德国胃癌腹膜转移腹腔热灌注化疗的实践和进展

本文系统介绍了德国胃癌腹膜转移治疗和预防方面的临床试验结果和治疗经验。肿瘤细胞减灭术（cytoreductive surgery，CRS）联合腹腔热灌注化疗（hyperthermic intraperitoneal chemotherapy，HIPEC）和（或）胃切除术可以在有潜在治愈性的情况下实施，但仅能在经验丰富的中心并根据多学科诊疗团队的临床决策开展。目前，德国正在进行有关CRS+HIPEC治疗胃癌腹膜转移的有效性和安全性的高质量临床试验，也进行着有关胃癌切除术后辅助HIPEC治疗的临床试验。德国发明的加压腹腔气溶胶化疗（pressurized intraperitoneal aerosol chemotherapy，PIPAC）技术联合系统性化疗可作为姑息性治疗手段处理及预防腹水等并发症，期待有更多临床研究结果证实其有效性。      

肝脏CT动态增强扫描非刚性对位减影技术的质量评价

目的利用血管减影前后的吻合程度，探讨非刚性对位减影技术在肝脏CT动态增强检查中的质量评价。 方法收集2018年12月至2019年2月于中山大学附属第一医院行肝脏CT动态增强检查的50例患者资料，使用非刚性对位减影技术获得减影图像，对减影前后的图像质量进行评价，定性评价包括图像伪影情况及解剖错配程度，定量评价测量各血管（腹主动脉、肝右动脉、肝左动脉、门静脉主干、门静脉右支、门静脉左支）减影前后在动脉晚期、门静脉晚期的CT值。采用混合线性效应模型及拟合方程评估减影前后各血管的CT值曲线拟合程度。 结果减影后图像均无明显解剖结构错配导致的伪影，3名测量者一致性较高（ICC=0.844，P<0.001）。减影技术一定程度上会降低各血管的CT值，与强化分期不存在交互作用。无论是在动脉晚期还是门静脉晚期，减影前后各血管CT值走势一致，CT值变化曲线吻合。 结论非刚性对位减影技术可轻松实现肝脏CT动态增强检查的图像减影，并获得良好的图像质量。     

基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理

目的验证Cyclin D1及其下游信号蛋白对成骨细胞增殖的调控作用,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法培养成骨样细胞株UMR-106,运用CRISPR/Cas9技术敲减Cyclin D1基因后,将细胞分为基因敲减+生理盐水组(组1)、基因敲减+健骨颗粒组(组2)、病毒空载体细胞(组3,阴性对照)。未行基因敲减的细胞分为正常细胞+生理盐水组(组4)和正常细胞+健骨颗粒组(组5)。分别用生理盐水血清或健骨颗粒含药血清干预各组细胞24、48、72 h,通过CCK8法检测细胞增殖情况,利用Real time PCR检测Cyclin D1、Cyclin E、CDK 2、CDK 4、Rb及E2F-1基因的表达水平。结果经Western-bolt检测表明基因敲减的成骨细胞Cyclin D1蛋白表达明显下降。CCK8法检测结果显示,与组4相比,组5增殖速度变快(P0. 05),组3增殖速度无差异(P0. 05),组1和组2增殖速度均减慢(P0. 05);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2增殖速度无统计学意义(P0. 05)。Real time PCR检测结果显示,与组4相比,组5 Cyclin D1、CDK2、CDK4、Cyclin E、Rb及E2F-1 mRNA的表达明显增高(P0. 05或P0. 01),组3表达无统计学意义(P0. 05),组1和组2表达明显降低(P0. 05或P0. 01);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2无统计学意义(P0. 05)。结论 Cyclin D1及其下游信号蛋白是调控成骨细胞增殖的关键因素;健骨颗粒可以通过调节Cyclin D1及其下游信号蛋白促进成骨细胞增殖。     

直接测压法测量腹内压正常值范围及腹水与腹内压波动关系的研究

目的 通过直接测压法寻找腹内压的正常范围，并探讨腹水量与腹内压的关系。 方法 采用前瞻性研究的方法，通过直接测压法测量腹内压，获得无腹水患者腹内压正常值范围。同时测定腹水组患者腹内压值，与无腹水组进行比较。取无腹水患者，在腹腔注入不同体积含化疗药物的生理盐水，动态监测腹水增加后腹内压的变化，并建立两者关系式。 结果 ①67例无腹水患者直接测压法测得腹内压的95%的可信区间(95%CI)为4.99~6.11 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa)；②无腹水组的腹内压明显低于腹水组(t=-2.188，P=0.031)；③无腹水患者腹内灌注生理盐水体积与腹内压变化之间具有显著的相关性(R=0.113，t=5.206，P<0.01)。设定灌注药体积为自变量(X)，腹内压为因变量(Y)，一元回归方程式为:Y=7.651X+1.491(P<0.01)；④腹腔灌注生理盐水后获得腹内压测量值范围4~19 mm Hg。其中<12 mm Hg 48人次，12~15 mm Hg 52人次，16~20 mm Hg 5人次，21~25 mm Hg 0人次，>25 mm Hg 0人次，所有患者均未出现ACS。 结论 直接测压法腹内压的正常值范围是4.99~6.11 mm Hg，与Kron测量法正常值范围在数值上不同，需进一步研究确定两者之间的关系。腹水增多与腹内压的升高，存在正向线性关系，因此腹水增多时需警惕腹腔内高压(IAH)及腹腔间隔室综合征(ACS)的发生；腹水增多引起ACS可能与高压状态持续时间相关，早期缓解腹内高压，对预防和治疗ACS具有重要意义。      

不明原因消化道出血的影像学检查

消化道出血的检查方法有消化道内镜、影像学和手术探查,其中影像学检查大多无创,对进一步消化道内镜检查、介入栓塞治疗和手术治疗均有指导意义。其中显性出血的影像学检查以CT血管造影、DSA和99mTc-RBC显像为主要检查方法,隐性出血的主要成像方法有CT小肠造影、99mTcO4-显像。当胃镜和结肠镜检查未发现异常,推测出血可能源于小肠时,需进行小肠检查。目前CT小肠造影不仅有可能检测到小肠隐匿性出血,而且还可以提供肠腔内外的病变信息,达到病因诊断。     

利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9系统敲减α2δ1对人肝癌细胞系Hep-12干性的影响

目的 通过规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统敲减人肝癌细胞系Hep12中电压依赖性钙离子通道 α2δ1的表达，观察α2δ1敲减后对肝癌细胞干性的影响。方法 设计3对靶向α2δ1的向导 (sgRNA)，长度为20 bp，构建到lenti CRISPRv2-puro载体上，然后在体外检测sgRNA切割活性，利用慢病毒包装系统包装含有sgRNA的重组质粒，将包装好的病毒感染Hep-12细胞，2 d后加入嘌呤霉素筛选。利用Western blotting验证α2δ1的敲减效果和干性相关基因的表达。通过成球实验检测其体外自我更新能力的变化。结果 测序结果显示，sgRNA成功插入载体质粒；体外切割实验显示，3条sgRNA均有切割活性；Western blotting结果显示，α2δ1基因的表达显著降低，干性相关基因B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1(BMI1)和Nanog的表达显著被抑制；无血清培养基成球实验结果表明，敲减α2δ1导致Hep-12细胞的体外自我更新能力减弱。结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建敲除α2δ1基因的Hep-12细胞系；敲除α2δ1基因后能抑制Hep-12细胞肿瘤干细胞样特性。     

D-ACT与3D-DSA技术对颅内动脉瘤诊断价值探讨

目的早诊断、早治疗是改善颅内动脉瘤(intracranial aneurysm,LAN)患者预后关键,但临床检查及诊断方法较多,当前尚未明确各方法在LAN中诊断价值。本研究探讨LAN患者实施三维CT血管造影术(three dimensional computerized tomography angiography,3D-CTA)与三维数字减影血管造影术(three dimensional digital subtraction angiography,3D-DSA)临床诊断价值。方法选取河南省儿童医院2015-10-01-2018-10-01收治的80例LAN患者作为研究对象,以检验方法分为研究组和对照组,各40例。研究组实施3D-DSA检查,对照组实施3D-CTA检查,以全脑血管造影为金标准,对两组检出情况、敏感性、特异性、准确性、阳性预测值及阴性预测值进行评估。结果以全脑血管造影为金标准,研究组阳性检出率及阴性检出率分别为62.50%和37.50%,对照组分别为52.50%和47.50%,两组比较差异无统计学意义,χ~2=0.818 4,P=0.365 6。瘤体检出率两组比较,差异无统计学意义,P>0.05。研究组检出准确率为92.50%,与对照组的90.00%比较,差异无统计学意义,χ~2=0.058 2,P=0.809 4;灵敏度为92.00%,与对照组的90.48%比较,差异无统计学意义,χ~2=0.053 2,P=0.817 6;特异性为93.33%,与对照组的89.47%比较,差异无统计学意义,χ~2=0.082 1,P=0.956 3;阳性预测值为92.00%,与对照组的90.48%比较,差异无统计学意义,χ~2=0.520 8,P=0.470 7;阴性预测值为93.33%,与对照组的89.47%比较,差异无统计学意义,χ~2=0.965 1,P=0.325 9。结论 LAN患者实施3D-CTA和3D-DSA技术诊断均有显著价值,临床可根据患者病情、治疗需求及实际需求选择合适诊断方法。