新化合物Elixir-X对肝切及辐射所致衰老小鼠的抗衰老作用

目的 探讨蜂巢提取物Elixir-X对自然衰老及辐射衰老小鼠的影响，为Elixir-X的进一步研发提供药理学基础。方法 采用小鼠肝脏切除术建立自然衰老小鼠模型，将其分为空白对照组、Elixir-X组、白藜芦醇组及模型组，连续给药7 d后，检测小鼠70%肝脏切除后的再生过程中，衰老细胞、肝脏功能恢复与肝脏再生的变化，观察Elixir-X对自然衰老的影响；采用60CO辐射法建立辐射衰老小鼠模型，将其分为模型组、空白对照组、白藜芦醇组、Elixir-X高、低剂量组，通过检测小鼠肠隐窝干细胞再生、小肠绒毛结构以及衰老细胞的变化，对比不同剂量Elixir-X对辐射后衰老的影响。结果 在肝脏切除术的小鼠模型中，Elixir-X组的肝功能水平明显低于模型组的肝脏自然再生小鼠，显著促进了肝功能恢复（P＜0.05）；同时与模型组相比，Elixir-X组清除了肝脏切除后再生过程中产生的衰老细胞（P＜0.05），Ki-67的着色斑块明显增加，促进肝脏的再生，且肝血窦的扫描电镜影像结果中Elixir-X组肝血窦再生加快。60CO辐照小鼠模型中，与模型组相比，Elixir-X组有效促进辐照后肝脏功能恢复（P＜0.05），Elixir-X高剂量组体重也恢复到正常水平，与空白对照组无显著差异；与模型组相比，Elixir-X低剂量组小肠的β-Gal着色细胞减少，Elixir-X高剂量组甚至能更有效地减少衰老细胞（P＜0.05）；小肠HE染色的结果中，Elixir-X组小肠绒毛结构得到恢复；Ki-67的IHC染色中，与模型组相比，Elixir-X组着色板块更多，且着色区域都在肠隐窝干细胞位置。结论 Elixir-X能有效清除肝脏切除术引起的自然衰老与辐射引起的损伤性衰老细胞，对衰老具有显著地抑制作用。     

第三腰椎骨骼肌指数对食管癌患者生存结局的预测 价值

目的 探讨第三腰椎骨骼肌指数(L3-SMI)预测食管癌患者总生存(OS)期的最佳截止点与临床应用价值。 方法 对 2016 年 1 月至 2020 年 10 月于南通大学附属海安医院接受手术或根治性放化疗的 150 例食管癌患者进行回顾性分析,通过分 析每例患者的腹部计算机断层扫描(CT)影像,计算 L3-SMI。 通过受试者操作特征(ROC)曲线认定 L3-SMI 预测食管癌患者预 后的最佳截止点,并将所有患者分为低 L3-SMI 组与高 L3-SMI 组进行生存分析。 采用 Kaplan-Meier 曲线计算两组患者的 3 年 OS 率,单、多因素 Cox 回归分析确定 L3-SMI 在食管癌患者中的独立预后价值。 结果 研究队列中,男性患者 L3-SMI 平均 值为(43. 8±6. 3)cm 2 / m 2 ,女性为(38. 7±6. 7)cm 2 / m 2 ,L3-SMI 预测食管癌患者预后的理想截止点为:男性<42. 8 cm 2 / m 2 ,女性< 39. 2 cm 2 / m 2 ,曲线下面积(AUC)值分别为 0. 628(95%CI = 0. 515~ 0. 742)和 0. 654(95%CI = 0. 513 ~ 0. 796)。 根据 L3-SMI 的 最佳截止点,将所有患者分为高 L3-SMI 组(n = 79)与低 L3-SMI 组(n = 71)。 结果显示,两组患者 3 年 OS 率分别为 33. 5%和 54. 6%,差异有统计学意义(χ 2 = 5. 358,P = 0. 021)。 亚组分析表明,低 L3-SMI 与男性患者不良预后显著相关( 3 年 OS 率: 24. 8%比 53. 6%,χ 2 = 4. 752,P= 0. 029)。 对于女性食管癌患者,低 L3-SMI 组患者较高 L3-SMI 组有更低的 3 年 OS 率(39. 8% 比 65. 4%),但差异无统计学意义(χ 2 = 1. 835,P= 0. 176)。 单、多因素 Cox 回归分析证实,影响食管癌患者预后的独立因素包 括低 L3-SMI(HR= 1. 669,95%CI = 1. 062 ~ 2. 625,P = 0. 027)、预后营养指数(PNI) <50. 2(HR = 1. 700,95%CI = 1. 033 ~ 2. 796, P= 0. 037)与 TNM 分期Ⅲ期(HR= 1. 503,95%CI = 1. 077~ 2. 479,P = 0. 024)。 结论 L3-SMI 是一项预测食管癌患者预后的重 要影像学参数。     

免疫介导坏死性肌病发病机制及诊治分析

目的 探讨免疫介导坏死性肌病的发病机制与临床诊治思路。方法 选取我院肾内科2016年3月收治的1例经肌活检证实为免疫介导坏死性肌病的女性肾病综合征患者，给予糖皮质激素治疗，同时积极控制其肾病综合征，并对其住院诊治过程及门诊随访结果进行分析。结果 糖皮质激素治疗后，肌病迅速得到缓解。随访22个月，肾病在泼尼松联合免疫抑制剂治疗半年，小剂量激素维持半年后得到临床缓解，停药后肾病稳定，随访期间肌病未再复发。结论 免疫介导坏死性肌病为免疫介导的肌病，骨骼肌活检是确诊的主要手段，该病对糖皮质激素治疗的反应良好。但在治疗过程中应重视可能引起免疫紊乱的共病治疗。     

淫羊藿总黄酮改善自然衰老大鼠睾丸支持细胞分泌功能衰退的作用

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对衰老睾丸支持细胞(Sertoli细胞)分泌功能衰退的影响,并从肌醇需酶1α(IRE1α)/X盒结合蛋白1(XBP1)信号通路探讨其分子机制。方法将36只SPF级18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组和TFE 10及40 mg·kg~(-1)组,每组12只;另取10只2月龄大鼠作为壮龄对照组。每天定时ig给TFE 1次,每5 d间隔2 d再继续ig给药,给药共计4个月。计算睾丸指数;HE染色观察睾丸组织形态;实时定量PCR和Western印迹法检测睾丸组织中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、骨形态形成蛋白4(BMP4)及干细胞因子(SCF)mRNA和蛋白表达水平;检测睾丸组织中磷酸化IRE1α(p-IRE1α)和XBP1蛋白表达水平;免疫荧光法检测睾丸组织内Sertoli细胞数量和p-IRE1α定位。结果与壮龄对照组比较,自然衰老组大鼠睾丸指数显著降低(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE 40 mg·kg~(-1)组睾丸指数显著升高(P<0.05)。HE结果显示,自然衰老组睾丸曲细精管的形态结构紊乱,部分生精细胞发生脱落;TFE给药组能改善睾丸曲细精管的形态结构。实时定量PCR结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组Sertoli细胞分泌因子GDNF和SCF mRNA表达水平均显著下调(P<0.01);Western印迹结果显示,GDNF,BMP4和SCF蛋白显著下调(P<0.01)。与自然衰老组相比,TFE给药组分泌因子mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组睾丸组织中p-IRE1α和XBP1蛋白表达均显著下调(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE给药组p-IRE1α和XBP1蛋白表达显著上调(P<0.01)。免疫荧光结果显示,壮龄对照组、自然衰老组和TFE给药组Sertoli细胞数量无显著差异。不仅在生精细胞胞质广泛表达,在Sertoli细胞胞质亦有表达。结论 TFE可显著改善自然衰老所致大鼠睾丸Sertoli细胞分泌功能衰退,其机制可能与调节IRE1α/XBP1信号通路有关。     

4周有氧运动对Apelin基因敲除鼠糖耐量和骨骼肌糖代谢相关基因表达的影响

目的:探讨有氧运动训练对Apelin基因敲除鼠葡萄糖耐量和骨骼肌糖代谢相关基因表达变化的影响。方法:8周龄野生C57BL/6J小鼠和Apelin敲除小鼠各40只,两种鼠进一步分为安静组和运动组,每组20只,共4组,分别为:野生安静组、野生运动组、敲除安静组、敲除运动组。运动组进行前两周跑速为15 m/min、后两周跑速为20 m/min、坡度为5°的跑台运动,每周运动6天,每天运动1小时。运动组最后一次运动休息48 h后,4组中每组10只进行糖耐量实验(GTT);每组剩余的10只,进行骨骼肌指标的测定。RT-PCR测量骨骼肌Apelin及糖代谢相关基因Glut4、Gbe1、Phka1、Hk2和Pfkm mRNA表达量;Western blot法测定骨骼肌Apelin和Glut4蛋白含量。结果:(1)敲除安静组与野生安静组相比,GTT曲线下面积(AUC)显著增加(P<0.01),骨骼肌内Glut4,Gbe1,Phka1,Hk2和Pfkm mRNA和Glut4蛋白表达都显著性降低(P<0.05)。(2)敲除运动组和野生运动组相比,骨骼肌内Glut4,Gbe1,Hk2和Pfkm mRNA和Glut4蛋白的表达显著性降低(P<0.05)。敲除运动组和敲除安静组相比,小鼠GTT显著性改善,骨骼肌内Glut4,Gbe1,Phka1和Hk2 mRNA表达显著性增加(P<0.05)。(3)野生运动组和野生安静组相比,小鼠糖耐量和骨骼肌内Apelin mRNA和蛋白以及糖代谢相关基因表达没有变化。结论:(1)Apelin KO鼠的糖耐量受损,骨骼肌葡萄糖代谢相关基因的表达降低;(2)4周有氧运动可改善Apelin敲除鼠的糖耐量降低,对骨骼肌糖代谢相关基因表达有一定的积极促进作用。     

BMI和SMI在类风湿关节炎继发骨质疏松中的临床研究

目的探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的体质量指数(body mass index,BMI)、脂肪质量指数(fat mass index,FMI)和骨骼肌质量指数(skeletal muscle mass index,SMI)与RA患者继发骨质疏松(osteoporosis,OP)的相关性。方法选择RA患者418例,同时选择同期健康体检的158名正常人作为对照组。采用双能X线骨密度仪测量研究对象股骨颈(Neck)、大转子(G.T)、总髋部(Hip)、腰椎1～4(L1、L2、L3、L4)部位的骨密度(bone mineral density,BMD)并参照OP诊断标准进行分级,采用直接节段多频率生物电阻抗测试法测定研究对象的骨骼肌含量、体脂肪、矿物质含量,并计算BMI、FMI和SMI。结果①RA患者各测定部位的BMD均明显低于正常对照组(P0.0001),其OP发生率(42.6%)明显高于对照组(13.9%)(χ~2=41.551,P0.0001)。②RA患者肌少症发生率(54.5%)明显高于对照组(9.0%)(χ~2=96.747,P0.0001)。③不同BMI组RA患者间各部位的BMD、SMI、FMI、矿物质含量、体脂百分比和骨骼肌含量是明显不同的(P0.0001),且随着BMI的增高,上述各指标均呈线性增高趋势(P0.0001)。④在BMI为消瘦的RA患者中,肌少症组中OP发生率与无肌少症组中相近(48.1%vs 45.5%,χ~2=0.027,P=0.870),在BMI为正常、超重或肥胖组中,肌少症组中OP发生率均明显高于无肌少症组(56.6%vs 33.0%,χ~2=12.238,P0.0001;52.6%vs 22.7%,χ~2=10.953,P=0.001)。在有或无肌少症的RA患者中,不同BMI组间RA患者OP发生率无明显差别(P=0.563、0.148)。⑤线性相关分析显示,SMI与各部位的BMD和BMI均呈正直线相关(P0.0001),而与体脂百分比呈负直线相关(P0.0001)。⑥多元Logistic回归分析显示,SMI(OR=0.696,P=0.001,95%CI:0.565～0.857)为RA患者发生OP的保护因素,年龄(OR=1.091,P0.0001,95%CI:1.065～1.117)和性别(OR=5.259,P0.0001,95%CI:2.543～10.876)均为RA患者发生OP的危险因素。结论 BMI、SMI和FMI均与RA患者OP的发生有关,但SMI是RA患者发生OP最重要的保护因素。     

竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用

目的探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用。方法 48只2月龄大鼠随机分成自然衰老组及竹节参总皂苷低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组12只,待大鼠长至18月龄后,再取12只2月龄大鼠作为正常对照组,竹节参总皂苷组大鼠从18月龄开始灌胃给药,连续4个月,每星期停药1 d。HE染色观察脂肪组织形态学变化,RT-PCR法检测脂肪组织白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达,Western blot检测脂肪组织IL-1β、TNF-α、Toll样受体4 (TLR4)、NF-κB、p NF-κB蛋白表达。结果自然衰老组大鼠脂肪细胞排列紊乱,炎症细胞浸润明显增加,坏死及变大的脂肪细胞增多,经竹节参总皂苷处理后上述病理变化得到明显改善。与自然衰老组比较,竹节参总皂苷组IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-αmRNA表达,以及IL-1β、TNF-α、TLR4、NF-κB、p NF-κB蛋白表达均有一定程度下调,以中、高剂量组更显著(P0. 05)。结论竹节参总皂苷可改善自然衰老大鼠脂肪组织炎症,其机制可能涉及TLR4/NF-κB信号通路。