三七总皂苷预处理通过激活HIF-1α/BNIP3线粒体自噬信号通路减少心肌细胞H/R损伤的机制研究

目的 探索三七总皂苷（panax notoginseng saponins,PNS）预处理心肌细胞减少缺氧/复氧（hypoxia- reoxygenation,H/R）损伤的作用机制。方法 设置对照组（常规培养H9c2细胞）、模型组（H/R损伤的H9c2细胞）、PNS组（加入PNS处理的H/R损伤的H9c2细胞）、二甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol,2-ME2）组（加入2-ME2处理的H/R损伤的H9c2细胞）和PNS+2-ME2组心肌细胞（同时加入PNS和2-ME2处理的H/R损伤的H9c2细胞）,采用酶联免疫吸附法检测心肌细胞损伤,蛋白质印迹法检测线粒体自噬信号通路表达,免疫荧光法检测心肌细胞自噬活性。结果 模型组高于对照组的指标有肌酸激酶（creatine kinase,CK）（0.37±0.05 vs. 2.41±0.66）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）（2.20±0.69 vs. 4.05±1.08）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate amino transferase,AST）（38.17±9.02 vs. 107.83±20.89）、细胞自噬标志物LC3（0.17±0.05 vs. 0.63±0.66）、低氧诱导因子-1α（hypoxic inducible factor-1 α,HIF-1α）（0.22±0.09 vs. 0.66±0.08）和B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19kDa相互作用蛋白3（B lymphocytoma-2/adenovirus E1B 19kDa interacting protein 3,BNIP3）（0.15±0.02 vs. 0.59±0.13）,差异均有统计学意义（P<0.05）。PNS组低于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 1.55±0.39）、LDH（4.05±1.08 vs. 3.19±0.88）、AST（107.83±20.89 vs. 66.52±11.43）,差异均有统计学意义（P<0.05）;PNS组高于模型组的指标有LC3（0.63±0.66 vs. 0.85±0.23）、HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.91±0.22）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.82±0.17）,差异均有统计学意义（P<0.05）。2-ME2+PNS组低于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 2.08±0.54）、LDH（4.05±1.08 vs. 3.51±0.92）、AST（107.83±20.89 vs. 83.49±19.53）;2-ME2+PNS组高于模型组的指标有LC3（0.63±0.66 vs. 0.70±0.54）、HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.72±0.10）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.64±0.12）,差异均有统计学意义（P<0.05）。2-ME2组高于模型组的指标有CK（2.41±0.66 vs. 3.62±0.98）、LDH（4.05±1.08 vs. 5.67±1.39）、AST（107.83±20.89 vs. 192.13±28.97）,差异均有统计学意义（P<0.05）;2-ME2组低于模型组的指标有HIF-1α（0.66±0.08 vs. 0.27±0.03）和BNIP3（0.59±0.13 vs. 0.25±0.07）,差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,模型组心肌细胞LC3荧光斑点数明显增加（P<0.05）;与模型组相比,PNS组和2-ME2+PNS组心肌细胞LC3荧光斑点数明显增加,2-ME2组LC3荧光斑点数明显减少（P<0.05）。结论 PNS能够通过激活HIF-1α/BNIP3线粒体自噬信号通路,减少心肌细胞H/R损伤。     

麝香通心滴丸对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨麝香通心滴丸（STDP）对心肌细胞缺氧/复氧的保护作用。 方法建立心肌缺氧/复氧模型。将H9c2细胞分为5组：对照组（细胞正常培养,不做任何处理）、模型组、STDP组（在复氧前40 min给予STDP 50 mg / L）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（在复氧前40 min给予3-MA 5 mmol / L）及STDP + 3-MA组（在复氧前40 min分别给予STDP 50 mg / L及3-MA 5 mmol / L）。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组细胞存活率,并测定各组细胞乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛及肌酸激酶水平。采用流式细胞仪检测各组细胞的细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测信使RNA（mRNA）自噬相关基因Beclin-1、Atg5的表达水平,并通过Western-blotting检测各组细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ / LC3Ⅰ、低氧诱导因子1α（HIF-1α）、Bcl-2 /腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3（BNIP3）、Beclin-1、Atg5的表达水平。 结果各组细胞存活率比较,差异有统计学意义（F = 85.893,P = 0.028）,且STDP组细胞存活率较模型组、3-MA组及STDP + 3-MA组细胞存活率均显著升高[（90 ± 7）%、（63 ± 5）%、（80 ± 5）%、（81 ± 6）%,P均< 0.05]。各组细胞LDH、丙二醛、肌酸激酶水平,细胞凋亡率,Beclin-1 mRNA、Atg5 mRNA以及LC3Ⅱ / LC3Ⅰ、HIF-1α、BNIP3、Beclin-1、Atg5蛋白表达水平的比较,差异均有统计学意义（F = 78.381、23.519、48.376、22.726、6.315、5.294、75.219、116.546、21.125、39.724、65.247,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,在STDP组细胞中,LDH[（92 ± 6）、（194 ± 13）、（195 ± 11）、（192 ± 10）μmol / L,P均< 0.05]、丙二醛[（12.5 ± 0.7）、（17.2 ± 1.2）、（18.5 ± 1.6）、（17.9 ± 1.0）μmol / L,P均< 0.05]、肌酸激酶[（19.9 ± 1.0）、（34.3 ± 2.2）、（35.3 ± 2.2）、（34.8 ± 2.5）μmol / L,P均< 0.05]水平,细胞凋亡率[（5.8 ± 0.8）%、（8.8 ± 0.9）%、（7.6 ± 0.7）%、（7.3 ± 0.5）%,P均< 0.05]较模型组、3-MA组及STDP + 3-MA组均明显降低;Beclin-1 mRNA、Atg5 mRNA、LC3Ⅱ / LC3Ⅰ、BNIP3、Beclin-1、Atg5蛋白表达水平较模型组均明显降低,而较3-MA组及STDP + 3-MA组均显著升高（P均< 0.05）;HIF-1α蛋白表达水平较模型组、3-MA组及STDP + 3-MA组均明显升高（P均< 0.05）。 结论STDP可通过调控HIF-1α / BNIP3信号通路发挥对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。     

小儿咳喘灵颗粒联合西药治疗小儿咳嗽痰热壅肺证临床研究

目的：观察小儿咳喘灵颗粒联合西药治疗小儿痰热壅肺型咳嗽的疗效。方法：根据随机数字表法将88例咳嗽患儿分为对照组和观察组,每组44例。对照组给予头孢克洛干混悬剂、盐酸丙卡特罗口服溶液治疗,观察组在对照组所用西药的基础上给予小儿咳喘灵颗粒治疗。2组均治疗10 d。比较2组患儿的症状体征消失时间,治疗前、治疗10 d后的痰热壅肺证症状评分及治疗后的临床疗效。结果：治疗10 d后,观察组和对照组的临床疗效总有效率分别为97.73%、81.82%,2组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组咳嗽、咳痰、发热的消失时间均较对照组缩短（P<0.01）。2组咳嗽、咳痰、发热、口渴、面赤心烦、小便短赤、大便干结评分均较治疗前下降（P<0.01）,观察组7项症状评分均低于对照组（P<0.01）。结论：在常规西药干预基础上加服小儿咳喘灵颗粒治疗小儿咳嗽痰热壅肺证效果确切,可有效促进咳嗽、咳痰等症状的好转,缩短治疗时间。     

奥利司他联合西格列汀二甲双胍对肥胖型2型糖尿病患者稳态模型胰岛素抵抗指数和胰岛β细胞功能指数的影响

目的分析奥利司他联合西格列汀二甲双胍对肥胖型2型糖尿病患者稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)的影响。方法将86例肥胖型2型糖尿病患者按随机数字表法分组,每组43例。对照组以西格列汀二甲双胍治疗,观察组在对照组基础上加奥利司他口服,比较两组治疗效果、血糖指标等。结果对照组、观察组治疗总有效率分别为76.74%、93.02%,组间比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后与对照组比,观察组空腹血糖、餐后2 h血糖水平显著下降,同时总胆固醇、三酰甘油水平明显降低(P0.05),高密度脂蛋白明显升高(P0.05)。治疗后,观察组稳态模型胰岛素抵抗指数明显低于对照组,稳态模型胰岛β细胞功能指数明显高于对照组(P0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P0.05)。结论奥利司他联合西格列汀二甲双胍对肥胖型2型糖尿病患者疗效显著,能有效改善血糖、血脂指标,且可改善胰岛β细胞功能,减轻机体的胰岛素抵抗情况。     

β-榄香烯通过调控RBBP4/H3K27通路抑制结肠癌肝转移

目的 探究β-榄香烯（β-elemene,β-E）抑制结肠癌进展的潜在机制。方法 使用移植肿瘤模型验证β-E在体内抑制结肠癌的生长作用。将不同浓度（0～400μmol/L）的β-E作用于结肠癌细胞,利用CCK-8、细胞克隆、Transwell实验和蛋白质印迹法等评估细胞活力、迁移和侵袭能力。结果 5-Fu组和β-E组小鼠的结肠肿瘤重量均显著低于模型组（P<0.05）,5-Fu组小鼠的结肠肿瘤抑制率显著高于β-E组[（59.22±0.11）%vs.(36.63±0.09)%,P<0.05]。5-Fu组和β-E组小鼠的肝转移灶数量显著少于模型组（P<0.05）。β-E可抑制结肠癌细胞增殖、克隆和侵袭。β-E显著抑制结肠癌组织中RBBP4和H3K27me3表达（P<0.05）。结论 β-E可抑制结肠癌细胞增殖和侵袭,可能与其调控RBBP4功能重塑H3K27甲基化有关。