吡柔比星脂质体制备与表征及其体外抗肿瘤作用

目的构建吡柔比星脂质体,提高吡柔比星的生物利用度和抑瘤作用,降低其毒副作用。方法采用薄膜水化法制备吡柔比星脂质体,并测定其包封率和物理性状。构建乳腺癌细胞U14的荷瘤裸鼠模型,分别尾静脉注射吡柔比星裸药及吡柔比星脂质体,分析其抑瘤作用。结果薄膜水化法制备的吡柔比星脂质体平均粒径(140.9±2.36)nm,多分散系数为(0.203±0.01),Zeta电位为-(14.2±2.64)m V,包封率为(75.1±3.5)%,并且可以缓释吡柔比星;吡柔比星脂质体组抑瘤率(75.1±8.6)%高于吡柔比星裸药组(64.9±12.2)%。结论吡柔比星脂质体是很有潜力的抗肿瘤纳米药物。     

大黄素对三种人宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察大黄素(Emodin)对人宫颈癌siha、Hela和C33A细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:将人宫颈癌siha、Hela和C33A细胞分别移植至裸鼠皮下,建立A(siha细胞)、B(Hela细胞)和C(C33A细胞)三种细胞移植瘤模型。第15天将移植成功的各模型裸鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组6只;分别经灌胃给予0.1%二甲基亚砜(DMSO)0.2m L/只、大黄素20mg/kg和大黄素40mg/kg,每日1次,共14天。给药结束后处死裸鼠,测量肿瘤瘤重和生长体积,并计算抑瘤率和肿瘤体积抑制率。结果:与对照组相比较,大黄素低剂量组对肿瘤生长体积抑制作用不明显,大黄素高剂量组肿瘤瘤重和生长体积均受到显著抑制;三种模型中,大黄素对siha、Hela两种细胞移植瘤抑制效果优于C33A细胞移植瘤。结论:大黄素具有抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用,对siha和Hela细胞移植瘤作用更为明显。     

亮菌多糖ATPSⅡ-2的抗肿瘤活性分析

目的:研究亮菌多糖ATPSⅡ-2的抗肿瘤活性及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:以4种人肿瘤细胞株为模型,采用噻唑蓝法检测体外抗肿瘤活性;建立小鼠S180荷瘤模型,以抑瘤率检测ATPSⅡ-2的体内抗肿瘤作用,以对荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响评价ATPSⅡ-2对小鼠免疫功能的作用;ELISA法检测对荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2)水平的影响。结果:ATPSⅡ-2对人肺癌细胞株的生长具有抑制作用,对Hela,K562和Hep G2细胞的增殖无明显的抑制作用;ATPSⅡ-2高、中、低剂量组对S180的抑瘤率分别为52.7%,45.9%和12.8%,且能提高荷瘤小鼠脾脏和胸腺指数。与阴性组比较,ATPSⅡ-2多糖高、中剂量组可提高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-2和TNF-α的水平,差异有统计学意义。结论:亮菌多糖ATPSⅡ-2有一定的细胞毒活性,有较强的体内抗肿瘤活性,其机制与调节血清细胞因子水平、增强机体免疫功能有关。     

绿原酸对小鼠EMT-6乳腺癌抑制作用研究

目的 :探讨绿原酸(CHA)对EMT-6乳腺癌BABLc小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响。方法 :建立EMT-6乳腺癌荷瘤及空白对照模型,分别以高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)绿原酸,阿霉素及重组人干扰素α-2b进行干预治疗,观察每组药物的抑瘤作用及对免疫器官的影响。结果:绿原酸各剂量组(5mg/kg,10mg/kg,20mg/kg)肿瘤生长速度均表现缓慢,抑瘤率明显,与模型组比较存在显著性差异;对移植瘤荷瘤鼠胸腺系数和脾脏系数影响不太明显。结论 :绿原酸对小鼠移植性EMT-6乳腺癌具有明显抑制作用,免疫器官的脏器系数无影响。     

复方阿胶浆对H22肝癌荷瘤小鼠5-FU化疗的增效减毒作用

目的:探讨复方阿胶浆对5-氟尿嘧啶(5-FU)抗小鼠H22肝癌的增效减毒作用。方法:SPF级昆明种小鼠接种瘤细胞制备H22肝癌小鼠模型,将肝癌小鼠随机分为荷瘤模型组、5-FU对照组(20 mg.kg-1,ip)、5-FU联用复方阿胶浆高、中、低剂量组(3,1.5,0.75 g.kg-1,以阿胶生药量计)。另设正常对照组(n=10)。连续给药7 d后处死动物,检测外周血白细胞计数,计算瘤重、抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数。采用淋巴细胞转化实验检测外周血淋巴细胞转化率;采用鸡红细胞吞噬实验检测腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结果:与5-FU对照组相比,高剂量复方阿胶浆联合治疗组小鼠瘤质量明显减轻(P<0.05),脾脏指数、胸腺指数以及外周血白细胞计数均显著提高(P<0.05)。5-FU化疗使荷瘤小鼠淋巴细胞转化率、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数较荷瘤模型组均显著降低(P<0.01)。复方阿胶浆联合治疗组小鼠淋巴细胞转化率、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均显著高于5-FU对照组(P<0.05),其中高剂量组分别达(35.9±9.2)%,(41.9±6.3)%,(0.74±0.17)。结论:复方阿胶浆对5-FU抗小鼠H22肝癌具有明显的化疗增效减毒作用。     

紫杉醇脂质体瘤体内给药对荷S180实体瘤小鼠的抑瘤作用

目的观察紫杉醇脂质体瘤体内给药对荷S180实体瘤小鼠体内抑瘤效果。方法选用成熟雄性昆明鼠皮下种植S180细胞,成瘤后随机分为4组,每组5只,分别为生理盐水对照组、空白脂质体组、紫杉醇注射液组、紫杉醇脂质体组。其中两组分别以紫杉醇含量为10mg/kg剂量瘤体内注射;其他两组分别给予生理盐水和空白脂质体瘤体内注射。共给药4次,给药间隔72h。每次给药后测量瘤径,计算瘤体积、称重。在给药结束后观察,取血后处死动物,剥离肿瘤,称重。部分血样进行细胞分类检查,部分血样离心后取上清用于肝功能检测。结果紫杉醇注射液组的质量抑瘤率(36.42±5.89)%与紫杉醇脂质体组的质量抑瘤率(57.47±7.31)%均高于生理盐水对照组(P<0.05,P<0.01)。紫杉醇脂质体组质量抑瘤率高于紫杉醇注射液组(P<0.05)。紫杉醇注射液组外周血白细胞计数明显低于生理盐水对照组及紫杉醇脂质体组(均P<0.05);紫杉醇脂质体组外周血白细胞计数略低于生理盐水对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。紫杉醇注射液组和紫杉醇脂质体组的ALT、AST值与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论紫杉醇脂质体的抑瘤效果优于紫杉醇注射液;紫杉醇脂质体瘤体内给药对外周血白细胞抑制作用小于紫杉醇注射液。     

黄精对环磷酰胺增效减毒作用的研究

目的：研究黄精对环磷酰胺的增效减毒作用。方法：将肉瘤S180细胞复苏,用生理盐水稀释后接种于小鼠腹腔内行细胞传代培养。7天后于无菌条件下抽取腹水,调配成浓度为1．75×107个瘤细胞／mL的细胞悬液,对40只小鼠进行肿瘤接种造模,每鼠接种0．2mL于右腋窝下。接种24h后称重,编号,随机将40只小鼠分为4组,分别为荷瘤组、CTX组、CTX＋低剂量黄精组、CTX＋高剂量黄精组。造模次日开始给药,共11天,停药次日处死,观察各组小鼠的一般状况,计算抑瘤率,脾、胸腺指数。结果：CTX组、CTX联合低、高剂量黄精对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为40．73％、55．22％、62．95％,CTX联合高剂量黄精组与与单用CTX组抑瘤率显著增高（P〈0．05）。CTX组、CTX联合低、高剂量黄精组胸腺指数与荷瘤组相比（P〈O．01、P〈0．05、P〈0．01）,CTX联合低、高剂量黄精组与CTX组比较（P〈0．05．P〈0．01）,胸腺指数均显著增高。CTX组、CTX联合低、高剂量黄精组与荷瘤组脾脏指数相比（P〈0．01、P〈0．05、P〈0．05）：CTX联合低、高剂量黄精组与CTX相比（p〈0．01）,脾脏指数均显著增高。结论：黄精与环磷酰胺联合用药具有增效减毒作用,黄精可减轻CTX对荷瘤小鼠免疫器官的毒性,保护荷瘤小鼠脾脏和胸腺并促其生长,     

复方半边莲口服液对乳腺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的影响

目的:探究复方半边莲口服液对乳腺癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制和改善肿瘤免疫的作用。方法:将24只BALB/C雌鼠原位接种4T1乳腺癌细胞,待瘤体体积超过40 mm~3时,随机分成对照组、复方半边莲口服液低、中、高剂量组,连续给药。每天测量荷瘤小鼠肿瘤大小,观察复方半边莲口服液对小鼠瘤体体积的影响;连续给药30 d后,处死荷瘤小鼠,通过测量不同组处理后荷瘤小鼠肿瘤重量,计算复方半边莲口服液各剂量组的抑瘤率;将肿瘤组织剪碎,经胶原酶处理成单细胞,并分离其中的淋巴细胞,使用流式分析仪检测肿瘤微环境中淋巴细胞的比例。结果:与对照组相比,复方半边莲口服液中、高剂量组于给药第10天、20天瘤体体积均降低(P<0.05),给药30 d,低、中、高剂量组瘤体体积均明显降低(P<0.01);低、中、高剂量组肿瘤重量明显降低(P<0.01),抑瘤率分别为17.95%、28.77%、49.43%;低、中、高剂量组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞比例明显升高(P<0.01),中、高剂量组CD8~+T细胞比例明显升高(P<0.01),而低、中、高剂量组调节性T细胞比例明显降低(P<0.01)。结论:复方半边莲口服液能够抑制乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长,增强荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能,值得临床推广应用。     

三羟基异黄酮对肝癌H22细胞移植瘤的抑制作用及机制探讨

目的探讨三羟基异黄酮抑制肝癌H22细胞移植瘤的效果及机制。方法将60只小鼠随机分为A、B、C、D、E、F组，各10只。均皮下接种肝癌H22细胞建立荷瘤小鼠模型。至肿瘤平均直径≥0．5cm时，B、C、D、E、F组分别在瘤旁隔日定时注射生理盐水、1．5mg／kg二甲基亚砜（DMSO）及含1．0．2．0、4．0mg／kg三羟基异黄酮的DMSO溶液，注射液体体积均为0．2ml。共5次。末次给药24h后断颈处死小鼠，剥离瘤体测瘤重，并检测凋亡指数（AI）及增殖细胞细胞核抗原（PCNA）。结果与其他组比较，D、E、F组小鼠瘤重均显著降低（P均〈0．05），D、E、F组间比较，P均〉0．05。与A组相比，B、C、D、E、F组AI均增加，但D、E、F组更显著（P均〈0．01）。PCNA表达各组间相比P均〉O．05。结论三羟基异黄酮对小鼠H22移植性肿瘤具有一定抑制作用，但无剂量依赖性；其机制主要是促进细胞凋亡、抑制瘤体生长。     

黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路的影响

目的观察黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路中相关因子β-连环蛋白(β-catenin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法将30只SPF级雌性裸小鼠(BALB/c)随机分为对照组、模型组、黄芪多糖组,每组10只。模型组和黄芪多糖组均经右侧肩胛背部皮下注射人子宫内膜癌细胞系Ishikawa肿瘤细胞悬液制作人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。造模4周后,黄芪多糖组给予黄芪多糖肌肉注射,对照组、模型组注射等量生理盐水,均连续14 d。实验结束后处死各组小鼠,摘取瘤体,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测子宫内膜癌组织中β-catenin、E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测β-catenin、E-cadherin mRNA表达情况。结果黄芪多糖组瘤体积、瘤质量均明显低于模型组(P均0.05),抑瘤率明显高于模型组(P0.05);模型组β-catenin蛋白和β-catenin mRNA表达水平均明显高于正常组(P均0.05),黄芪多糖组均明显低于模型组(P均0.05);模型组Ecadherin蛋白和E-cadherin mRNA表达水平均明显低于对照组(P均0.05),黄芪多糖组均明显高于模型组(P均0.05)。结论黄芪多糖可促进E-cadherin蛋白和基因表达,抑制β-catenin蛋白和基因表达,通过调控Wnt基因转导通路而发挥抗肿瘤作用。