脑活素及神经肽对体外培养的鼠大脑神经细胞的影响

运用体外培养的新生鼠大脑神经细胞来观察脑活素及神经肽对其的影响，并测量突起长度及胞径，与对照组进行统计学处理。结果表明，脑活素且及神经肽组本外培养的大脑神经神细胞均有促进作用，尤其在培养的前１周明显，且神经肽的作用优于脑活素的作用。通过实验室的研究间接论证了脑活素及神经肽对神经系统疾病的临床治疗价值。     

运动性中枢疲劳及乳酸对大鼠大脑皮质神经细胞MCT mRNA表达的影响

目的:探讨运动性中枢疲劳时大鼠大脑皮质MCT1、MCT2mRNA表达的变化以及乳酸对大鼠大脑皮质神经元MCT2mRNA表达的影响。方法:12只Wistar大鼠随机分为对照组和力竭训练1周组,每组6只。通过7天力竭训练建立中枢疲劳模型,观察中枢疲劳时大鼠大脑皮质MCT1、MCT2mR-NA表达变化;采用原代培养的大鼠大脑皮质神经元,观察不同浓度乳酸作用后大鼠大脑皮质神经元MCT2mRNA表达的变化。采用Trizol法提取大脑皮质和神经元总RNA;用SYBRAgreenI荧光定量RT-PCR测定MCT1及MCT2mRNA表达变化。结果:整体水平:力竭训练1周组MCT1mRNA表达无明显变化,而MCT2mRNA表达较对照组显著升高6·35±3·54倍(P<0·05)。细胞水平:乳酸作用后,神经元MCT2mRNA表达在pH=7·25时较对照组(pH=7·35组)升高3·08±2·38倍(P<0·05)。但随着乳酸浓度进一步升高,MCT2mRNA表达无明显增加。结果提示,中枢疲劳可能引发大脑皮质神经元MCT2mRNA表达升高,MCT2基因表达可能与乳酸在中枢疲劳中的作用有关。     

Isolation and differentiation of embryonic stem cells from BALB/c mouse

Objective To invest the efficient method which can culture and induce embryonic stem cells to neurocyte in vitro. Methods Isolate the blastula of 3.5 d from BALB/c species mouse. Culture the cells from inner cell mass (inner cell mass, ICM) which were isolated by mechanical method on the mouse embryonic fibroblaste cell (MEF) feeder layer or 0.1% gelatin coated dishes. The stem cells were identified by characterized morphology, alkaline phosphatase stain, differential potency in vivo and immunochemistry stain. The isolated cells were differentiated by serial induction method that mimicking the intrinsic developmental process of the neural system. Results The isolated cells were positive for alkaline phosphatatse and SSEA-1 (stage specific embryonic antigen 1). Moreover they were identified pluripotent by differentiation in vivo. Therefore the isolated cells presented the characters of ESCs. Then the isolated cells were able to differentiate into neurocytes in vitro. Conclusion Mouse embryonic stem cells isolation, culture and differentiation system has been established.     

铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的研究

目的研究铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的作用。方法体外培养0~3天大鼠单纯神经元、神经胶质细胞及混合培养神经细胞,并用不同浓度AlCl3.6H2O处理,分为对照组、低、中、高剂量组(分别为0、0.5、1.0和2.0mmol/L),做光镜观察、荧光染色及流式细胞检测。结果①在光镜下和荧光染色法观察,可以见到神经元有凋亡细胞的典型形态学改变,但在神经胶质细胞及混合培养细胞中没有观察到凋亡的典型形态学改变。②神经元的流式检测结果显示,铝可以诱导神经元凋亡,且其早期、晚期及总凋亡率与铝的作用剂量有关;而神经胶质细胞的流式检测结果在染毒剂量组中未发现凋亡率的显著升高,其凋亡率在各组间差异均无显著性;混合培养神经细胞的流式检测结果在染毒剂量组中亦有凋亡率的显著升高,但其凋亡率升高的程度远低于神经元。结论低浓度铝可诱导神经元细胞凋亡。     

干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展

干细胞的无限自我更新和增殖分化的特性,为治疗神经系统疾病带来了希望,其中间充质干细胞(MSCs)具有分化成间质起源的任意组织包括神经组织的潜能,使其作为最佳种子细胞在组织工程中令人看好.但不少学者对间充质干细胞的这种可塑性持相反意见.神经干细胞可分化为不同类型的神经细胞,大多神经干细胞移植实验显示胶质细胞占较大比例.胚胎干细胞可分化为包括神经谱系在内的各种细胞谱系,目前有3种分化为神经细胞的方法,包括视黄酸诱导法、谱系选择法及基质细胞诱导法.少突胶质前体细胞是一种重要的神经前体细胞,表达趋化因子受体CXCR4,并受到CXCLl2的调节.血小板衍生生长因子、纤毛状神经营养因子与白血病抑制因子都可促进其分化.     

铝对大鼠海马神经细胞线粒体酶的影响

目的探讨线粒体酶在铝致大鼠凋亡神经细胞中的改变。方法健康雄性SD大鼠40只，按体重随机分为4组：生理盐水、AL^3＋ 2．5、5、10mg／kg组。腹腔注射染毒60d后处死，用TUNEL法检测细胞凋亡，电镜观察线粒体结构的改变，用试剂盒测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD），琥珀酸脱氢酶（SDH），三磷酸腺苷（ATP）酶（总ATP、Na^＋-K^＋ATP，Ca^2＋ ATP和Mg^2＋ ATP酶）活力。结果 随染铝剂量的增高，凋亡指数（AI）逐渐升高（P〈0．05），Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD均降低（P〈0．05）；海马神经细胞SDH均数降低，但差异无显著性（P〉0．05）。海马神经细胞凋亡指数与Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD呈负相关（r=-0．439，-0．501，-0．530，-0．815，P〈0．05），与SDH没有相关性（r=0．287，P〉0．05）。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡，并引起线粒体结构和线粒体酶活力的改变。     

中药对间质干细胞分化为神经细胞的影响

中药成分促进间质干细胞分化为神经细胞的研究是目前中医药和生物医学领域的热点之一。中药对间质干细胞的作用可以概括为促进间质干细胞的生长、增殖、分化,改变其分泌状态及其保护分化后的神经细胞等多个环节。从细胞培养、细胞分化、作用机制以及治疗作用等方面,分类综述了三七、黄芪、麝香、绞股蓝、川芎、丹参对间质干细胞分化为神经细胞的影响,并简述了问题和展望。     

碱性成纤维生长因子对体外培养鼠胚胎中脑神经细胞缺氧反应的影响

目的:观察不同浓度碱性成纤维生长因子(bFGF)对胚胎中脑神经细胞缺氧的保护作用.方法:14 d的大鼠胚胎中脑取材,分离、消化后作原代培养,分为对照组,单独缺氧组,不同浓度的(1.0,5.0,10.0,50.0,100.0 ng/mL)bFGF+缺氧组;采用羟胺比色法对超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定,采用硫代巴比妥酸比色法进行丙二醛(MDA)测定;采用考马斯亮蓝法进行相对蛋白质含量测定,同时进行细胞形态学观察.结果:单独缺氧组中脑神经细胞MDA含量升高,SOD活性、相埘蛋白质含量及细胞集落存活率下降,与对照组比较(P<0.01),并出现细胞形态学损伤;5.0～50.0 ng/mL bFGF+缺氧组中脑神经细胞MDA含量下降,SOD活性、相对蛋白质含量、细胞集落存活率升高,与单独缺氧组比较(P<0.01),细胞无明显形态学损伤;当bFGF剂量为1.0 ng/mL和100 ng/mL时神经细胞MDA含量、SOD活性、相对蛋白质含量及细胞集落存活率与单独缺氧组比较无明显改变(P>0.05),细胞有明显的形态学损伤.结论:适当的bFGF剂量能对胚胎中脑神经细胞缺氧损伤具有明显保护作用.     

柴胡注射液体外抑制PGE2释放的生物活性测定法

目的: 建立rrIL-1β体外干扰下丘脑神经细胞释放PGE₂离体模型,考察柴胡注射作用下该模型中PGE₂含量与药物作用浓度的相关性。 方法: 体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β(40 μg·L^-1)刺激并于不同时间点收集细胞液,ELISA法检测各时间点收集的细胞液中PGE₂含量;体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β刺激后,各组加入不同浓度柴胡注射液,ELISA法检测细胞上清液中PGE₂含量变化,分析加样浓度与对PGE₂抑制率的线性关系。 结果: rrIL-1β能刺激体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,并在10 h时达到峰值;柴胡注射液能够显著干扰离体模型中PGE₂的释放(P<0.01,P<0.05),且干扰作用与柴胡注射液作用浓度呈一定的线性相关(r=0.911,P<0.01)。 结论: rrIL-1β能够干扰体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,且对PGE₂的抑制生成作用与药物浓度相关性较好。     

双胸蚓溶栓酶对体外培养的WISTAR胎鼠大脑神经元突起生长的影响

目的：探讨双胸蚓溶体酶对神经元突起的影响及其作用机制。方法：应用神经元细胞体外培养技术观察了１～１０d内在不同剂量双胸蚓溶栓酶蚓溶栓酶作用下的Ｗistar胎鼠大脑神经元突起的生长发育过和。结果：不同剂量双蚓溶栓酶对神经元突起的数量和长度以及轴索的形态与增长均有影响。结论：双胸蚓溶栓酶对体外培养的胎鼠大脑神经元突起的生长发育有促进作用。