全文获取类型
收费全文 | 457篇 |
免费 | 42篇 |
国内免费 | 29篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 6篇 |
儿科学 | 2篇 |
妇产科学 | 10篇 |
基础医学 | 68篇 |
口腔科学 | 12篇 |
临床医学 | 55篇 |
内科学 | 33篇 |
皮肤病学 | 3篇 |
神经病学 | 8篇 |
特种医学 | 12篇 |
外科学 | 37篇 |
综合类 | 152篇 |
预防医学 | 19篇 |
眼科学 | 15篇 |
药学 | 36篇 |
2篇 | |
中国医学 | 20篇 |
肿瘤学 | 38篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2023年 | 16篇 |
2022年 | 15篇 |
2021年 | 19篇 |
2020年 | 20篇 |
2019年 | 31篇 |
2018年 | 8篇 |
2017年 | 19篇 |
2016年 | 21篇 |
2015年 | 29篇 |
2014年 | 25篇 |
2013年 | 32篇 |
2012年 | 38篇 |
2011年 | 41篇 |
2010年 | 27篇 |
2009年 | 25篇 |
2008年 | 27篇 |
2007年 | 27篇 |
2006年 | 18篇 |
2005年 | 13篇 |
2004年 | 12篇 |
2003年 | 7篇 |
2002年 | 9篇 |
2001年 | 7篇 |
2000年 | 2篇 |
1999年 | 2篇 |
1998年 | 3篇 |
1997年 | 3篇 |
1996年 | 3篇 |
1995年 | 6篇 |
1994年 | 6篇 |
1993年 | 6篇 |
1992年 | 3篇 |
1991年 | 1篇 |
1990年 | 5篇 |
1988年 | 1篇 |
排序方式: 共有528条查询结果,搜索用时 46 毫秒
1.
目的探讨分泌型卷曲相关蛋白 1(SFRP1)对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响机制。方法本研究起止时间 2018年 11月至 2019年 6月。运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测正常结肠上皮细胞 HCoEpiC、人结直肠癌细胞 HCT8、SW480、RKO中 SFRP1的 mRNA表达;将 pcDNA 3.1组(转染 pcDNA 3.1)pcDNA 3.1-SFRP1组(转染 pcDNA 3.1-SFRP1)、 pcDNA 3.1-SFRP1+DMSO组[转染 pcDNA 3.1-SFRP1,再用二甲基亚砜( DMSO)处、理]、 pcDNA 3.1-SFRP1+IGF组[转染 pcDNA 3.1-SFRP1,再用丝裂原活化蛋白激酶( MAPK)/细胞外信号调节激酶( ERK)信号通路激活剂( IGF1)处理]均用脂质体法转染至 HCT8细胞。蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞中 SFRP1、波形蛋白(Vimentin)、纤维黏连蛋白(FN)、,基质金属蛋白酶 9(MMP-9)、 N-钙黏蛋白( N-cadherin)、上皮钙黏蛋白( E-cadherin)、 MAPK/ERK信号通路关键基因( Ras)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、细胞外信号调节激酶 1/2(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶 1/2(p-ERK1/2)、细胞外信号调节激酶( ERK)的蛋白表达;迁徙实验( Transwell)检测细胞的迁移侵袭。结果与正常结肠上皮细胞 HCoEpiC相比,人结直肠癌细胞 HCT8、SW480、 RKO中 SFRP1的表达显著降低[mRNA(1.00±0.06)比( 0.36±0.03)、(0.62±0.05)、(0.59±0.05);蛋白( 1.00±0.04)比( 0.24±0.02)、(0.48±0.04)、(0.47±0.04)均 P<0.05]。过表达 SFRP1可抑制 HCT8细胞的迁移( 120±11)比( 65±6)和侵袭( 98±8)比( 47±4)并下调Vimentin(0.96±0.05)比,(0.23±0.02)、FN(1.00±0.07)比(0.51±0.04)、MMP-9(0.98±0.08)比(0.35±0.03)、N-cadherin(1.01±0.09)比(0.43±0.04)上调 E-cadherin(0.99±0.06)比( 3.71±0.27)抑制 MAPK/ERK信号通路关键蛋白 Ras(0.97±0.07)比( 0.34±0.03)、mTOR(1.03±0.07)比(0.42±0.04)、 p-ERK1/2(0.98±0.08)比(0.29±0.03)和 ERK(1.01±0.06)比( 0.31±0.03)的表达。激活 MAPK/ERK信号通路可逆转过表达 SFRP1对结直肠癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 SFRP1可抑制结直肠癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能与失活 MAPK/ERK信号通路相关,将可为 SFRP1用于结直肠癌的治疗提供依据。 相似文献
2.
目的探讨RhoA基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoidcysticcarcinoma,SACC)细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法将液氮冻存的20例SACC及正常癌旁组织研磨匀浆,分别提取总RNA和总蛋白检测RhoA的表达情况。同时构建RhoA?siRNA转染2个细胞株SACC?LM和SACC?83细胞进行细胞学实验,实验分为实验组(转染RhoA?siRNA基因),阴性对照组(转染siRNA?NC基因)和空白对照组。通过qRT?PCR检测各组细胞RhoA的mRNA表达并确定转染效率;Western blot分析各组细胞RhoA及上皮-间充质转换(epithelial?mesenchymal transition,EMT)标志分子(E?cadherin、N?cadherin、Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验及划痕实验分析各组细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与正常癌旁组织相比,RhoA mRNA和蛋白相对表达量在SACC组织中增高(P<0.01);实验组与对照组相比,RhoA mRNA的相对表达量和蛋白的相对表达量降低,E?cadherin蛋白的相对表达量增加,N?cadherin、Vimentin蛋白的相对表达量降低(P<0.01);实验组细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.01)。结论RhoA在SACC组织中表达增高;体外沉默RhoA基因可有效抑制SACC?LM和SACC?83细胞迁移和侵袭能力,其可能通过作用EMT影响SACC细胞迁移和侵袭能力。 相似文献
3.
本研究拟探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞LNCaP和CWR22RV1的增殖、迁移和侵袭能力的影响。一、材料与方法1.材料:前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1(中国科学院上海生命科学研究院);Genistein(天津科瑞泰科技有限公司);RPMI 1640、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶(美国Gibco公司);E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin,Abcam公司);聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)试剂盒、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上样缓冲液(×5)及蛋白质印迹法(Western blot)试剂盒(上海市碧云天生物公司);2.实验方法:采用噻唑蓝(MTT)实验、划痕实验和Transwell实验检测Genistein对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、CD44和Oct-4的表达水平。 相似文献
4.
目的:探讨白藜芦醇(Res)联合奥沙利铂(Oxa)对人结肠癌细胞恶性生物学行为的抑制作用及机制。方法:将体外培养结肠癌HCT-116细胞分为Res组、Oxa组、联合组及对照组,分别以100μmo L/L Res、2μmo L/LOxa、100μmo L/L Res+2μmo L/LOxa、等量生理盐水处理,各组分别处理24、36、48 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测结肠癌HCT-116细胞增殖抑制情况;采用Transwell小室实验检测结肠癌HCT-116细胞侵袭能力; Wound Healing法检测结肠癌HCT-116细胞迁移能力;采用蛋白免疫印迹法检测结肠癌HCT-116细胞波形蛋白(Vimentin)蛋白表达情况。结果:干预48 h时,Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率分别为(28. 41±6. 25)%、(36. 11±8. 47)%、(83. 61±12. 72)%;干预48 h时,对照组、Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞侵袭率分别(97. 14±2. 81)%、(81. 23±4. 52)%、(69. 84±3. 97)%、(37. 11±3. 58)%;迁移率分别为(68. 57±4. 02)%、(46. 11±3. 13)%、(31. 25±2. 86)%、(18. 79±2. 21)%; Vimentin蛋白相对表达量分别为0. 93±0. 14、0. 52±0. 08、0. 31±0. 04、0. 13±0. 02。Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率呈逐渐升高趋势(P 0. 05);与对照组比较,Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞侵袭率、迁移率和Vimentin蛋白相对表达量降低,且联合组显著低于Res组与Oxa组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:Res与Oxa联合使用具有显著的协同效应,可更有效抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,并降低其侵袭和迁移能力,其机制可能与下调Vimentin蛋白表达有关。 相似文献
5.
6.
目的:探讨白细胞介素8( IL-8) 对宫颈癌细胞Caski 增殖、侵袭转移的影响及其机制。方法:将
体外培养的宫颈癌Caski细胞分为对照组、IL-8 组(20、40、60、80、100 ng/mL)、IL-8+LY294002 组
(80 ng/mL IL-8+20 μmol/L LY294002)以及LY294002 组(20 μmol/L),采用MTT 实验检测Caski 细胞的增殖能力,
采用划痕实验检测Caski 细胞的侵袭能力,采用Transwell 实验检测Caski 细胞的迁移能力。免疫印迹法检测蛋白
激酶B( PKB)、磷酸化蛋白激酶B( p-AKT)、波形蛋白、β-连环蛋白、上皮-钙黏蛋白( E-cadherin)的表达情
况。结果: IL-8 呈剂量依赖性促进细胞增殖,80 ng/mL 与100 ng/mL 组之间差异无统计学意义。IL-8 组划痕愈合
能力和细胞迁移能力均增强,IL-8+LY294002 组及LY294002 组划痕愈合能力和细胞迁移能力均低于IL-8 组。各
组AKT总蛋白表达量差异无统计学意义,IL-8 组中p-AKT、波形蛋白和β- 连环蛋白表达均增加,E-cadherin 减少,
AKT通路特异性抑制剂LY294002 可阻断上述作用。结论:IL-8 可能通过PI3K/AKT 通路影响波形蛋白、β- 连环
蛋白和E-cadherin 蛋白的表达,促进宫颈癌细胞的增殖、侵袭和转移。 相似文献
7.
目的:观测小鼠脑梗塞周围扩散性去极化(PIDs)的内源光信号变化特征,探索胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vim)基因敲除对PIDs的影响。方法以GFAP和Vim基因敲除(GFAP-/-Vim-/-)小鼠及其野生型(GFAP+/+Vim+/+)小鼠为研究对象,线栓法制备大脑中动脉梗塞(MCAO)模型,应用四波长内源光信号(OIS)成像技术监测两组动物4 h内PIDs的发作情况。结果 OIS成像显示PIDs在空间分布上表现为连续的、红蓝相间的弧形波,由发源处向四周缓慢播散;PIDs存在5种不同空间播散类型:喙-尾播散类型、侧方-内侧播散类型、尾-喙播散类型、对侧播散类型和内侧-侧方播散类型。GFAP-/-Vim-/-小鼠和GFAP+/+Vim+/+小鼠PIDs的发作次数、播散类型、速度及时程组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论四波长OIS成像技术可获得PIDs的高分辨率彩色影像,为更深入研究PIDs的时空特性创造了条件;GFAP和Vim基因敲除对MCAO模型制备后4 h内PIDs的发作无显著影响。 相似文献
8.
目的 研究自噬相关蛋白(LC3)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在子宫内膜异位症病人中的表达情况,探讨其与子宫内膜异位症发生发展的相关性。方法 选取2018年1—11月在武汉市第三医院行全子宫切除术的子宫内膜异位症41例,留取41例病人的异位子宫内膜(异位内膜组)及在位子宫内膜(在位内膜组),另外留取同期的38例因子宫肌瘤行全子宫或次全子宫切除术病人的正常子宫内膜(正常内膜组),采用免疫组化SP法检测留取标本中LC3,E-cadherin,Vimentin表达。结果 异位内膜组中LC3的阳性表达率(78.049%)明显高于正常内膜组(21.053%)和在位内膜组(31.707%)(P<0.05),LC3的阳性表达率在正常内膜组和在位内膜组中差异无统计学意义(P>0.05),异位内膜组和在位内膜组中E-cadherin阳性表达率(19.512%、39.024%)均低于正常内膜组(73.684%)(P<0.05);异位内膜组和在位内膜组中Vimentin阳性表达率(73.171%、53.659%)均高于正常内膜组(18.421%)(P<0.05)。异位内膜组LC3与E-cadherin、Vimentin表达有相关性(P<0.05);在位内膜组LC3与E-cadherin、Vimentin表达无相关性(P>0.05);E-cadherin与Vimentin在异位内膜组和在位内膜组中表达呈负相关(P<0.05);正常子宫内膜中三者无相关性(P>0.05)。结论 在异位子宫内膜组织中,自噬表达水平上调伴有EMT现象的发生,推测自噬可能参与EMT发生,导致异位病灶的形成发展。 相似文献
10.
[目的]研究复方土贝母对裸鼠乳腺癌移植瘤生长以及对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。[方法]40只4~5周龄雌性BALB/C裸鼠皮下接种1×10~7/mL MCF-7细胞悬液0.2mL/只,造模后随机分为荷瘤对照组、复方土贝母低、中、高剂量组。复方土贝母各剂量组分别以0.5、1.0、2.0g·m L~(-1)的复方土贝母连续灌胃30d,对照组予0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃容积均为0.6mL/20g。所有小鼠第30天处死,测量各组移植瘤体积,并计算抑瘤率。实时荧光定量PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达水平,Western blot和免疫组化检测β-catenin、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。[结果]复方土贝母低、中、高剂量组抑瘤率分别为10.56%、37.06%、33.17%,中、高剂量组移植瘤体积小于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05),复方土贝母各剂量组的β-catenin、Vimentin m RNA表达低于荷瘤对照组,E-cadherin mRNA表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。中、高剂量组β-catenin、Vimentin蛋白表达低于荷瘤对照组,E-cadherin蛋白表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]复方土贝母能抑制乳腺癌移植瘤的生长,可能与抑制肿瘤中β-catenin、Vimentin的表达,上调E-cadherin表达有关。 相似文献