叶酸缺乏对小鼠脑组织PS1基因表达和Aβ沉积的影响

目的探讨叶酸缺乏对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠脑组织中早老素1(Presenilin1)基因表达和β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)沉积的影响。方法将6月龄APP/PS1双转基因AD模型小鼠24只,随机分为AD叶酸缺乏组(AD+FA-D)和AD叶酸对照组(AD+FA-N),每组12只,12只正常同月龄C57小鼠作为阴性对照组(WT+FA-N)。AD+FA-D组给予叶酸缺乏饲料,AD+FA-N组和WT+FA-N组给予正常饲料。免疫组织化学技术检测脑组织β-淀粉样蛋白沉积;实时定量PCR(RT-PCR)和荧光原位杂交(FISH)检测脑组织中PS1m RNA表达;免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学法检测脑组织中PS1蛋白表达。结果 WT+FA-N组脑组织Aβ沉积低于AD+FA-N组(P0.05);AD+FA-D组高于AD+FA-N组(P0.05);WT+FA-N组PS1 m RNA和蛋白表达均低于AD+FA-N组(P0.05);AD+FA-D组均高于AD+FA-N组(P0.05)。结论叶酸缺乏可以增加APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑组织中PS1 m RNA和蛋白表达并促进β-淀粉样蛋白沉积。     

Wnt信号通路在有氧运动改善高脂饮食诱导C57BL/6小鼠胰岛素抵抗中的作用

目的:探讨有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌Wnt信号通路的关键蛋白糖原合成激酶(GSK3β)磷酸化表达水平及其下游信号蛋白分子连环蛋白(β-catenin)磷酸化水平的影响及其与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:将4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(Con组)和胰岛素抵抗模型组(IR组),分别喂饲标准饲料和高脂饲料10周。建立IR模型后,再将IR组随机分为高脂饮食安静组(HC组)和高脂饮食运动组(HE组);Con组随机分为正常饮食安静组(NC)和正常饮食运动组(NE),随后运动组小鼠进行持续6周、75%VO2max强度的有氧跑台运动。6周训练结束后24小时,分别检测小鼠口服糖耐量试验(OGTT)和空腹血清胰岛素值(FINs);采用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠胰腺组织胰岛β细胞形态学变化;采用Realtime PCR及Western Blot方法检测小鼠骨骼肌GSK3β和β-catenin基因及蛋白表达。结果:(1)与NC组相比,HC组小鼠OGTT、FINs及胰岛β细胞形态学结果呈现IR的病理生理学变化,而6周有氧跑台运动(HE vs HC)可以显著改善OGTT、FINs及胰岛形态学变化;(2)与NC组相比,HC组骨骼肌组织GSK3βm RNA表达及p GSK3βSer9蛋白表达分别下降60%及1.19%(P<0.05)。β-catenin m RNA和pβ-catenin Ser33/37Thr41蛋白表达分别增加60%和19.23%(P<0.05);(3)与NC组相比,NE组骨骼肌组织GSK3βm RNA表达和GSK3β蛋白表达分别增加40.00%(P<0.05)和36.11%,β-catenin m RNA表达降低15.00%(P<0.05)。结论:6周有氧运动可显著改善高脂饮食诱导小鼠IR,其机制与Wnt信号通路活性变化相关。     

叶酸、维生素B_(12)及同型半胱氨酸与阿尔茨海默病的相关性研究

目的研究阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和外周血中叶酸、维生素B_(12)以及同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)之间的关系,为开展叶酸等膳食维生素防治AD提供依据。方法于2012年11月至2017年11月选取来自天津脑系科专科医院认知障碍门诊的231例AD患者作为研究对象,选取天津市塘沽区某社区医院认知正常的230例老年人作为正常参照人群。收集基本信息,采集空腹静脉血测定血中叶酸、维生素B_(12)以及Hcy浓度。采用SPSS 17.0软件进行t检验、χ~2检验和多因素非条件logistic回归分析。结果 AD患者血中的叶酸、维生素B_(12)和Hcy浓度中位数(P_(25)~P_(75))分别为11.00 nmol/L(P_(25)~P_(75):7.16~16.10 nmol/L)、292.17 pmol/L(P_(25)~P_(75):202.82~406.53 pmol/L)和15.56μmol/L(P_(25)~P_(75):11.10~20.64μmol/L),叶酸和维生素B_(12)浓度均低于正常人群[14.74 nmol/L(P_(25)~P_(75):10.19~20.67 nmol/L)和381.81 pmol/L(P_(25)~P_(75):275.04~519.60 pmol/L)],Hcy浓度高于正常人群[11.75μmol/L(P_(25)~P_(75):8.66~15.63μmol/L)],差异均有统计学意义(P0.01)。AD患者血清叶酸过低、维生素B_(12)过低及Hcy过高的比例(分别为73.16%、8.66%和54.11%)均高于正常人群(分别为54.78%、3.91%和28.70%),差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。多因素logistic回归分析结果显示,调整混杂因素后,正常叶酸水平(OR=0.586)和正常维生素B_(12)水平(OR=0.079)者患AD的风险较低;高Hcy者患AD风险较高(OR=2.405),均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论叶酸、维生素B_(12)过低以及Hcy过高均与AD发病相关,针对老年人开展食品叶酸、维生素B_(12)强化可以在一定程度上防治或延缓AD的发生发展。     

中国肿瘤医院和三级医院院长关于缓和医疗服务的全国性调查

目的 从医院领导角度了解并比较我国肿瘤专科医院和三级医院的缓和医疗服务现况。方法 对肿瘤医院(206家)和三级医院(443家)领导进行缓和医疗服务的电子问卷调查并比较两类医院是否存在差异,调查内容包括服务形式和内容、未来计划以及阻碍学科发展的因素等。采用SPSS 16.0软件进行数据分析。根据数据类型,组间比较分别采用t检验、Fisher确切概率检验及χ²检验。结果 全国共88家(42.72%)肿瘤医院和174家(39.28%)三级医院领导完成调研,肿瘤医院参加调研的比例明显高于三级医院(P<0.01)。过去10年,78.74%(137/174)的三级医院和85.23%(75/88)肿瘤医院都能提供缓和医疗服务;目前仍能提供这一服务的比例分别为87.59%(120/137)和90.67%(68/75),差异均无统计学意义。48.53%(33/68)的肿瘤医院以及40.83%(49/120)的三级医院有缓和医疗专科医师(P=0.31)。肿瘤医院的专科门诊率为27.94%(19/68),三级医院为17.50%(21/120),差异无统计学意义;肿瘤医院在会诊[29家(42.65%)和33家(27.50%)]、住院床位[28家(41.18%)和32家(26.67%)]、专属安宁疗护机构[20家(29.41%)和20家(16.67%)]情况方面,均较三级医院有显著优势(P<0.05)。在缓和医疗服务和镇痛治疗上,两类医院都比5年前有显著进步(P<0.01);对缓和医疗与肿瘤治疗整合的观点都很支持,肿瘤医院均值为(7.06±3.19)分,三级医院为(6.29±3.64)分,差异无统计学意义;肿瘤医院对增加科研项目的赞同度显著高于三级医院[(7.24±3.12)和(5.91±3.71)分,P<0.01]。阻碍缓和医疗服务的前三位因素依次为缺乏报销支持、专业人员和预算。结论 尽管全国85%以上的肿瘤医院和三级医院提供服务,但缓和医疗专科医师的比例不足50%。两类医院的缓和医疗及镇痛治疗都有显著进步,而肿瘤医院在专科会诊、住院床位、安宁疗护机构上比三级医院有优势。缺乏报销支持、专业人才和预算为阻碍缓和医疗服务的三大因素。     

Ⅱ型组蛋白去乙酰化酶调控骨骼肌代谢相关基因表达及其与运动的关系

<正>随着人们生活水平的提高和医疗卫生条件的改善,传染性疾病已经得到有效的控制,而代谢性疾病(肥胖、糖尿病、冠心病等)已经成为严重影响人类健康的主要疾病。胰岛素抵抗(InsulinResistance,IR)是诸多代谢性疾病的共同病理生理基础。IR是指胰岛素作用的靶器官对胰岛素的敏感性降低,致使正常水平的胰岛素不足以维持血糖水平在正常范围的状态[1-3]。规律的有氧运动是人     

蛋白组学技术研究有氧运动影响C57BL/6小鼠骨骼肌代谢系列报道之一——有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌脂代谢相关蛋白的影响

目的:采用蛋白组学技术研究6周有氧跑台运动对胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)小鼠骨骼肌总体蛋白表达的影响,对比筛选差异表达蛋白,分析有氧运动改善小鼠IR的分子机理。方法:选用C57BL/6雄性小鼠80只,将其随机分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60),分别饲以基础和高脂饲料10周。鉴定高脂膳食组IR小鼠模型建立成功后,将40只成模的IR小鼠分为高脂饮食安静组(HC,n=20)和高脂饮食运动组(HE,n=20)。HE组进行6周、强度为75%VO2max的跑台运动。6周后检测各组小鼠空腹血清胰岛素水平(FIN)及口服葡萄糖耐量实验(OGTT);提取小鼠股四头肌总蛋白进行蛋白质双向电泳(2-DE),采用ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析2-DE电泳图谱,并采用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和高效液相色谱-串联谱法(LC-MS/MS)分析统计蛋白表达差异。结果:6周有氧跑台运动后,HE组小鼠血清FIN水平显著降低,OGTT曲线峰值出现时间点前移,且峰值下降,平台期消失。比较HC组与HE组小鼠骨骼肌蛋白表达图谱,以蛋白表达量变化大于1.5倍为显著性判定标准,共筛选出43个差异表达蛋白。排除21个为高丰度蛋白后,表达上调蛋白8个、下调蛋白14个。其中与脂代谢相关的蛋白包括脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte Fatty Acid Binding Protein,AFABP)和载脂蛋白A-I(Apolipoprotein A-I,ApoA-I)。有氧运动引起IR小鼠骨骼肌AFABP表达下降50%、ApoA-I表达上调2.62倍。与HC组相比,与骨骼肌能量代谢相关的蛋白电压依赖性阴离子通道1和2(Voltage-dependent Anion Channel,VDAC)表达分别下降58%和42%。结论:6周有氧运动能够显著改善IR小鼠症状,同时HE组小鼠骨骼肌脂代谢相关蛋白AFABP、ApoA-I和电压依赖性阴离子通道蛋白VDAC1、VDAC2表达受到显著影响。     

蛋白组学技术研究有氧运动影响C57BL/6小鼠骨骼肌代谢系列报道之二——有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌蛋白组的影响

目的:采用蛋白组学技术研究6周有氧跑台运动对C57BL/6小鼠骨骼肌蛋白表达的影响。通过筛选对比安静组与运动组小鼠骨骼肌差异表达蛋白,分析有氧运动引发的骨骼肌代谢相关信号通路变化,探讨运动增进健康、防治疾病的分子机理。方法:选用C57BL/6雄性小鼠40只,将其随机分为正常饮食组(NC,n=20)和正常饮食运动组(NE,n=20),均饲以基础饲料。NE组进行6周强度为75%VO2max的跑台运动。6周后提取小鼠股四头肌总蛋白,采用Bradford法检测蛋白浓度后进行蛋白质双向电泳(2-DE),采用ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析2-DE电泳图谱,并对差异表达蛋白点采用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和高效液相色谱-串联谱法(LC-MS/MS)进行分析、采用Mascot检索软件结合NCBI nr数据库鉴定差异表达蛋白,并运用相关分析软件对所得数据进行统计学处理。结果:经6周有氧跑台运动后,比较NC组与NE组小鼠骨骼肌蛋白表达图谱,以蛋白表达量变化1.5倍以上为显著性判定标准,共筛选出32个差异表达蛋白,排除高表达丰度蛋白背景信号后共选出6个差异表达蛋白。其中,与线粒体能量代谢相关的蛋白有3个,分别为呼吸链复合体Ⅰ(Nadh-Ubiquinone Oxidoreductase 18 Kda Ip Subunit),表达增加2.92倍,线粒体膜电压依赖阴离子通道1和2(Voltage-dependent Anion Channel,VDAC),表达上调1.82倍和3.51倍;与细胞膜修复相关的蛋白Trim72(Tripartite Motif-Containing Protein 72)表达增加2.10倍;糖代谢相关蛋白乳酸脱氢酶(L-Lactate Dehydrogenase B Chain,LDH-B)表达上调1.85倍;Ester Hydrolase C11Orf54 Homolog蛋白表达下降56%。结论:6周有氧运动引起小鼠骨骼肌32个蛋白表达显著改变,其中,与线粒体能量代谢相关蛋白、细胞膜修复相关蛋白、糖代谢相关蛋白等均受到影响。由于这些蛋白功能与骨骼肌能量代谢密切关系,提示有氧运动对促进骨骼肌能量代谢、预防代谢相关疾病具有重要作用。     

运动及限食对mTOR信号通路的影响及其与衰老关系的研究进展

<正>人口统计学研究显示,到2050年,全世界60岁以上人口数量将达到20亿,比2000年增长逾3倍[1]。老龄人口的增多使与衰老相关疾病的发病率随之增加,给社会经济和医疗等方面带来沉重负担,因此对衰老及其相关疾病的研究越来越为人们     

肥胖的表观遗传跨代继承机制研究及运动干预的展望

<正>肥胖及其引发的代谢性疾病对人类的健康和生存构成重大威胁,是世界各国面临的最重要的社会问题之一。最新统计数据显示,目前中国肥胖人口已达3.2亿,增幅超过美国、英国和澳大利亚,其中最值得关注的是儿童肥胖的发生率显著升高