液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

麻黄素和急性扩容对顺式阿曲库铵起效时间及循环功能的影响

目的探讨麻黄素急性扩容对顺式阿曲库铵起效时间以及循环功能影响。方法择期上腹部手术全麻患者40例,患者随机分为4组,对照组（C）,麻黄素组（E）,麻黄素＋容量治疗组（EV）,单纯容量治疗组（V）,每组各10例。各组患者均在桡动脉和中心静脉穿刺,并在外周静脉以TCI（target controlled infusion）靶浓度为3μg/ml丙泊酚连续输注10min后测定平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）、心排血量（cardiac output,CO）、心率（heart rate,HR）和周围血管阻力（systemic vascular resistance,SVR）,并作为基础值,EV组和V组在快速扩容完成后稳定10min,并分别注射麻黄素70μg／kg和生理盐水5ml,c组和E组分别注射生理盐水5ml和麻黄素70μg/kg,各组在其后1、2、3min连续监测循环指标。各组均在给药1min后给予芬太尼2μg/kg,顺式阿曲库胺0．1mg／kg（2ED95）,药物均在30S内注射完毕。结果E组和c组的SVV（stroke volume varication）显著低于EV组和V组的（P〈0．05）;顺式阿曲库铵的起效时间,EV组的显著低于其他组的（P〈0．05）。结论快速扩容后复合使用麻黄素能显著缩短顺式阿曲库铵的起效时间。     

人附睾蛋白4通过上调MMP9及VEGF降低顺铂对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨人附睾蛋白4(HE4)对顺铂作用后卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及潜在机制。方法 构建HE4质粒,脂质体Lipofectamine 2000转染人卵巢癌细胞系HO8910PM,通过Western blot验证稳定转染细胞株构建成功。通过CCK8实验检测HE4过表达对顺铂作用后细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测HE4过表达对顺铂作用后细胞迁移的影响;同时通过Western blot实验检测促迁移相关蛋白基质金属蛋白酶9(MMP9)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 过表达HE4人卵巢癌细胞系HO8910PM构建成功;相比于转染空载体的HO8910PM细胞,HE4可明显降低顺铂对细胞增殖的抑制作用,促进HO8910细胞的增殖;同时,HE4过表达细胞中MMP9及VEGF蛋白表达水平也相应提高。结论 HE4可能通过上调MMP9及VEGF表达降低顺铂对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。     

胸腔积液与血清癌胚抗原比值对胸腔积液性质的诊断效果

目的探讨胸腔积液与血清癌胚抗原比值对胸腔积液性质的诊断效果。方法选取2018年1月至2019年10月间上海市宝山区罗店医院收治的86例胸腔积液患者,按照胸腔积液良恶性质将患者分为恶性组34例和良性组52例。使用电化学发光免疫分析法检测患者的胸腔积液、血清癌胚抗原水平,计算两者比值,比较两组患者及恶性组不同病理类型的上述指标水平的高低以及阳性率差异。结果恶性组患者胸腔积液癌胚抗原水平为(28.26±5.92)ng/ml,血清癌胚抗原水平为(14.29±3.61)ng/ml,比值为(2.16±0.74),良性组患者胸腔积液癌胚抗原水平为(1.03±0.44)ng/ml,血清癌胚抗原水平为(2.21±0.67)ng/ml,比值为(0.53±0.21),恶性组上述指标均高于良性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。恶性组患者胸腔积液癌胚抗原阳性率为91.2%,血清癌胚抗原阳性率为85.3%,胸腔积液与血清癌胚抗原比值阳性率为91.2%,良性组的胸腔积液癌胚抗原阳性率为7.7%,血清癌胚抗原阳性率为11.5%,胸腔积液与血清癌胚抗原比值阳性率为1.9%,恶性组上述指标均高于良性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论联合检测胸腔积液和血清癌胚抗原水平及两者比值,有助于鉴别胸腔积液良恶性,且敏感性高,具有重要的临床价值。     

参肤外洗方联合克林霉素乳膏治疗细菌性阴道炎的临床疗效分析

目的:评价参肤外洗方联合克林霉素磷酸酯乳膏治疗细菌性阴道炎的临床疗效及其安全性。方法:共纳入符合观察条件的150例细菌性阴道炎患者,随机分为3组,每组各50例。对照组给予克林霉素磷酸酯阴道用乳膏,治糜康栓组在对照组基础上联合治糜康栓,参肤外洗方组在对照组基础上联合参肤外洗方,疗程均为7 d。观察各组患者的临床疗效、局部不良反应,并追踪调查远期复发率。结果:对照组、治糜康栓组、参肤外洗方组的总有效率分别为74.00%、84.00%、96.00%,参肤外洗方组总有效率明显高于对照组(P0.05);3组的不良反应发生率分别为22.00%、16.00%、6.00%,参肤外洗方组的不良反应明显少于对照组和治糜康栓组(P0.05)。在完成1～3个月的随访患者中,对照组共复发12例、治糜康栓组复发10例、参肤外洗方组复发4例,参肤外洗方组的复发率显著低于对照组和治糜康栓组(P0.05)。结论:参肤外洗方联合克林霉素磷酸酯乳膏治疗细菌性阴道炎,可明显提高临床疗效、降低复发率,且安全性好。     

梗阻性黄疸对患者体内右美托咪定药动学的影响

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆右美托咪定的浓度,评价梗阻性黄疸对患者体内右美托咪定药动学参数的影响。方法样品经液-液萃取后测定,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18,流动相为甲醇?0.1%甲酸水溶液,流速为0.2 ml/min,柱温为35℃,质谱检测采用动态多反应离子检测模式。结果人血浆中右美托咪定在0.01~10.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内和日间精密度均小于15.00%,提取回收率为85.5%~93.1%,基质效应为91.2%~95.6%,样品在分析期间稳定性良好。与对照组相比,梗阻性黄疸患者体内右美托咪定药动学参数cmax、AUC(0?t)、AUC(0?∞)和Vz分别增加63.4%、78.9%、66.4%、82.5%;CLz降低42.1%。结论该方法结果准确,灵敏度高,重现性好,适用于检测人血浆右美托咪定的浓度;梗阻性黄疸患者体内右美托咪定消除减慢。     

粘弹性物补充疗法的研究进展

目的对粘弹性物补充疗法进行全面客观的评价,以提供对其临床疗效的实际判断依据并展望发展趋势与方向。方法查阅国内外文献,重点是国际相关咨询机构和保险公司对粘弹性物补充疗法所做的评估以及临床所进行的循证医学研究。结果粘弹性物补充疗法目前已逐步被接受。尽管临床上对该疗法采用的玻璃酸钠相对分子质量大小、注射剂量及适应证等方面的意见尚未达成共识,但通过关节腔内注射玻璃酸钠治疗骨关节病的方法已获得一致认可。结论 粘弹性物补充疗法是临床治疗骨关节病方法之一。玻璃酸钠治疗膝关节炎和肩周炎疗效已证实,髋关节注射也逐步获得认可,其他小关节注射正逐步展开。     

操作困难的腹腔镜胆囊切除术体会

目的 探讨操作困难的腹腔镜胆囊切除术（LC）处理。方法 对本院2000年以来进行操作困难的LC28例进行回顾性分析。结果 Calot三角区严重粘连20例,胆囊管结石嵌顿并巨大胆囊6例,胆囊极度萎缩1例,胆囊管萎缩闭塞1例,26例成功完成LC,手术时间45-120min,术中放置肝下引流管20例,中转剖腹2例。结论 掌握腹腔镜下处理复杂胆囊的手术原则,困难的LC同样能安全完成。     

环磷腺苷葡胺对老年心力衰竭患者心功能及B型利钠肽的影响

目的探讨环磷腺苷葡胺(MAC)对老年心力衰竭患者心功能及B型利钠肽(BNP)的影响。方法将本院2010年6月—2011年8月收治的48例老年心力衰竭患者,随机分为观察组和对照组,每组24例。2组均予常规治疗,观察组在对照组基础上给予MAC。比较2组患者的临床疗效,治疗前后左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、心脏指数(CI)和BNP水平。结果观察组治疗后总有效率(91.7%)显著高于对照组(66.7%);治疗后,除对照组CI水平外,2组心功能各指标均较治疗前显著升高,而BNP水平显著下降,且观察组改善幅度大于对照组。结论 MAC用于老年心力衰竭患者,能有效提高治疗有效率,改善心功能,降低血BNP水平,值得在临床上推广应用。     

口服固体制剂产品生产过程中防止交叉污染及混淆的探讨

本文通过对厂房设施、设备、管理制度、人员培训等方面进行研究探讨,以防止口服固体制剂产品生产过程中的交叉污染以及混淆。