缓激肽在血管紧张素(1～7)保护血管内皮细胞中的作用

目的 观察缓激肽(BK)在血管紧张素(1～7)[Ang(1～7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤、凋亡中的影响及可能作用机制.方法 体外培养HUVECs,随机分为6组:对照组,AngⅡ组,Ang(1～7)组,AngⅡ Ang(1～7)组,HOE-140组和AngⅡ Ang(1～7) HOE-140组.采用分光光度计测定培养的HUVECs乳酸脱氢酶(LDH)漏出,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,硝酸还原酶法和放射免疫分析技术分别测定HUVECs上清液中一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的含量,免疫组化法结合图像分析测定细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 (1)与对照组比较,AngⅡ(0.1 μmol/L)孵育细胞24 h后显著增加HUVECs的LDH漏出[(231.5±74.4 vs 76.6±19.4)U/L,P＜0.01]、ET-1分泌[(97.6±15.7 vs 48.8±9.3)pg/mL,P＜0.01]、ICAM-1表达[0.070±0.001 vs 0.041±0.003,P＜0.01]和HUVECs凋亡率[24.8%±0.6%vs 1.4%±0.6%,P＜0.01];Ang(1～7)(1 μmol/L)明显抑制了AngⅡ的上述作用,同时还促进HUVECsNO的释放;(2)缓激肽B2受体拮抗剂HOE-140(1 μmol/L)明显减弱Ang(1～7)对抗AngⅡ的作用(P＜0.01);(3)单用Ang(1～7)、HOE-140对HUVECs无明显影响.结论 Ang(1～7)能有效抑制AngⅡ引起的HUVECs的损伤和凋亡,其作用至少部分是通过BK B2受体介导的.     

三氯乙烯致敏小鼠肾脏免疫损伤中缓激肽及其受体B1R和B2R的表达水平

目的 研究三氯乙烯(TCE)致敏小鼠肾脏免疫损伤过程中缓激肽及其受体B1R和B2R的表达水平,探讨职业性三氯乙烯药疹样皮炎(ODMLT)的发病机制.方法 将6～8周雌性BALB/c小鼠随机分成空白对照组(5只)、溶剂对照组(5只)、TCE处理组(60只)和PKSI-527+TCE处理组(60只),于动物处理的第1、4、7、]0天进行致敏,第17、19天进行激发,且PKSI-527+TCE处理组在每次激发前24 h进行腹腔内注射抑制剂PKSI-527 (50 mg/kg),末次激发后24、48、72 h和7d处死动物,记录体重和肾脏重量,无菌取血液及肾脏组织,用ELISA法检测血浆BK水平并对肾脏做病理观察,用免疫荧光法检测肾脏组织B1R和B2R表达水平.结果 TCE处理组中的致敏小鼠可见明显的肾脏细胞间质内的炎细胞浸润,肾小管上皮细胞空泡样变性.PKSI-527+TCE处理组中的致敏小鼠的肾脏病理与同时点的TCE致敏组比较,损伤较之明显减轻.24、48和72 h TCE处理组的致敏组小鼠血浆BK表达明显高于溶剂对照组及相应的未致敏组,且72 h明显高于PKSI-527+TCE致敏组的相应时点,差异有统计学意义(P＜0.05).24、48、72 h和7dTCE处理组的致敏小鼠B1R和B2R在肾脏中的表达水平明显高于溶剂对照组以及相应时点的未致敏组.PKSI-527+TCE致敏组的4个时点的肾脏中B1R和B2R的表达水平都较TCE致敏组的相应时点的表达降低.结论 KKS活化可能参与TCE致敏小鼠的肾脏免疫损伤过程,且BK及其受体B1R和B2R表达改变在此过程中可能发挥重要作用.     

缓激肽预适应人内皮祖细胞移植治疗裸鼠急性心肌梗死

目的:研究内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)经缓激肽(bradykinin,BK)预适应后移植对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的治疗作用?方法:细胞分为未经BK预适应人EPCs组(EPCs组)?BK预适应EPCs组(BK PC组)?BK预适应EPCs + 艾替班特(HOE140)组(BK PC/HOE组),双染色法四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组增殖情况,予缺氧诱导后Annexin V-FITC/PI双染色法及Hoechst33342染色法检测各组凋亡情况,同时收集上清液予ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达?体内实验建立裸鼠急性心肌梗死模型,将羰花青荧光染料DiD标记的人EPCs通过心肌局部注射进行细胞移植到实验组,安慰剂组注入等量生理盐水?分为假手术组?MI + 生理盐水组(安慰剂组)?MI + 单纯干细胞治疗组(EPCs组)?MI + BK预适应EPCs治疗组(BK PC组)及MI + BK预适应EPCs + HOE140治疗组(BK PC/HOE组)?细胞移植后10 d行超声心动图检测心功能?移植后10 d处死动物,取心脏标本行相关检查?结果:①与EPCs组相比,BK预适应可促进人EPCs增殖;缺氧诱导凋亡后,BK PC组凋亡率低于EPCs组(P < 0.01),且均可被HOE140阻断(P < 0.01)?同时BK PC组上清液中VEGF的分泌高于EPCs组(P < 0.01),同样可被HOE140所阻断;② 细胞移植10 d后BK PC组左心射血分数(LVEF)明显高于安慰剂组(P < 0.01)及EPCs组(P < 0.01),且可被HOE140阻断(P < 0.01)?与安慰剂组及EPCs组相比,BK PC组梗死周边区移植细胞存活明显增多,而细胞凋亡显著减少;同样可被HOE140所阻断?结论:BK预适应人EPCs后可显著改善裸小鼠AMI后的心功能,其疗效明显优于单纯人EPCs移植治疗?其治疗效应是通过促进移植细胞存活及抗移植细胞及宿主心肌细胞凋亡等而实现的?     

丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠血清B2R及Angptl2的影响

目的:观察丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病模型大鼠缓激肽受体2(B2R)和血管生成样蛋白2(Angptl2)的影响。方法:取雄性SD大鼠59只,随机分为空白组、模型组、吡咯列酮组、DJC低剂量组、DJC高剂量组,正常组喂食普通饲料,其余各组均一次性腹腔注射小剂量STZ(35mg/kg)并喂食高糖高脂饲料,常规测定各组大鼠治疗前后的空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(Hb A1c),抽取动脉血检测血清B2R和Angptl2水平。结果:与正常组比较,模型组的B2R和Angptl2水平明显升高(P0.01);与模型组比较,吡咯列酮组、DJC低剂量组、DJC高剂量组的B2R和Angptl2水平显著下降(P0.01)。Pearson相关分析显示,B2R和Angptl2与Hb A1c水平呈正相关。结果提示:造模后,模型大鼠FBG、Hb A1c明显升高,治疗后DJC高、DJC低剂量组、吡格列酮组的FBG、Hb A1c显著下降,与模型组比较P0.01。结论:DJC能够显著降低B2R和Angptl2的高表达,降低FBG及Hb A1c,对糖尿病模型大鼠的炎症因子有显著的改善作用。     

缓激肽在大鼠血栓闭塞性脉管炎模型中的表达

目的：观察大鼠血栓闭塞性脉管炎（TAO）模型中缓激肽的表达水平,探讨其在TAO发病过程中的意义。方法：Wister雄性大鼠股动脉注射月桂酸法制作TAO模型,随机分为对照组及1,3,7,14,21,28 d 7个组别,每组均设术前对照,采用酶联免疫吸附法（ELISA）分别测定各组大鼠血清中缓激肽水平。结果：注射月桂酸钠后大鼠肢体出现不同程度的缺血坏死。病理切片示大量新生血管与炎性细胞浸润,与对照组相比,随着缺血时间的延长,模型鼠血清缓激肽水平呈升高趋势,至第14天达到最高峰,之后开始下降,但仍高于术前水平（P〈0.05）。结论：缓激肽水平在TAO模型的血清中呈先高后低趋势,其可能在TAO侧支循环建立代偿中起到了一定作用。     

FDA批准新药Firazyr(艾替班特注射剂)

<正>2011年8月25日,Shire医药公司宣布,美国FDA批准新药Firazyr(艾替班特注射剂)上市,用于治疗18岁以上患者遗传性血管水肿的急性发作(HAE)。     

缓激肽β2受体拮抗剂在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨缓激肽β2受体拮抗剂（HOE-140）对大鼠移植肺功能的影响以及作用.方法 将纯系SD大鼠随机分为3组,即实验组1、实验组2、对照组.对照组的供肺用低钾右旋糖苷液（LPD液）灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,于移植后1d测定对照组的气道峰压（PAP）、静脉血氧分压（PO2）、移植肺湿干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性.实验组1以及实验组2（加HOE-140干预）的供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂（AB192）的LPD液灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,分别于移植后1d测定受者的各项肺功能指标,并取相同受体肺部组织做病理学检查. 结果 与对照组比较,各实验组的PAP值降低（P＜0.05）,PO2值升高（P＜0.05）,W/D值降低（P＜0.05）,MPO活性降低（P＜0.05）,差异有统计学意义,病理学结果显示实验组2（HOE-140组）均优于对照组及实验组1.结论 缓激肽β2 受体拮抗剂HOE-140能有效降低肺移植肺缺血再灌注损伤,从而改善移植肺功能.     

缓激肽B1（BDKRB1）与宫颈癌的发生与发展

目的通过检测缓激肽受体B1（bradykinin receptor B1,BDKRB1）在宫颈鳞状上皮病变组织中的表达,探讨其在宫颈癌发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR方法检测10例宫颈炎、10例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithe-lial neoplasia,CIN）Ⅰ级、10例CINⅡ～Ⅲ级及30例宫颈鳞状上皮细胞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）组织中BDKRB1mRNA表达。结果BDKRB1表达随宫颈上皮病变级别的升高而升高;在CSCC组织中的表达与年龄、临床分期、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移、病理分级等临床病理参数相关;COX回归分析显示年龄、淋巴结转移伴脉管浸润、BDKRB1表达均为影响CSCC患者预后的独立因素。结沦BDKRB1在CSCC的发生、发展过程中起重要作用并与CSCC病人的不良预后相关,有望成为宫颈癌基因治疗的新靶点。     

缓激肽对内皮祖细胞存活、迁移及凋亡的影响

目的 观察不同浓度的缓激肽对人脐血来源的内皮祖细胞存活、迁移及凋亡的影响。方法 采用密度梯度离心法从人脐带血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7天后,收集贴壁细胞。通过免疫荧光法鉴定,FITC标记的异凝集素和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白染色双染色阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞,并经流式细胞仪检测技术进一步确定内皮祖细胞。以不同浓度缓激肽（1、10、100 nmol/L）或缓激肽B2受体阻断剂艾替班特+ 10 nmol/L 缓激肽干预内皮祖细胞 16 h。分别采用MTT比色法、Transwell小室和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶流式细胞术及Hoechst33342染色法观察缓激肽对人内皮祖细胞的存活、迁移以及凋亡影响。 结果 缓激肽在1、10 nmol/L浓度时可促进人内皮祖细胞存活、迁移,抑制其凋亡（P<0.05）。然而100 nmol/L缓激肽无促人内皮祖细胞存活、迁移和抑制其凋亡的作用（P>0.05）。缓激肽促人内皮祖细胞存活、迁移,抑制其凋亡的作用可被艾替班特阻断（P<0.05）。 结论 缓激肽在一定范围内可促进内皮祖细胞的存活、迁移,并抑制其凋亡,此作用主要由缓激肽B2受体介导。