儿童类风湿关节炎高贡献率易感基因的研究

目的通过对小儿类风湿关节炎全基因组基因拷贝数变异(copy number variations,CNVs)的研究,为该病易感基因筛选和发病机制研究提供理论基础。方法选取小儿类风湿关节炎患者(Juvenile rheumatoid arthritis,JRA)20例作为患病组,随机从体检中心选取无类风湿关节炎患病史健康儿童20例作为健康对照组。采用测序仪分别对类风湿关节炎患病组和健康组的DNA-pool进行全基因组重测序,用生物信息学软件对测序数据进行分析。结果我们采用CNVnator软件对患病组和健康组的测序数据进行检测,发现CNV位点分别为7479个和5201个。通过生物信息学分析筛选,患病组与健康组比较发现有825个CNVs位点,其中有192个位于内含子区域,有93个位于外显子区域,19个位于上游位置,25个位于下游位置。结论本研究揭示了儿童期类风湿关节炎患者的基因组拷贝数变异的变化,并发现了编码区的KIR3DL1、CD247、PPIP5K1、MIOX、ANK3、HK3基因可能为类风湿关节炎的易感基因。     

重复经颅磁刺激联合肌电生物反馈对脑卒中患者上肢功能恢复的影响

目的 观察重复经颅磁刺激（rTMS）联合肌电生物反馈训练对脑卒中患者上肢功能恢复的影响。 方法 采用随机数字表法将135例脑卒中后上肢功能障碍患者分为磁刺激组、肌电反馈组及观察组,每组45例。所有患者均给予常规药物治疗及康复干预（包括主动训练、被动训练及抗阻训练等）,磁刺激组在此基础上辅以低频rTMS治疗,肌电反馈组辅以肌电生物反馈训练,观察组则辅以rTMS及肌电生物反馈训练。于治疗前、治疗4周后检测3组患者皮质潜伏期、中枢运动传导时间(CMCT),同时采用Fugl-Meyer运动功能量表（FMA）上肢部分及改良Ashworth痉挛量表对患者上肢功能恢复情况进行评定。 结果 治疗后磁刺激组、肌电反馈组及观察组皮质潜伏期、CMCT均较治疗前明显缩短;观察组皮质潜伏期［(23.5±1.1)ms］、CMCT［(11.2±0.8)ms］亦较磁刺激组、肌电反馈组明显缩短（P＜0.05）。治疗后3组患者上肢FMA评分均较治疗前明显增加（P＜0.05）;并且观察组上肢FMA评分［(39.8±6.3)分］亦显著高于磁刺激组、肌电反馈组水平（P＜0.05）,肌电反馈组上肢FMA评分［(33.8±6.7)分］亦显著高于磁刺激组水平（P＜0.05）。治疗后3组患者偏瘫侧腕屈肌MAS评级均较治疗前明显改善（P＜0.05）,并且观察组腕屈肌MAS评级亦显著优于磁刺激组及肌电反馈组水平（P＜0.05）。 结论 在常规干预基础上辅以rTMS或肌电生物反馈训练均可有效改善脑卒中患者上肢受损功能,如rTMS与肌电生物反馈训练联用则具有协同作用,能进一步提高康复疗效,有利于脑卒中患者上肢功能全面恢复。     

凉血消银颗粒剂对银屑病转基因小鼠模型miR-155/SOCS1轴的影响

目的　研究凉血消银颗粒剂对银屑病模型（K14-VEGF转基因）小鼠的治疗效果及对微小RNA-155（miR-155）/细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）轴的影响。方法　未经任何处理的远交系Swiss小鼠（FVB/NJ）8只作为对照组;另将经K14-VEGF转基因小鼠（SPF级）24只按随机数字表法分为模型组、凉血消银颗粒剂组及甲氨蝶呤组,每组8只。凉血消银颗粒剂以60 g/kg剂量灌胃,甲氨蝶呤组以2 mg/kg剂量灌胃,每日均灌胃1次,对照组和模型组灌胃生理盐水;连续给药10 d后处死,观察各组小鼠银屑病皮损严重程度指数（PASI）评分;HE染色观察细胞形态学变化;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-23、IL-6、IL-1表达水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测miR-155表达水平;蛋白质印迹法测定SOCS1蛋白表达水平。结果　与对照组相比,模型组表现为棘层增厚、真皮浅层淋巴细胞浸润等;与模型组比较,凉血消银颗粒剂组、甲氨蝶呤组小鼠病理严重程度显著降低,细胞形态恢复。与对照组相比,模型组PASI评分、TNF-α、IL-23、IL-6、IL-1、miR-155表达水平显著升高（P＜0.05）,SOCS1表达水平显著降低（P＜0.05）;与模型组相比,凉血消银颗粒剂组、甲氨蝶呤组PASI评分、TNF-α、IL-23、IL-6、IL-1、miR-155表达水平显著降低（P＜0.05）,SOCS1表达水平显著升高（P＜0.05）;凉血消银颗粒剂组与甲氨蝶呤组上述指标相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　凉血消银颗粒剂可能通过抑制miR-155/SOCS1轴活化,减轻炎症反应。     

安罗替尼对胶质瘤放疗的增敏作用及其机制

目的观察安罗替尼对胶质瘤的放疗增敏作用并探讨其作用机制。方法(1)培养胶质瘤细胞人脑胶质母细胞瘤系(U87MG),对照组,置于6MV-X射线照射,安罗替尼组,将安罗替尼加入U87MG联合6MV-X射线照射,细胞克隆法绘制生长曲线,比较两组的放疗敏感性,蛋白质印迹法(Western blot)法检测小窝蛋白(Caveolin-1)蛋白及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达。(2)建立U87MG动物模型,随机数字表法分为4组,对照组,不处理;单放组,6MV-X射线照射,安罗替尼组,安罗替尼灌胃,联合组,安罗替尼灌胃联合6MV-X射线照射,记录瘤重,计算抑瘤率,检测凋亡表达,Caveolin-1蛋白表达。采用t检验和方差分析。结果细胞实验,对照组的细胞存活分数(sF2)、终斜率的倒数(Do)、准阈剂量(Dq)值分别为0.64、1.83 Gy、1.34 Gy;安罗替尼组的sF2、Do、Dq值为0.47、1.25 Gy、0.92 Gy;增敏比(SER)值为1.47,差异有统计学意义(t=2.066,P<0.05)。Western blot检测安罗替尼组Caveolin-1蛋白水平,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化水平低于对照组。动物实验发现单放组、安罗替尼组及联合组小鼠肿瘤体积低于对照组,瘤重分别为(6391.89±114.06)、(3367.19±60.61)、(4763.02±71.65)、(2982.77±54.30)mg,差异有统计学意义(F=331.631,P<0.05)。流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,单放组、安罗替尼组及联合组比高于对照组细胞凋亡率,凋亡率分别为(8.92±0.53)%、(26.75±1.19)%、(24.43±0.79)%、(17.64±0.65)%,差异有统计学意义(t=6.873,P<0.05)。免疫组织化学染色法检测单放组、安罗替尼组及联合组小鼠肿瘤Caveolin-1表达率低于对照组。结论体内外实验发现安罗替尼对胶质瘤有放疗增敏作用,Caveolin-1表达下降调控MAPP磷酸化通路改变可能是其作用机制之一。