柯萨奇病毒B组IgM抗体检测抗原片的研制,优化及应用价值的研究

正柯萨奇病毒B组(CoxB)是单股正链小RNA病毒,是呼吸道感染的主要病原体之一。根据血清型,该B组病毒可分为B1、B2、B3、B4、B5、B6六种类型,主要侵犯免疫力底下的围生儿,可引起脑膜炎,中枢神经系统感染等多种疾病,亦是引起病毒性心肌炎的主要病原体之一,占病毒性心肌炎诱因的20%-25%,病情严重者可导致死亡。CoxB传染源为病人及隐性感染者,可经口、呼吸道、肠道传播或胎儿宫内传染。     

8种呼吸道感染病原体抗原片的研制及临床检测

正呼吸道传染病是高发流行病,具有人群普遍易感,诱发原因广泛,传染性强,传播速度迅速,较难控制等特点[1],如今呼吸道感染已占儿科门诊的60%以上。而快速高效地诊断出患者感染的呼吸道病原体类型有助于尽快确定治疗方案,防止病情加重和迁延不愈。血清学检测是临床常用的呼吸道传染病初步筛查、诊断方法。间接免疫荧光法是临床检测的经典及金标准实验[2],因其方便、灵敏、特异、高效的特点常用于临床病原体的初步诊断。为此我们与北京英诺特生物技术有限公司合作,运用细胞培养     

4℃保存红细胞内皮型一氧化氮合酶表达情况的研究

目的鉴定红细胞(RBCs)中有无内皮型一氧化氮合酶(eNOS),探讨在4℃保存条件下,RBCs中的eNOS含量随保存时间变化的规律。方法采用免疫印迹(WB)和免疫荧光技术检测库存红细胞膜标本中有无eNOS;采用逆转录-PCR(RT-PCR)技术eNOS-mRNA库存红细胞中的检测。结果 RBCs中eNOS检测结果呈阳性。灰度分析结果表明:在RBCs保存35 d内,并不能引起eNOS含量的变化;而RBCs中并没有检测到eNOS-mRNA的存在。结论 RBCs含有eNOS;在库存血液35 d的保存期内,RBCs中的eNOS含量保持稳定。另外,在RBCs中未发现有eNOS-mRNA存在。     

甲型流感病毒快速基因分型POCT方法的建立

目的建立一种无需核酸提取,直接检测鼻咽拭子中甲型流感病毒H1HA pdm09、H3HA亚型和季节性流感病毒H1HA non-pdm09的POCT快速分型方法。方法针对3种流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因序列保守区设计高度特异性的引物和HyBeacon探针,同时以人类RNaseP基因作为内参。优化多重PCR反应条件,建立用熔解曲线分析甲型流感病毒基因分型的方法,并将其应用到ParaDNA核酸POCT检测仪,对50例甲型流感病毒抗原初筛阳性且经过实时荧光定量PCR检测的临床鼻咽拭子标本进行检测。结果该方法可在1.5 h内完成对3种甲型流感病毒亚型HA基因的特异性扩增和分型,与其他7种呼吸道病原微生物无交叉反应,其核酸检测下限为50 copies/μl。对临床50例甲型流感病毒抗原阳性的鼻咽拭子标本进行直接检测,检出H1HA pdm09阳性标本48例,H3HA阳性标本2例,未检出季节性流感H1HA nonpdm09阳性标本。结论基于HyBeacon探针和ParaDNA核酸POCT检测仪所建立的甲型流感病毒快速分型方法能同时检测H1HA pdm09、H3HA和季节性流感病毒H1HA non-pdm09。该方法无需核酸提取,操作简便,检测时间短,适于对甲型流感病毒抗原初筛阳性的鼻咽拭子开展现场基因分型检测,可为流感的诊治和防控提供及时快速的实验室依据。