体外转染SV40的鼠内皮细胞生长特性的研究

体外培养的内皮细胞具有血清和生长因子的依赖性，且具有异质性，用其进行体外研究血管生成结果难以分析。本实验拟用SV40转染鼠内皮细胞，为体外研究血管生成提供稳定内皮细胞株。     

麻风病

20060098 建立巢式PCR和异源双链法检测石蜡标本麻风菌DDS耐药株；20060099 新发和复发麻风患中麻风菌的氨苯砜、利福平耐药基因的检测；20060100 甘肃省麻风病人血缘性与非血缘性亲属家庭发病的对比研究；……[编按]     

中国汉坦病毒H82O5株G2糖蛋白基因的克隆及在真核细胞中的瞬时表达

从感染病毒乳鼠脑组织提取总RNA，采用RT－PCR和分子克隆技术将扩增到的G2糖蛋白基因插入含CMV启动子的pcDNA3.1/His质粒载体中，通过脂质体介导转染COS－7细胞，用SDS－PAGE、Western-blot及IFIA方法分别测定表达产物的相对分子量及特异性。结果证明获得正向插入的G2－pcDNA3.1/His重组表达质粒，表达产物的相对分子量为56ku，与理论预期大小一致，并且可与汉坦病毒H8205株的腹水抗体起特异反应。表明构建的G2－pcDNA3.1/His重组质粒所表达的蛋白为中国汉坦病毒株特有，能在哺乳动物细胞中表达并具有抗原性，重组质粒可应用于汉坦病毒的DNA疫苗研究。     

轮状病毒全长VP4抗原在大肠杆菌中的表达

VP4是轮状病毒的主要抗原，成刺状突起位于病毒的外壳上。蛋白含量仅占病毒蛋白总量的1．5％。前期研究表明，用VP4或其片段免疫小鼠后，能有效地诱导同源或异源保护反应。本研究在大肠杆菌中表达并纯化了轮状病毒SA11株的外壳蛋白VP4，并测定了该纯化产物免疫豚鼠后的中和抗体滴度。     

新的“芯片”可以快速检测禽流感病毒

据Medscape．com 11月8日报道，美国研究人员指出，一种新的“芯片”可以检测11种不同的流感病毒株，包括禽流感病毒。在15分钟之内可以诊断出流感患。该项研究仍在进行中，研究人员希望把它发展成能够现场检测流感病毒的技术。     

加减大黄廑虫丸抑制血管生成的实验研究

目的探讨加减大黄廑虫丸对血管生成的抑制作用。方法鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）法检测加减大黄磨虫丸对血管生成的影响；采用MTS比色法观察不同浓度的加减大黄磨虫丸对血管内皮生长因子（VEGF）诱导的ECV-504细胞增殖的影响；Tran—swell小室检测不同浓度的加减大黄廑虫丸对ECV-304细胞移行的影响；Matrigel实验检测不同浓度的加减大黄磨虫丸对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果加减大黄磨虫丸中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成；MTS比色法显示，0．05—0．20g/ml浓度的加减大黄鹰虫丸对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用，而更低和更高浓度的加减大黄廑虫丸则无抑制作用。Transwell小室实验显示，加减大黄廑虫丸浓度为0、12．5、25．0和50．0mg/ml时ECV-504细胞移行数分别为208．67±17．16、132．67±16．50、78．33±13．50和18．67±6．66；Matrigel实验显示，加减大黄磨虫丸浓度为0、12．5、25．0和50．0mg/ml时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为25．67±1．53、22．33±1．53、16．33±2．52和2．33±1．53，可见抑制细胞移行和管腔形成的作用随浓度增大而增强。结论加减大黄廑虫丸具有明显抑制血管生成的作用。     

马蜂毒对癌瘤细胞杀伤作用的实验研究

马蜂毒确有直接杀伤肿瘤细胞的作用，其机理可能由于马蜂具有抑制细胞分裂作用，肿瘤细胞不能分裂增殖而受到抑制。     

幽门螺杆菌粘附作用的体外研究

置幽门螺杆菌(HP)悬液于含人喉癌上皮细胞(Hep-2)或人胃癌上皮细胞(MKN-28)的培养瓶内,经2h或3.5h培养后观察HP对细胞的粘附情况。结果发现HP能成丛地粘附在上皮细胞表面,少数侵入胞浆内。HP对MKN-28粘附率明显高于对Hep-2细胞者。随菌龄的延长或菌株的变异,HP的粘附作用明显减弱。1%D-甘露糖对HP的粘附性有部分阻抑作用。     

鸡柔嫩艾美耳球虫疫苗候选基因在大肠杆菌中的表达

目的构建柔嫩艾美耳球虫子孢子表面抗原原核表达载体，并且在大肠杆菌中表达。方法将本室构建的pMD-Mz5-7克隆质粒酶切回收目的片段定向亚克隆到pET-28b( )载体上，构建成原核表达载体pET-28b-Mz5-7，酶切鉴定正确后，在Escherichia coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达，并经SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果成功构建了目的抗原基因的原核重组表达质粒pET-28b-Mz5-7，IPTG诱导表达该融合蛋白，SDS-PAGE电泳表明，其能表达一分子质量约为37ku的融合蛋白，与预测分子质量相符，最佳反应条件为1mol／LIPTG诱导4h后表达量最高。薄层扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的18％，Western blotting结果显示，表达产物可被抗柔嫩艾美尔球虫的多克隆抗体识别，说明该融合蛋白具有很好的反应原性。结论在原核细胞融合表达Mz5-7成功，为鸡球虫病重组苗的研究奠定了基础。