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1.
2.
目的探讨沉默原癌基因Bmi-1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus integration site 1)对人小细胞肺癌NCI-H345细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将NCI-H345细胞分为对照组(不做处理)、Bim-1 NC组(转染转染Bmi-1基因阴性对照序列)和Bmi-1转染组(转染转染Bmi-1基因序列)3组,以脂质体转染法转染上述各组细胞,采用荧光定量(RT-PCR)检测Bmi-1 mRNA的相对表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测Bmi-1和Cleaved Caspase-3蛋白的相对表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果转染Bmi-1 48 h后,与对照组相比,Bmi-1转染组NCI-H345细胞中Bmi-1 mRNA和蛋白的相对表达水平均明显降低(P0.05);Bim-1 NC组和对照组相比,Bim-1 mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,Bmi-1 NC组细胞中G0/G1期、S期和G2/M期细胞所占比例差异无统计学意义(P0.05),Bmi-1转染组中G0/G1期细胞所占比例明显升高,S期和G2/M细胞所占比例明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,Bmi-1 NC组的细胞凋亡率差异不显著(P0.05),Bmi-1转染组的细胞凋亡率显著升高(P0.05)。Western blot检测结果显示,Bmi-1转染组细胞中Cleaved Caspase-3蛋白的表达水平较对照组明显升高(P0.05),Bmi-1 NC组细胞中Cleaved Caspase-3蛋白的表达水平与对照组间差异不显著(P0.05)。结论 Bmi-1基因沉默能诱导NCI-H345细胞凋亡,其作用机制可能与阻滞G0/G1期和上调Cleaved Caspase-3蛋白的表达有关。 相似文献
3.
目的 筛选HCV NS3的小鼠T细胞表位多肽序列.方法 BALB/c小鼠用HCV NS3加po-ly (I∶C)或CpG ODN及Montanide ISA720佐剂免疫后,分离其脾淋巴细胞,以覆盖HCV NS3全基因的合成重叠多肽组成的不同多肽库进行刺激,以ELISPOT及流式细胞术检测分泌干扰素γ(IFN-γ)的细胞数及CD8+/IFN-γ+细胞或CD4 +/IFN-γ+细胞百分比,确定抗原性最强的多肽库,找出HCV NS3的小鼠T细胞表位多肽.结果 通过ELISPOT及流式细胞术检测,能够刺激淋巴细胞分泌IFN-γ最多及CD8 +/IFN-γ+细胞或CD4+/IFN-γ+细胞百分比最高的多肽被选出作为阳性多肽,其中的一个多肽经进一步的ELISPOT及流式细胞术检测确认,其序列为GGCSGGAYDⅢCDECHS.结论 HCV NS3小鼠T细胞表位序列的确定为HCV疫苗的研究打下了基础. 相似文献
4.
肝脏纤维化的诊断对策 总被引:10,自引:1,他引:10
肝脏纤维化的诊断对策金博,李玉彬肝脏纤维化是一个慢性的、渐进性的过程,诊断的主要问题在于如何确定肝脏纤维化的程度,从而正确的估计病情并指导治疗。目前采用的诊断方法可分为三大部分,即病理学诊断、影像学诊断和血清学诊断。一、病理学诊断到目前为止,肝纤维化... 相似文献
5.
6.
目的四氯化碳(CC l4)皮下注射建立兔肝硬化动物模型,观察Ⅳ型胶原酶门脉灌注对肝硬化组织中α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法取雄性新西兰大白兔,采用臀部皮下注射50%CC l4橄榄油0.23 mL/kg,每周2次,共12周制作肝硬化动物模型,注射等量橄榄油作为对照。12周后各组动物均建立门静脉给药通路,将已形成肝硬化并门静脉插管成功的33只兔随机分为两组(组1,组2),组1有16只、组2有17只。组1经门静脉给药通路注入0.1%Ⅳ型胶原酶1.5 mL,组2注入等量0.9%NaC l,5次/周,共4周。将造模对照组中门静脉插管成功的30只兔同样随机分为两组(组3,组4),每组15只,处理方法同前。4周后,将各组动物处死后留取肝脏组织,固定后α-SMA免疫组织化学染色,行积分光密度、面密度分析。结果肝硬化动物肝脏α-SMA表达显著增强;门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶肝硬化动物肝脏纤维化程度明显降低,但α-SMA表达强度显著增高。结论采用门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶可显著增高α-SMA表达,可能与肝脏肝星状细胞激活有关。 相似文献
7.
8.
9.
肾上腺髓质素 (Adrenomedullin ,ADM )与许多疾病的发生发展密切相关。我们检测了健康人及肝硬化和十二指肠溃疡患者血浆ADM水平 ,观察其含量变化并探讨其临床意义。 对象与方法1.对象 :( 1)十二指肠溃疡组 :经胃镜检查证实为十二指肠球部溃疡活动期患者 15例 ,男性 11例 ,女性 4例 ,平均年龄37.6岁 ;( 2 )肝硬化组 :经住院临床确诊的乙型肝炎性肝硬化患者 31例 ,男性 2 7例 ,女性 4例 ,平均年龄 44.8岁 ;( 3)对照组 :本院健康工作人员 2 5名 ,男性 12名 ,女性 13名 ,平均年龄 42 .0岁 ,均无心、脑、肺、肝、肾、内… 相似文献
10.
目的应用四氯化碳(CCl4)诱导兔肝硬化模型,观察Ⅳ型胶原酶门脉灌注对肝硬化程度及全身重要器官组织病理学的影响。方法新西兰大白兔皮下注射50%CCl4橄榄油造模后,将已形成肝硬化并门静脉插管成功的30只兔随机分为2组,组1经门静脉给药通路注入0.1%Ⅳ型胶原酶1.5 mL,组2注入等量0.9%氯化钠,5次/周,共4周。4周后,将各组动物处死,留取各器官组织,观察其病理学变化。结果造模成功后可观察到典型肝硬化病理表现,门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶肝硬化动物肝脏纤维化程度明显降低,门静脉、心脏、肺、肾脏、脑组织等部位组织病理学无异常表现。结论采用门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶可显著降低肝纤维化程度,在此剂量下,具有一定的全身安全性。 相似文献