变性高效液相色谱分析肺炎支原体基因类型研究

目的 运用变性高效液相色谱（denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC）技术检测肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae,MP）基因型,了解儿童MP流行状况.方法 对我院300例患儿鼻咽吸出物进行表型确证试验,采用PCR对标准菌株和MP表型阳性的临床菌株进行PCR扩增,扩增产物经DHPLC分析,通过与标准菌株色谱峰比对进行临床菌株基因分型.结果 300例患儿咽拭子经过24h培养后呈阳性110例.用特异引物扩增MP-129、MP-FH标准株和标本,分别得到2 280 bp和2580bp基因片段.110株临床菌株经DHPLC分析检测出107株是P1-Ⅰ型,均是1b亚型,3株是P1-Ⅱ型,均是2a亚型.结论 运用DHPLC技术检测出本院儿童发生MP感染以P1-Ⅰ、1b亚型为主.     

Vitamin D Receptor Gene Polymorphisms and the Risk of Colorectal Cancer in a Chinese Population

Objective The purpose was to investigate single nucleotide polymorphism of the vitamin D recepter gene and its possible relationship with colorectal cancer (CRC) in a Chinese population. Methods The vitamin D receptor (VDR) genotypes were determined by polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) using endonuclease BsmI and FokI, and direct sequencing in 400 Chinese people, comprised of 200 CRC patients and 200 controls from the same area in China. Results The distribution of alleles (F/f) and genotypes (FF/Ff/ff) of the FokI had no significant difference between CRC patients and normal controls (P > 0.05), while that of the B allele and the BB genotype of the BsmI in CRC patients was significantly lower compared with the control group (0.1625 versus 0.740, P < 0.05, OR = 0.068, 95% CI: 0.048–0.096 and 0.060 versus 0.590, P < 0.05, OR = 0.015, 95% CI: 0.007–0.032). Conclusion The BB genotype of the VDR BsmI variant was significantly associated with a decreased risk of CRC in a Chinese population, while the VDR FokI polymorphism was not significantly associated with it.     

云南省几个民族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变型分析

目的：分析云南籍汉族及少数民族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症患者的Ｇ６ＰＤ基因突变。方法：应用自然引物或“错配引物”介导的多聚酶链反应限制性酶切分析方法，分析２９例云南籍几个民族Ｇ６ＰＤ缺乏症患者Ｇ６ＰＤ基因突变型。结果：发现１３８８突变１９例，１３７６突变１例，未定型９例。２９例标本中有７例为少数民族，分别为彝族３例（１３８８突变）、白族２例（１３８８突变）、傣族１例（１３８８突变）、纳西族１例（１３８８突变）。除傣族外，在其余三个少数民族中检出Ｇ６ＰＤ基因１３８８突变在国内尚属首次。结论：这种突变的发生早于少数民族形成之前，并可推测云南省Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中Ｇ６ＰＤ基因突变型分布比例，有助于了解分子进化进程。     

生长分化因子15与大肠癌关系的研究进展

 生长分化因子-15（GDF-15）是转化生长因子超家族（TGF-βs）的一个远支成员，它在多种损伤及肿瘤等病理、生理过程中发挥促凋亡、抗肿瘤、神经营养以及心肌保护等作用。文章主要综述GDF-15基因、GDF-15及其抗体的结构与功能特点，大肠癌（CRC）患者血清中GDF-15含量、基因型与发病的关系，多种抗肿瘤物质对GDF-15在大肠癌组织及细胞中表达的影响     

轻中度高血压患者中MTHFR C677T与血清叶酸水平变化的相关性研究

目的探讨轻中度高血压患者亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T多态性位点与血清叶酸水平变化间的关系。方法从哈尔滨、沈阳、北京、西安、上海、南京6城市收集的480位28～75岁轻中度原发性高血压患者，按1：1：1的原则随机分为3组；对照组、0．4mg叶酸组、0．8mg叶酸组每日分别服用10mg马来酸依那普利、10mg马来酸依那普利＋0．4mg叶酸、10mg马来酸依那普利＋0．8mg叶酸，连续服用8周。收集治疗前后的血清叶酸水平、MTHFR C677T位点的基因型及其他相关指标。本研究对主要资料完整者371人（男156人，女215人）的MTHFR C677T位点与血清叶酸水平变化间的关系进行统计分析。结果①对照组中C677T基因型对叶酸变化水平无明显作用，各基因型间的差异均无统计学意义。②试验组中血清叶酸变化水平在C677T CC、CT和TT基因型间的变化趋势基本一致，TT型增加水平最少，CC型增加最多。以677CC基因型人群的叶酸变化水平为参照，合并叶酸组中TT基因型在调整前（β=3．99，P=0．034）后（β=5．68，P〈0．001）差异均有统计学意义；0．4mg叶酸组和0．8mg叶酸组TT基因型在调整前（β分别为5．33和2．64，P分别为0．061和0．280）差异无统计学意义，调整后（β分别为5．60和4．68，P分别为0．031和0．050）差异有统计学意义。各组中CT基因型调整前后的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论轻中度高血压患者中MTHFR C677T的基因型对叶酸的疗效具有一定的作用。     

人乳头状瘤病毒（HPV）阳性308例分析

目的探讨云南省HPV感染情况及其型别分布.方法用23种人乳头状瘤病毒分型基因芯片检测系统对308例HPV阳性结果进行分析.结果 2124例参检者的HPV感染率为14.5%,308阳性例数中,检出21个亚型,单型感染为84.1%,混合感染为15.9%,高危型占75.3%,高危型前三位依次为HPV16、33、58.结论 HPV感染者中以高危型为主,高危型前三位依次为HPV16、33、58基因型.     

PCR-RFLP和PCR指纹法在新生隐球菌基因分型中的应用与比较

目的 探讨针对结构基因g6341的PCR－RFLP方法在新生隐球菌基因分型中的应用价值, 并与PCR指纹分型法进行比较。方法 以野生型噬菌体M13中针对小卫星DNA的核心序列为单引物，对受试的新生隐球菌进行PCR指纹分型。选择结构基因g6341进行PCR－RFLP分析，在序列保守区设计通用引物，筛选合适的限制性内切酶进行RFLP分析，并与PCR指纹法进行比较。g6341基因扩增片段测序，进行系统发育分析，研究各主要基因型间的亲缘关系。结果 多位点基因序列分析表明，结构基因g6341可作为RFLP分析的合适靶点。对76株新生隐球菌的基因分型结果显示，针对g6341的PCR-RFLP方法与PCR指纹法结果一致。分析g6341基因部分序列得出，8种主要基因型菌株相互间的同源性在84％ ～ 97％之间，同一主要基因型菌株的同源性在99％ ～ 100％之间。分子发育树中，VNⅠ－VNⅣ基因型、VGⅠ－VGⅣ基因型分别聚在一类。结论 针对结构基因g6341的PCR-RFLP方法可作为新生隐球菌分子分型的有效工具，对g6341基因的序列分析可揭示不同菌株间的遗传进化关系。     

2型糖尿病大血管病变患者脂代谢紊乱与ApoE基因多态性及中医证候的研究

目的:研究2型糖尿病大血管病变患者脂质谱与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及中医证候的相关性。方法:60例T2DM大血管病变患者按中医证候分为阴虚燥热、气阴两虚、阴阳两虚3组,每组20例,另设正常对照组20例,用PCR-RFLP对ApoE进行分析,并对患者脂质谱进行分析。结果:糖尿病各组患者血脂较正常对照组均显著改变(P<0.01),其中气阴两虚组患者的TC、LDL-C较阴虚燥热、阴阳两虚组有极显著升高(P<0.05,P<0.01)。等位基因E2组的TG较E3、E4组有极显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:2型糖尿病大血管病变患者的血脂随着病情的加重和病程的延长存在不同程度的异常,各种中医证候之间脂代谢的差异与ApoE基因的多态性有一定关系。     

蓝氏贾第鞭毛虫承德株分子生物学研究

目的：探讨蓝氏贾第鞭毛虫大、小型包囊存在的原因。方法：用分子生物学技术对３株贾第虫（ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４）进行ｔｉｍ基因扩增和序列测定。结果：经与ＧｅｎＢａｎｋ登记虫株比较和用ＤＮＡｓｔａｒ软件处理的结果表明,此３株贾第虫的基因型属２型（ＪＨ型）。结论：大、小型包裹在形态学上经过统计学处理显示有显著差异,但与基因型无关。     

微量聚合酶链反应对人类白细胞抗原的基因分型

目的 探讨应用于移植的人类白细胞抗原（ＨＬＡ）二类基因（ＤＲＢ／ＤＱＢ）快速分型新技术。方法 采用快速ＤＮＡ抽提技术,建立了ＨＬＡ＿ＤＲＢ／ＤＱＢ微量序列特异性引物聚合酶链反应基因分型方法,对１４２份供受者ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＲＢ／ＤＱＢ基因分型,并与单克隆抗体一叔法ＨＬＡ血清学分型技术进行对比研究。结果 应用微量ＰＣＲ－ＳＳＰ方法共检出１３种ＤＲＢ１等位基因和 ＤＱＢ１等位基因,与血清学分型结果