肥胖相关新型生物标志物的研究及展望

肥胖是一种体脂过多或分布异常的病理状态，是引发2型糖尿病、代谢症候群、心脑血管疾病、非酒精性脂肪肝，甚至某些类型的癌症等重大疾病的重要诱因。大量研究表明，诸多脂肪因子（adipokines）和肝细胞因子（hepatokines）水平在肥胖时发生显著变化，通过检测此类因子的动态水平可以预测或评估疾病的发生、发展及其并发症情况，并评判其治疗效果。在目前已发现的众多脂肪因子和肝细胞因子中，大量人体和动物研究一致发现在肥胖状态下脂联素（adiponectin）水平下降，而成纤维生长因子21（FGF21）和生长分化因子15（GDF15）则上升。它们不仅可作为肥胖诊断和监控的生物标志物，亦参与了肥胖的病理生理过程，是潜在的治疗靶点。其中脂联素已广泛应用于肥胖相关代谢病的风险评估，而FGF21和GDF15长效类似物或受体激动剂则被用于治疗肥胖相关疾病并且已开始相关的临床试验。文章着重讨论脂联素、FGF21和GDF15在肥胖及其并发症中的地位及其之间的密切关系，并展望这3种新型肥胖生物标志物的研究发展方向和临床应用前景。     

肺癌患者化疗后三种肿瘤标志物的表达变化及意义

目的探讨肺癌患者化疗后的癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)表达变化。方法选取2017年5月至2020年2月间南京市六合区人民医院收治的100例肺癌患者,将这些患者作为肺癌组,另随机选取同期100例健康体检人员作为健康组。统计分析两组人员化疗前的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平、肺癌组化疗成功患者化疗前后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平、肺癌组化疗失败患者化疗前后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平。结果肺癌组患者化疗前的血清NSE、CEA和SCC-Ag表达水平均高于健康组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。肺癌组化疗成功患者化疗后的血清NSE、CEA和SCC-Ag表达水平均低于化疗前,均高于健康组,差异均有统计学意义(P <0.05)。肺癌组化疗失败患者化疗后的血清NSE、CEA、SCC-Ag表达水平均高于化疗前,均高于健康组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论对肺癌患者的NSE、CEA、SCC-Ag表达水平进行检测能够将化疗效果有效反映出来,进而有效指导临床的下一步治疗工作,从而有效改善患者预后。     

骨疏灵的UPLC指纹图谱的建立及8种成分的含量测定

目的采用超高效液相色谱法(UPLC)建立骨疏灵(GSL)的指纹图谱并测定其中8种成分的含量。方法色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;柱温为35℃;流速为0.15 mL·min~(-1);进样量为2μL;检测波长为260 nm。使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立GSL的指纹图谱,与对照品比对指认出色谱峰,并进行相似度评价。使用SPSS 26.0软件对12批样品进行聚类分析。同时测定12批GSL中淫羊藿苷等8种成分的含量。结果标定了共有峰43个,指认出峰13为毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、峰16为蜕皮激素、峰28为芒柄花苷、峰30为毛蕊异黄酮、峰37为朝藿定A、峰38为朝藿定B、峰41为朝藿定C、峰42为淫羊藿苷。12批GSL指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.9920～0.9960。当平方欧氏距离为2时,12批样品聚为三类,S4聚为一类,S7聚为一类,其余10批聚为一类;当平方欧氏距离为3时,12批样品可聚为两类,S4聚为一类,其余11批聚为一类。测定的8种成分的含量分别为0.931～1.985、2.197～5.058、0.319～0.737、0.134～0.325、3.380～6.770、17.463～35.547、18.298～37.390、11.933～24.368 mg·g~(-1)。结论首次建立了骨疏灵UPLC指纹图谱结合含量测定的质量控制方法,可为该制剂物质基准的质量控制与评价提供参考。     

正己烷亚急性染毒对小鼠肝细胞形态及肝功能相关酶的影响CSCD

目的研究正己烷亚急性染毒对小鼠肝细胞形态及肝功能相关酶的影响。方法40只昆明种清洁级小鼠根据不同染毒剂量随机分为低、中、高剂量染毒组和对照组,每组10只。采用灌胃的方式进行正己烷染毒,低、中、高剂量染毒组每只小鼠分别给予浓度为500、1000和2000 mg/kg正己烷0.2 ml/d灌胃;对照组给予食用油0.2 ml/d灌胃,1次/d,连续28 d。染毒结束后,对各组小鼠肝组织进行病理学观察,并进行血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆碱酯酶(CHE)以及肝组织ATP酶、脂质过氧化指标的测定。结果与对照组相比,高剂量染毒组小鼠出现明显的肝细胞肿胀、坏死,炎性细胞浸润,细胞间分界模糊等改变。与对照组相比,高、中、低剂量染毒组小鼠血清ALT、AST活力明显升高,高和中剂量染毒组小鼠血清CHE活力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,高剂量染毒组小鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活力均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,高、中、低剂量染毒组小鼠肝组织T-SOD活力明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);高和中剂量染毒组小鼠肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力明显降低,丙二醛(MDA)浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论正己烷亚急性染毒所致的脂质过氧化增强,可导致肝细胞形态学的异常及肝功能的损伤。     

肠杆菌目细菌产耐碳青霉烯酶的基因分型检测方法进展

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）已成为全球性的公共卫生问题。有文献报道由CRE引起的感染，尤其是血流感染，会导致患者死亡率较高，为临床治疗带来了极大的挑战。肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的主要机制是细菌产生了不同型别的耐碳青霉烯类水解酶。目前只有少数几种新型抗菌药物可以用于CRE的治疗如头孢他啶/阿维巴坦，但头孢他啶/阿维巴坦对持有金属β内酰胺酶的CRE没有活性，所以快速、准确地检测CRE菌株所产碳青霉烯酶种类，对临床合理选择抗菌药物至关重要。本文就目前检测肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的基因分型实验方法的优缺点进行总结分析。     

基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定结合化学计量学的怀牛膝质量评价＊

目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱，并对β-蜕皮甾酮，25R-牛膝甾酮，25S-牛膝甾酮进行含量测定，同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，检测波长280 nm，以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，柱温25℃，进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰，运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对15批怀牛膝药材进行相似度分析，使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析，使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰，指认了3个已知成分，并对其进行含量测定，化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类，并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性，可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。     

免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶200 (m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶20 (m/m)在37℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发。上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发...     

蒙药绿松石的质量标准研究＊

目的 建立蒙药绿松石的质量标准。方法 收集不同产地绿松石，共10批。观察绿松石样品和粉末的性状并进行理化鉴别；按2020年版《中国药典》（四部）通则方法测定绿松石样品中水分、浸出物含量；采用原子吸收光谱法测定绿松石样品铜元素含量。结果 绿松石为不规则、周围带有黑石的块状物，表面蓝绿色，体重，质硬脆，难砸碎，断面呈贝壳状，蜡样光泽，粉末呈灰绿色，无臭，味淡；理化鉴别结果显示，呈铜盐反应；10批次样品中水分含量为0.41%-3.94%（SD=1.37%），浸出物含量为0.21%-0.81%（SD=0.21%），铜元素含量为3.03%-4.63%（SD=0.63%）。结论 初步拟定绿松石中水分含量不得超多5.0%、浸出物含量不得低于0.10%，铜元素含量应为2.60%-4.84%，制定的标准可用于蒙药材绿松石的质量控制。     

反相高效液相色谱法分析纤溶酶纯度的方法研究

目的 建立纤溶酶反相高效液相色谱纯度测定方法。方法 采用SHISEIDO CAPCELL PAK C₁₈ SG300（250 mm×4.6 mm，5 μm），以0.1%三氟乙酸溶液-乙腈（95：5）为流动相A，以0.08%三氟乙酸溶液-乙腈（20：80）为流动相B，进行梯度洗脱，体积流量为0.7 mL·min^-1，检测波长280 nm，柱温40℃。参照2020年版《中国药典》四部9101药品质量标准分析方法验证指导原则进行专属性、检测限、耐用性考察。应用所建立的方法和分子排阻色谱法对3批样品纯度进行检测。结果 建立的反相色谱法专属性强，检测限为0.01%，耐用性强。对3批样品进行检测，质量分数在93.5%~96.9%，结果准确。结论 建立反相色谱法测定纤溶酶纯度，分辨率更高、重现性更好，可进行更好的质量控制。