小檗碱通过影响糖原结构调节肝糖代谢研究

目的探讨小檗碱调节糖原代谢的机制及对糖原结构的影响。方法采用自发型糖尿病模型db/db小鼠作为疾病模型鼠,考察小檗碱对db/db小鼠血糖水平的影响;提取小鼠的肝糖原进行体积排阻色谱(SEC)和透射电镜(TEM)分析,考察小檗碱对db/db小鼠肝糖原的结构影响,并探讨其影响机制。结果小檗碱可以显著性降低db/db小鼠的空腹血糖,降低db/db小鼠血清胰岛素水平;改善db/db小鼠肝糖原的结构不稳定性;降低db/db小鼠肝组织中糖原磷酸化酶(GP)、糖原脱分支酶(GDBE)和环磷酸腺苷(cAMP)表达水平,降低血清胰高血糖素水平。结论小檗碱可以调控cAMP/GP信号通路,改善db/db小鼠的肝糖原结构,修复受损糖原结构,这可能是其调节肝糖代谢,改善糖尿病症状的机制之一。     

寒冷刺激引起关节损伤实验研究

目的观察间断性寒冷刺激引起小鼠关节炎病变的情况。方法将20只8周龄昆明小鼠随机分为正常对照组和寒冷刺激组,每组10只。对照组小鼠自由饮食,无特殊处理。寒冷刺激组小鼠每天固定时间被放置于底层铺满冰袋的小鼠笼中2 h,寒冷刺激共处理12周。每周测量小鼠体重和后踝关节以下体积,寒冷刺激处理结束后脱颈处死小鼠,取其左后腿趾间关节、跖趾关节、踝关节进行组织固定、包埋、切片,HE染色观察各关节病理变化。剥去小鼠右后腿皮肤,提取踝关节组织匀浆,检测匀浆液类风湿因子（reumatoid factor,RF）、C-反应蛋白（C-reaction protein,CRP）的水平。结果寒冷刺激对小鼠体重无明显影响（P>0.05）,寒冷刺激使小鼠后爪组织体积显著增加（P<0.05）。趾间关节、跖趾关节、踝关节HE染色显示寒冷刺激后,小鼠关节组织水肿,轻度炎症浸润、滑膜增生,但未见明显血管翳、软骨和骨侵蚀等病理变化。寒冷刺激后,雌、雄性小鼠踝关节组织匀浆液CRP水平明显升高（P<0.05,P<0.001）,RF水平无明显变化（P>0.05）。结论间断性寒冷刺激可以引起小鼠趾间关节、跖趾关节、踝关节等关节炎性肿胀,但炎性细胞浸润少、浸润程度轻。此动物模型可作为一种以寒性为特征的不同于类风湿性关节炎等热性关节炎表现的新关节炎模型。     

哌立福新对裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的:探讨哌立福新对裸鼠皮下瘤生长的抑制作用。方法:建立荷人食管癌Eca109细胞的裸鼠皮下瘤模型,分别观察对照组及经哌立福新、顺铂和哌立福新联合顺铂治疗后荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况,应用TUNEL法观察肿瘤组织中细胞凋亡情况,Western-Blot法观察肿瘤组织中Akt、m TOR蛋白表达。结果:哌立福新和顺铂单独使用均使肿瘤生长速度减慢(P<0.05),二者联合对肿瘤生长抑制效果更明显(P<0.01)。TUNEL法检测发现哌立福新在体内能引起Eca109细胞凋亡(P<0.05),Western-Blot法结果表明哌立福新在体内通过抑制Akt/m TOR信号通路的活性,促进细胞凋亡,从而抑制人食管癌Eca109细胞的生长。结论:哌立福新联合顺铂可抑制裸鼠皮下食管癌移植瘤的生长,其机制可能是通过Akt/m TOR信号通路发挥作用。     

拓扑替康通过调控缺氧诱导因子-1α影响U87MG细胞的增殖和迁移

目的:探讨拓扑替康(TPT)对神经胶质瘤细胞中的缺氧诱导因子-1(HIF-1α)及其相关信号通路的调控作用。方法:应用Western Blot技术分别检测不同浓度TPT作用下的U87MG细胞内HIF-1α、去乙酰化酶sirtuin1(SIRT1)、上皮转化因子Twist和涉及Warburg效应的下游蛋白己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)、乳酸脱氢酶A(LDHA)及丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)的表达,使用同位素标记法,测定TPT对U87MG细胞葡萄糖摄取、乳酸堆积、脂肪酸β氧化的影响,并测定低浓度的TPT作用下拓扑异构酶Ⅰ活性的变化。最后通过台盼蓝染色实验和细胞划痕实验分别检测拓扑替康对U87MG细胞增殖和迁移能力的影响。结果:以TPT处理U87MG细胞后,SIRT1的表达量增加,HIF-1α表达量减少。当U87MG以TPT处理时,涉及Warburg效应的下游蛋白HK-Ⅱ、LDHA及PDK1的表达量均减少。而且,在U87MG细胞中TPT也减缓了细胞增殖和TWIST蛋白的表达量。结论:拓扑替康可能通过抑制HIF-1α及其下游蛋白HK-Ⅱ、LDHA、PDK1的表达从而减少肿瘤的能量及脂肪酸来源,影响癌细胞的Warburg效应进而抑制癌细胞的增殖。     

原发性肝癌的发生机制及中西医治疗研究进展

<正>原发性肝癌是我国乃至世界上最常见、最具有危害性的恶性肿瘤之一。世界卫生组织国际癌症研究署发布的2015年全球癌症报告显示,全球肝癌死亡人数约为75.1万,我国每年约有38.3万人死于肝癌,占全球肝癌死亡总数的51%~([1])。近年来肝癌发病率和死亡率呈上升趋势,严重威胁人类生命健康~([2])。目前,肝癌的5年生存率大约为14%~([3]);由于起病隐匿,肝癌被发现时多处于中晚期,并且大部分常合并肝硬化,同时伴有肝功能异常,此时手术治疗或化学栓塞     

AngiotensinⅡ通过氧化应激引起巨噬细胞AMPK/SIRT1能量信号紊乱

目的 探讨Angiotensin II诱导巨噬细胞氧化应激反应与 AMPK/SIRT1通路活化关系的机制。方法 RAW264.7细胞正常培养后给予不同浓度的Angiotensin II（0、0.5、1、3、10、20 μmol/L）处理24 h后,Western blot 检测AMPK,p-AMPK和SIRT1的表达水平变化,和用 DCFH 探针检测 ROS 水平的变化,试剂盒检测细胞上清液中 SOD 活性和 MDA 表达量;同时采用基因编辑技术将 Angiotensin II的受体 AT1R成功沉默后给予Angiotensin II刺激,检测对AMPK,p-AMPK 和SIRT1蛋白水平的影响以及使用ROS 的抑制剂来观察细胞AMPK和SIRT1的变化情况。结果 20 μmol/L的Angiotensin II的刺激能显著抑制蛋白AMPK的磷酸化（P<0.05）,抑制SIRT1 的表达;同时增加了细胞ROS的释放（P<0.05）。在检测SOD活性和MDA表达量时, 0.5~10 μmol/L的 Angiotensin II对细胞无明显改变（P>0.05）,20 μmol/L 的 Angiotensin II 明显抑制SOD 活性（P<0.05）,能显著增加 MDA 的产生。沉默了AT1R后,Angiotensin II不能抑制AMPK蛋白磷酸化以及对SIRT1的表达无明显下调作用;使用ROS 抑制剂后,Angiotensin II处理无法降低细胞磷酸化AMPK 和SIRT1的表达。结论 Angiotensin II通过诱导巨噬细胞发生氧化应激反应从而引起AMPK/SIRT1信号通路的紊乱。     

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对实验性2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养1个月加小剂量的链脲菌素(30 mg/kg)的方法建立实验性2型糖尿病大鼠模型,分为正常组、模型组、二甲双胍组、南苜蓿总皂苷高、低剂量组,连续静脉滴注4周,末次给药后测定血液流变学指标、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、肝糖原、计算胰岛素抵抗指数和敏感指数,并采用葡萄糖耐量和胰岛素耐量评价模型动物的胰岛素敏感性,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛素信号传导通路的相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷1.4 g/kg能显著全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度,RBC压积(P0.05或P0.01);降低空腹血糖、胰岛素和糖化血红蛋白水平(P0.01或P0.05);降低胰岛素抵抗指数(P0.01);升高胰岛素敏感指数和肝糖原含量(P0.01);改善胰岛素耐量及糖耐量异常;增加肝脏组织中IRS1、PI3K、PAKT的表达。结论:南苜蓿总皂苷对改善2型糖尿病大鼠血液流变性,降低血液的高黏状态,合成肝糖原,改善胰岛素抵抗,达到调节血糖的作用。     

基于 TOPSIS法评价黑种乌头与白种乌头抗神经病理性疼痛的作用

摘要:目的 通过 TOPSIS法(techniquefororderpreferencebysimilaritytoanidealsolution)综合评估黑种乌头(铁 棒锤,Aconitumpendulum Busch.,APB)和白种乌头[甘青乌头,Aconitumtanguticum(Maxim.)Stapf.,ATS]的体外抗 神经病理性疼痛作用及其作用机制。方法 体外培养小鼠小胶质细胞 BV2,用三磷酸腺苷(ATP)诱导体外神经疼痛模 型。设空白对照组(NC)、模型对照组(MC)及 APB和 ATS醇提物给药组,以细胞活力、NO 释放量、炎症因子IL-6、iNOSmRNA 表达和 P2X4、P2X7mRNA 表达等作为评价指标,探讨 APB和 ATS对各指标的影响。并通过 TOPSIS法将 各指标数据归一化,计算两者相对接近度,综合评价优势方案。结果 ATP可导致 BV2细胞活力下降并促进细胞上清 液中 NO 的释放,使iNOS和IL-6mRNA 水平显著升高,而 APB和 ATS提取物可显著抑制上述指标变化。而且,APB 和 ATS对 ATP诱导的 P2X7mRNA 水平上调具有更明显抑制作用。TOPSIS法结果提示,ATS的相对接近度比 APB 更靠近理想方案 NC组。结论 APB和 ATS均可显著抑制 ATP诱导的神经病理性疼痛,且通过 TOPSIS法综合分析 可得,ATS在抗神经病理性疼痛方面可能更具优势。     

新冠疫情下病理学教学改革初探

网络在线教学已经成为病理学传统教学的有益补充。新冠疫情的突然爆发,使得网络在线教学成为疫情下顺利完成病理学工作的唯一途径。本文以华中科技大学同济医学病理学系疫情期间的在线教学为对象,分析和讨论了在新冠疫情期间病理学全网络教学的优势和存在的不足。为未来建立和完善病理学线上和线下教学相结合的复合型方式提供借鉴和改进方案。     

维生素E对邻苯二甲酸二异辛酯致雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用

目的:探索维生素E(VE)对青春期邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)暴露致雄性大鼠生殖毒性的干预作用以及其机制。方法:将30只35日龄雄性SD大鼠(体重96~122 g)随机分为对照组(玉米油),低[10 mg/(kg·d)]、中[100 mg/(kg·d)]、高[500 mg/(kg·d)]DEHP组,以及VE干预组[(500 mg/(kg·d)DEHP+100 mg/(kg·d)VE],各组给予相应食物30 d。在染毒干预结束后,分别检测大鼠睾丸组织氧化应激指标、附睾尾部精子参数、血清生殖激素水平、凋亡相关靶基因及蛋白的表达。结果:与对照组比较,中、高DEHP组血清中FSH、LH和T水平明显降低,精子运动参数VAP、VCL明显降低,SOD和GSH-Px活力显著降低,Bak、Bax基因表达和Bax/Bcl-2基因表达比值显著升高,细胞色素C mRNA表达及细胞色素C和Caspase-3蛋白表达均显著上调(P均0.05);高DEHP组MDA含量[(3.32±0.87)nmol/mg pro vs(2.13±0.49)nmol/mg pro]明显升高,精子运动参数VAP、VCL、VSL、STR、LIN、WOR均明显降低(P0.05)。与高DEHP组比较,VE干预组的LH和T水平明显升高;VAP、VSL、VCL、STR和WOB明显升高;SOD和GSH-Px活力显著升高;MDA含量明显降低;Bak、Bax基因表达和Bax/Bcl-2基因表达比值显著降低;细胞色素C、Caspase-3 mRNA表达及蛋白表达均显著下调(P均0.05)。结论:青春期DEHP暴露可抑制生殖激素分泌或释放,导致雄性大鼠睾丸组织氧化损伤,激活细胞线粒体凋亡通路,也可导致附睾精子质量下降;而VE对DEHP所诱导的雄性生殖毒性具有一定的拮抗作用。