高效液相色谱-串联质谱法测定雷公藤制剂中5种有效成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法测定雷公藤制剂中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱、雷公藤次碱和雷公藤红素的含量。方法:采用电喷雾正电离模式和多反应监测模式。雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱和雷公藤次碱含量测定,以含5 mmol·L^-1碳酸氢铵的水溶液和纯甲醇作为流动相,采用梯度洗脱方式在ACE UltraCore SuperPhenylHexyl(2.1 mm×50.0 mm,5 μm)色谱柱上进行分离。雷公藤红素含量测定,以含0.5%甲酸的水溶液和含0.1%甲酸的乙腈作为流动相,采用等度洗脱在ACE Excel C₁₈-AR(2.1 mm×50.0 mm,5 μm)色谱柱上进行分离。结果:雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱、雷公藤次碱和雷公藤红素分别在2.4~1 200,2.0~1 000,80~40 000,80~40 000和10~5 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为 94.56%,102.36%,93.27%,95.67%和99.82%,RSD均低于5.13%。结论:本方法运行时间短,灵敏度高,精密度和重复性好,适用于雷公藤制剂中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱、雷公藤次碱和雷公藤红素5种活性成分定量检测,可为雷公藤制剂多指标质量控制提供实验依据。     

基于LC-MS的甘草炮制雷公藤降低肝毒性的代谢组学研究

目的 观察甘草炮制雷公藤Tripterygium wilfordii后对小鼠血清中代谢产物的影响，初步探讨其降低肝毒性的可能代谢通路。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照（Con）组、雷公藤（Raw）组、甘草炮制雷公藤（Pro）组，观察小鼠肝组织病理变化，检测小鼠肝功能生化指标、炎症因子水平；利用液质联用（LC-MS）技术结合代谢组学方法，对各组间的代谢差异进行表征。结果 与Raw组相比，Pro组小鼠肝组织损伤显著改善，肝功能生化指标、炎症因子水平显著降低，表明甘草炮制雷公藤后可以降低小鼠肝毒性；共筛选出脂肪酸、磷脂酸、甘油酯、磷脂酰胆碱、胆酸等12个潜在生物标志物，主要涉及脂肪酸生物合成、甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢等9个代谢通路。结论 甘草炮制雷公藤可有效降低小鼠的肝毒性，其机制可能与调节脂肪酸代谢等通路相关，为其临床合理应用提供参考依据。     

新冠肺炎出院患者核酸“复阳”原因分析及中医跟踪治疗探讨

因新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的冠状病毒性肺炎(C0VID-19)疫情已在全球出现大流行,且其蔓延程度超过预期,已被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生安全事件。在我国的抗疫过程中,中医药全程深度介入[1],目前疫情控制逐渐向好。但在国内疫情防控工作取得有效进展的同时,虽然治愈病例不断增加,各地却陆续出现出院患者核酸检测复阳的相关报道,而确诊患者出院后核酸检测复阳也成为了现阶段影响疫情发展方向的不确定因素之一。因此,对于出院的新冠肺炎患者进行中医跟踪治疗,是有效控制疫情复燃、防止二次传播的重点工作之一。     

雷公藤多苷片、黄葵胶囊和肾素-血管紧张素系统阻断剂治疗IgA肾病的网状Meta分析

目的采用网状Meta分析方法评价雷公藤多苷片、黄葵胶囊、肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)阻断剂单用及联用治疗伴有中度蛋白尿IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者的临床疗效及安全性。方法检索Cochrane Library、Pubmed、Web of Science、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方、维普数据库,检索时间为建库至2019年8月,纳入雷公藤多苷片、黄葵胶囊、RAS阻断剂对比或联用的随机对照临床研究。根据《Cochrane系统评价员手册》对纳入研究的质量进行评价,采用RevMan 5.3软件绘制风险评估图并进行Meta分析;采用Gemtc 0.14.3包通过马尔科夫链-蒙特卡洛方法进行分析,采用Stata 15软件进行SCURA计算等级排序并绘制漏斗图,采用R软件绘制轨迹图判断模型收敛性。结果共纳入31篇随机对照临床研究,共包括3 192例患者,网状Meta分析显示:(1)与单用RAS阻断剂相比,黄葵胶囊联合RAS阻断剂、雷公藤多苷片、雷公藤多苷片联合RAS阻断剂均对降低患者尿蛋白水平更有优势,其SMD分别为-0.33(-0.54,-0.13)、-0.41(-0.72,-0.12)、-0.48(-0.74,-0.23);(2)与单用RAS阻断剂相比,雷公藤多苷片联合RAS阻断剂对降低患者血肌酐水平更有优势,其SMD为-6.32(-11.06,-1.69);(3)黄葵胶囊联合RAS阻断剂在不良事件发生风险上低于雷公藤多苷片联合RAS阻断剂组,其SMD为0.19(0.04,0.73)。结论黄葵胶囊联合RAS阻断剂可有效降低伴有中度蛋白尿IgAN患者尿蛋白水平,且不良事件发生风险最小;雷公藤多苷片联合RAS阻断剂可有效降低患者血肌酐水平,保护患者肾功能,但其不良事件发生风险较高。     

雷公藤多甙通过AMPK途径减轻糖尿病大鼠肾脏组织中炎症及氧化应激的实验研究

目的 观察雷公藤多甙通过AMP激活的蛋白质激酶(AMPK)途径减轻糖尿病大鼠肾脏组织中炎症及氧化应激的作用。方法 健康雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组(DM组)、雷公藤多甙组(DT组)、雷公藤多甙+AMPK抑制剂组(DT+CC组)。对照组给予常规饲料喂养,后三组给予高糖高脂饲料喂养后腹腔注射链脲佐菌素以建立糖尿病模型。DT组给予50 mg/(kg·d)的雷公藤多甙灌胃,DT+CC组给予50 mg/(kg·d)的雷公藤多甙及20 nmol的AMPK抑制剂Compound C灌胃,对照组及DM组给予相同剂量的生理盐水灌胃,连续12周。12周后检测糖代谢指标、肾脏HE染色及肾脏中炎症指标、氧化应激指标、AMPK通路分子。结果 DM组大鼠出现了明显的肾脏病变,肾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)、丙二醛(MDA)的含量及核因子κB(NF-κB)的表达量明高于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量及p-AMPK、核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达量明显低于对照组; DT组大鼠的肾脏病变明显减轻,肾脏组织中TNF-α、IL-1、IL-6、IFN-γ、MDA的含量及NF-κB的表达量明显低于DM组,SOD、GPx的含量及p-AMPK、Nrf2的表达量明显高于DM组; DT+CC组大鼠的肾脏病变明显加重,肾脏组织中TNF-α、IL-1、IL-6、IFN-γ、MDA的含量及NF-κB的表达量明显高于DT组,SOD、GPx的含量及p-AMPK、Nrf2的表达量明显低于DT组。结论 雷公藤多甙能够改善糖尿病大鼠的肾脏病理改变并抑制肾脏组织中的炎症及氧化应激反应,激活AMPK途径是雷公藤多甙发挥上述保护作用的分子机制。     

雷公藤甲素甘油醇质体与凝胶贴膏经皮给药改善大鼠佐剂型关节炎症状的比较研究

  目的：采用大鼠佐剂型关节炎模型,比较载雷公藤甲素甘油醇质体新型经皮给药系统与雷公藤甲素凝胶贴膏剂对大鼠佐剂型关节炎的作用。  方法：采用注入法制备甘油醇质体,测定其粒径分布与包封率；采用聚丙烯酸钠交联法制备雷公藤甲素凝胶贴膏剂；建立大鼠佐剂型关节炎模型,比较雷公藤甲素甘油醇质体与凝胶贴膏对佐剂型关节炎改善作用的优劣。  结果：所制备的雷公藤甲素甘油醇质体平均粒径为(153.10±2.69)nm,电动电位为(－45.73±0.60)mV,包封率为(75.97±0.94)%。透射电镜下观察磷脂囊泡近圆形,表面光滑,分布均匀。局部用药后,与阳性药组(雷公藤多苷口服给药)相比,醇质体组对大鼠的体质量影响较小；醇质体组大鼠的关节炎指数、足跖容积,以及血浆中TNF-α、IL-6与IL-1β的水平均显著低于模型组(P<0.01)；与凝胶贴膏组相比,醇质体组经皮给药对TNF-α、IL-6表达的抑制作用更强(P<0.05)。  结论：采用甘油醇质体作为经皮给药载体,可有效改善药物的经皮递送,从而增强雷公藤甲素改善大鼠佐剂型关节炎症状的作用。     

雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IgA肾病的疗效观察

目的观察雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IgA肾病(IGAN)的临床疗效。方法将60例IGAN患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组采用雷火灸配合口服雷公藤多苷片,对照组采用单纯口服雷公藤多苷片治疗。观察两组治疗前后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量、血肌酐、肾小球滤过率及血清转化生长因子-b1(TGF-β1)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)水平的变化情况。结果治疗组总有效率为93.3%,对照组为70.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。两组治疗后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量及血清TGF-β1、MIF水平与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后血肌酐及肾小球滤过率与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。对照组治疗后血肌酐与同组治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量、血肌酐、肾小球滤过率及血清TGF-β1、MIF水平与对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IGAN疗效确切,可明显减少尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量,降低血肌酐水平,改善肾小球滤过率,这可能与其下调患者血清TGF-β1、MIF水平有关。     

定坤丹对雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下小鼠性激素和卵泡计数的影响

目的:建立雷公藤多苷诱导卵巢储备功能低下(DOR)小鼠模型,探讨定坤丹对DOR的治疗作用,为其临床应用提供科学依据。方法:将60只动情周期规律的雌性小鼠随机分为空白组、模型组、定坤丹低、中、高剂量组和戊酸雌二醇组,每组10只。除空白组外,其余各组予40 mg·kg~(-1)雷公藤多苷混悬液灌胃;同时定坤丹低、中、高剂量组分别予1. 64,3. 28,6. 56 g·kg~(-1)定坤丹混悬液灌胃,戊酸雌二醇组予0. 15 mg·kg~(-1)戊酸雌二醇混悬液灌胃,1次/d,连续30 d。观察小鼠的一般状况、体质量、性腺指数和动情周期变化,采用放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)和雌激素(E_2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态和卵泡计数。结果:与空白组比较,模型组小鼠动情周期处于紊乱状态,子宫和卵巢指数明显下降(P0. 05),血清FSH水平明显上升(P0. 05),LH呈上升趋势,E_2呈下降趋势,各级生长卵泡和黄体数减少、闭锁卵泡明显增加(P0. 05)。与模型组比较,定坤丹组半数小鼠恢复规律动情周期,戊酸雌二醇组小鼠动情周期停滞在动情期;定坤丹中、高剂量组和戊酸雌二醇组小鼠子宫和卵巢指数增加,血清FSH值明显下降(P0. 05),LH呈下降趋势;定坤丹高剂量组和戊酸雌二醇组血清E_2值明显上升(P0. 05);定坤丹能增加各级生长卵泡和黄体数、减少闭锁卵泡数,其中以中剂量效果更佳(P0. 05),戊酸雌二醇组能明显增加原始卵泡、窦状卵泡和黄体数(P0. 05),但不能减少闭锁卵泡数。结论:定坤丹能够通过改善血清性激素,促进卵泡发育、减少卵泡闭锁从而对DOR起到治疗作用。