人IL_2活性测定及其影响因素的探讨

作者建立了小鼠胸腺细胞MTT比色分析法并检测了33份正常人的IL_2活性。探讨了影响人IL_2活性测定的因素并与~3H-TdR掺入法进行比较。结果表明,该法简便,稳定,可行,与~3H-TdR掺入法比较二者有较好的一致性,认为本法可用于临床IL_2样本的检测。     

免疫应答类型的重新分类

过渡性免疫应答由原属固有免疫应答的原始B1细胞、γδT细胞和NKT细胞所组成.其中原始B1细胞承担过渡性免疫应答的体液免疫,γδT细胞和NKT细胞承担过渡性免疫应答的细胞免疫,主要识别和排除TI抗原.固有免疫应答的细胞包括吞噬细胞、树突状细胞、NK细胞等,体液免疫组包括补体、急性期蛋白、溶菌酶等,其主要作用是非特异性地清除或递呈抗原.适应性免疫应答的细胞由B2细胞和αβT细胞组成,B2细胞承担适应性体液免疫应答,αβT细胞承担适应性细胞免疫应答,主要识别和排除胸腺依赖性抗原(TD).免疫应答分为3种类型是对免疫系统进化的客观阐述,符合物种进化的基本规律,准确反映了免疫功能的发生和发展,对完善免疫学基础理论以及指导临床免疫学研究具有重要的意义.     

高血脂小鼠Th1/Th2细胞因子的检测及相关性分析

目的建立高血脂动物模型,探讨高血脂相关免疫损伤和炎症反应机制。方法将40只BALB/C小鼠随机分成高脂组和对照组,观察脂质代谢变化,同时采用流式细胞微球芯片捕获技术检测Th1/Th2细胞因子变化。结果高脂组血清中白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素5、肿瘤坏死因子α和干扰素γ水平分别为3.75±0.07、6.16±0.55、18.70±4.61、57.97±6.57及6.17±0.76ng/L。与对照组比较,高脂组总胆固醇、甘油三酯、白细胞介素5和肿瘤坏死因子α水平明显升高(P<0.01),而干扰素γ、白细胞介素2和白细胞介素4两组差异无统计学意义(P>0.05);白细胞介素5与肿瘤坏死因子α呈正相关(r=0.79,P<0.05)。结论免疫损伤、炎症反应机制在高血脂动脉硬化发病机制中具有重要作用,并和高血脂协同致病。     

玉竹提取物A对小鼠巨噬细胞白细胞介素-1和肿瘤坏死因子产生的影响

目的研究玉竹提取物A(extraction A of polygonatum odoratum,EA-PAOA)对小鼠巨噬细胞和细胞因子产生的影响,以探讨对免疫功能的作用。方法检测小鼠体外巨噬细胞产生的白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)。结果 10μg/mL以上浓度的EA-PAOA对小鼠巨噬细胞产生的IL-1有抑制作用,1000μg/mL浓度的EA-PAOA的抑制百分率(IP)达39.1%,对TNF-α抑制作用比对IL-1的抑制作用明显,10μg/mL浓度的EA-PAOA达28.6%,1000μg/mL浓度的EA-PAOA的CIP达78.6%。两者均呈量效依赖关系。结论 EA-PAOA对小鼠巨噬细胞产生的IL-1和TNF-α,均有抑制作用,可抑制小鼠的免疫功能。     

结核杆菌抗原对人γδT细胞体外增殖影响

目的观察结核杆菌抗原（Mtb-Ag）对人γδT细胞体外增殖的影响,以解决医学研究中γδT细胞来源不足问题。方法应用酸性改良罗氏培养基分离培养结核杆菌及丙酮酸钠液体培养基进行扩增,通过85℃水浴灭活,超声波细胞破碎制备Mtb-Ag。在体外以不同的剂量刺激人外周血单个核细胞（PBMC）,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测增殖程度,应用流式细胞仪检测γδT细胞增殖的百分率。结果在一定范围内随着刺激剂量的增加PBMC增殖亦增加。流式细胞仪分析增殖结果显示,7μg/ml刺激组γδT细胞的增殖率最高（约为49.08%）。但当刺激剂量增加至9μg/ml时,γδT细胞增殖比率开始降低（约为32.62%）,而αβT细胞增殖比率增加明显（约为36.76%）。结论Mtb-Ag在合适刺激剂量时,可对人γδT细胞发挥优势扩增;当剂量过大时则对αβT细胞发挥优势扩增。     

从急性肾盂肾炎患者尿中检出痰塔特姆菌

塔特姆氏菌属（Tatumella）隶属于肠杆菌科,是Hollis等1981年提议设立的新菌属,以前曾命名为＂EF-9群＂。属内只有痰塔特姆菌（Tatumella ptyseos）1个种,可能是罕见的致病菌。我院于2007年10月从1例急性肾盂肾炎患者尿液中检出该菌,报告如下。     

玉竹提取物A对小鼠单核细胞体外诱生血栓素B2分泌量的影响

目的观察小鼠单核细胞在体外经内毒素刺激分泌血栓素B2的情况,及不同浓度玉竹提取物A对其分泌量的影响。方法实验于2004-06/2004-08在锦州医学院免疫实验室进行。选择普通级健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A500m g/L组、玉竹提取物A1000m g/L组、玉竹提取物A1500m g/L组,玉竹提取物A2000m g/L组共6组,每组6只。36只小鼠摘眼球取血,分离外周血单核细胞,分置24孔培养板中,每孔0.5m L。每组设6个平行孔,大肠杆菌内毒素为终浓度。正常对照组每孔加完全16400.5m L;模型对照组同样每孔加完全16400.5m L;同时4个实验组的单核细胞内分别加入相应浓度的玉竹提取物A;另取两个24孔培养板,每孔只加单核细胞悬液1m L。上述分离之单核细胞培养3d后换液1次,除正常对照组外,将10m g/L的大肠杆菌内毒素10μL加入其余5组,共育2h;同时取只加单核细胞悬液的后两板,每组加大肠杆菌内毒素浓度分别为0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2h。然后收集每孔上清液,放免分析法测定上清液中血栓素B2含量。观察体外给予不同浓度大肠杆菌内毒素,对血栓素B2分泌量的影响;不同浓度玉竹提取物A对同一浓度大肠杆菌内毒素刺激的血栓素B2分泌量的影响。结果36只小鼠均进入结果分析。①大肠杆菌内毒素维持在0.01,0.1,1,10mg/L时,其刺激小鼠外周血单核细胞合成血栓素B2水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内毒素浓度增加,血栓素B2合成水平亦升高(800,950,1180,1500ng/L),大肠杆菌内毒素为10m g/L时,刺激血栓素B2合成速率达峰值;当内毒素刺激量增至100,400m g/L时,血栓素B2合成水平不再升高,而呈下降趋势(1100,900ng/L)。②当用10m g/L的大肠杆菌内毒素分别刺激除正常对照组外的其余5组的单核细胞时,模型对照组血栓素B2分泌量明显高于正常对照组[(1382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P<0.01],4个浓度(500,1000,2000,4000m g/L)玉竹提取物A组血栓素B2的量明显低于模型对照组[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,P<0.01],与正常对照组(823±78)ng/L无显著差异。结论内毒素体外可以刺激单核细胞分泌血栓素B2,且刺激量为10mg/L时,单核细胞合成血栓素B2最旺盛;不同浓度玉竹提取物A体外均可显著抑制血栓素B2的分泌,但随着药物浓度的增大,其抑制作用并未增强。     

玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：探讨玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤的保护作用，探讨其发挥此作用的可能的机制。 方法：①实验于2004-06／10在锦州医学院免疫实验室完成。选用健康雄性昆明小鼠50只。普通级。将50只健康雄性昆明小鼠随机分为5组：正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A 0．5g／kg组、玉竹提取物A 1g／kg组、玉竹提取物A2g/／kg组，每组10只。②玉竹提取物A是玉竹的干燥根茎经水醇法提取而得。（固正常对照组和模型对照组小鼠腹腔注射生理盐水，玉竹提取物A0.5，1，2g／kg组小鼠分别腹腔注射相应浓度的玉竹提取物A，每次每只0．5mL，3次／d，连续注射4d。最后一次注射后8h，除正常对照组注射生理盐水外，其余各组均尾静脉注射20mg／kg的刀豆蛋白A0．5mL，制备免疫性肝损伤模型。（4）注射刀豆蛋白A8h后摘眼球取血低温保存，取肝待行光镜检查，以观察肝脏组织病理学改变（常规苏木精-伊红染色），取脾待行淋巴细胞增殖实验（采用四甲基偶氮唑盐法）和流式细胞术以检测T淋巴细胞亚群。各组小鼠血清谷丙转氨酶活性检测按购自南京建成生物研究所的谷丙转氨酶试剂盒说明进行。⑤组间计量资料差异比较采用方差分析。 结果：昆明小鼠50只均进入结果分析。①肝脏组织病理学改变：模型对照组可见明显免疫性肝损伤病理改变。玉竹提取物A3个实验组小鼠肝损伤病理改变均不同程度的好于模型对照组。（2）玉竹提取物A对血清谷丙转氨酶活性的影响：模型对照组血清谷丙转氨酶活性明显高于正常对照组（t=13．8，P〈0．01）。玉竹提取物A3个实验组血清谷丙转氨酶活性低于模型对照组，尤以玉竹提取物A2g／kg组与模型对照组差异最明显（1=5．62，P〈0．01），且存在剂量依赖关系。（参玉竹提取物A对T淋巴细胞转化增值的影响：刀豆蛋白A刺激体外培养的各组脾淋巴细胞，模型对照组的刺激指数明显高于正常对照组（t=9．02，P〈0．01），玉竹提取物A3个实验组的刺激指数明显低于模型对照组（t=6．99-11．06,P〈0．01），且存在剂量依赖关系。④玉竹提取物A对脾组织T淋巴细胞亚群的影响：各组，CD4^＋T，CD8^＋T淋巴细胞的数量和比例差异不明显（P〉0．05）。 结论：①玉竹提取物A具有抑制肝细胞破坏及改善肝脏微循环的作用。②玉竹提取物A可以显著抑制T淋巴细胞的转化增殖，并呈剂量依赖关系，玉竹提取物A发挥肝保护作用的一个机制可能就是显著抑制T淋巴细胞的转化增殖，减少肝损伤细胞因子的释放，抑制活化增殖的T琳巴细胞对肝细胞的直接细胞毒作用。③在肝损伤的早期可能只是大量免疫细胞聚集于肝脏并且各种分泌及破坏功能增强，而非其数量明显增加。     

介绍一种快速简便的淋巴细胞转化实验方法

淋巴细胞转化实验是体外检测细胞免疫功能的主要方法之一,早已成为临床和科研常规检测手段,尤其对肿瘤、移植、反复感及其应用免疫抑制剂患者的疗效判定,转归和预后估计更具有意义。淋巴细胞转化实验常用方法有3HTdR掺入法,MTT比色法和G—W染色法。前二种方法受条件限制而且实验周期转长,G—W染色法虽然应用