性表达显著高于模型组,但iNOS活性显著低于模型组,耳穴组的C-kit蛋白阳性表达显著低于空白组(均P<0.05)。 结论 耳穴贴压可缩短腹部术后家兔首次排便及肠鸣音恢复时间,降低血清皮质醇浓度及应激反应,有助于提升小肠推进率及结肠组织中C-kit蛋白阳性表达,促进腹部术后胃肠蠕动恢复。  相似文献   
6.
7.
Background/purposeStreptococcus pneumoniae is an important human pathogen that causes invasive infections in adults and children. Accurate serotyping is important to study its epidemiological distribution and to assess vaccine efficacy.MethodsInvasive S. pneumoniae isolates (n = 300) from 27 teaching hospitals in China were studied. The Quellung reaction was used as the gold standard to identify the S. pneumoniae serotypes. Subsequently, multiplex PCR and cpsB gene-based sequetyping methods were used to identify the serotypes.ResultsBased on the Quellung reaction, 299 S. pneumoniae isolates were accurately identified to the serotype level and 40 different serotypes were detected. Only one strain was non-typeable, and five most common serotypes were identified: 23F (43, 14.3%), 19A (41, 13.7%), 19F (41, 13.7%), 3 (31, 10.3%), and 14 (27, 9.0%). Overall, the multiplex PCR method identified 73.3 and 20.7% of the isolates to the serotype and cluster levels, respectively, with 1.7% of the isolates misidentified. In contrast, the cpsB sequetyping method identified 59.0 and 30.3% of the isolates to the serotype and cluster levels, respectively, and 7% were misidentified.ConclusionsThe cpsB gene sequetyping method combined with multiplex PCR, can greatly improve the accuracy and efficiency of serotyping, besides reducing the associated costs.  相似文献   
8.
ObjectivesOur aim was to evaluate the effect of the updated European Organization for Research and Treatment of Cancer (EORTC) and Mycoses Study Group 2019 definitions for invasive pulmonary aspergillosis (IPA) on patient classification and the related all-cause 12-week mortality.MethodsIn this retrospective cohort study from our tertiary care centre, we reclassified patients with haematological malignancy who underwent bronchoalveolar lavage between 2014 and 2019 for suspected IPA using the novel EORTC 2019 criteria. We performed receiver operating characteristic curve analysis to define the optimal cut-off for positive PCR and galactomannan and present survival analyses and their possible association with these diagnostic criteria through post hoc comparisons with log rank and Cox regression.ResultsFrom 323 episodes of suspected IPA in 282 patients, 73 were reclassified: 31 (42.5%) from possible to probable IPA, 5 (6.8%) from EORTC criteria not met to probable IPA, and 37 (50.7%) from EORTC criteria not met to possible IPA. Probable IPA increased therefore 11.1% (64/323, 19.8% to 100/323, 30.9%), mostly due to positive PCR (31/36, 86.1%). There was no difference in mortality between newly defined possible and probable IPA (log rank p = 0.950). Mortality was higher in probable cases with lower cycle thresholds (Ct values) versus higher Ct values (p = 0.004). Receiver operating characteristic curve analysis showed an optimal Ct value cut-off of 36.8 with a sensitivity of 75% (95% CI 64.9%–85.1%) and a specificity of 61.7% (95% CI 53.5–69.9) for 12-week mortality.DiscussionThe new EORTC criteria led to 11.1% more probable IPA diagnoses, mostly due to Aspergillus PCR. Restricting positive PCR to below a certain threshold might improve the discrimination of the new EORTC IPA categories for mortality.  相似文献   
9.
席悦  张京铮 《中国校医》2022,36(12):939
目的 探讨经鼻间歇正压通气与大剂量牛肺表面活性剂治疗重症新生儿呼吸窘迫综合征的应用效果。方法 选取2019年3月—2020年6月在本院就诊的新生儿呼吸窘迫综合征患儿102例,按随机数字表法分为两组,各51例。2组患儿均接受经鼻间歇正压通气辅助呼吸及注射用牛肺表面活性剂治疗,对照组采用标准剂量治疗,观察组采用大剂量治疗。对比2组临床疗效、临床相关指标、血气分析指标,并记录两组不良反应发生情况。结果 观察组治疗总有效率为96.08%,高于对照组的84.31%,(χ2=3.991,P<0.05)。观察组用药次数、住院时间、氧疗时间及机械通气时间为(1.21±0.26)次、(14.42±2.14)d、(79.25±7.36)h、(65.24±5.01)h,短于对照组的(1.58±0.45)次、(18.74±3.87)d、(88.24±7.85)h、(74.17±6.21)h(t=5.084、6.976、5.966、7.993,P均<0.05);观察组治疗3 d后血氧分压(partial pressure of oxygen,PaO2)、氧合指数分别为(88.45±6.21)mm Hg、(350.21±12.25)mm Hg,高于对照组的(81.36±5.14)mm Hg、(336.14±11.41)mm Hg,二氧化碳分压(Partial Pressure of Carbon Dioxide,PaCO2)为(43.14±3.65)mm Hg,低于对照组的(50.21±4.35)mm Hg,(t=6.281、6.002、8.892,F=39.446、79.042、36.026,P值均<0.05)。2组均无严重不良反应发生。结论 经鼻间歇正压通气与大剂量牛肺表面活性剂治疗重症新生儿呼吸窘迫综合征患儿利于改善患儿氧合指数,进而减少机械排气时间及住院时间,值得应用。  相似文献   
10.
目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。  相似文献   
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