腹腔镜Nissen胃底折叠术治疗胃食管反流病110例报告

目的探讨胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease,GERD）的临床表现、腹腔镜Nissen胃底折叠术的治疗效果。方法回顾性分析2007年1月～2008年12月共110例行腹腔镜Nissen胃底折叠术的GERD临床资料。18例以反酸、烧心、嗳气、反食、胸痛等食管内症状为主,92例表现为咳嗽、咳痰、喘息等呼吸道症状为主（6例无反酸、烧心等消化道症状）。结果中转开腹1例,余均成功实施腹腔镜Nissen胃底折叠术。手术时间30～245min,平均67.8min;术中出血量5～450ml,平均28.8ml;术后住院时间2～8d,平均4.1d。术后102例获得6～24个月随访,平均13个月,8例失访。其中66例仅接受电话随访。102例按照症状频次、程度问卷表对其症状进行评分,参考反流性疾病问卷（reflux diagnostic questionnaire,RDQ）评分标准症状评分,术后6个月反酸、烧心、胸痛、咳嗽、喘息、憋气、咽异物感、喉部发紧、声音嘶哑的评分均明显下降（P〈0.05）。87例手术有效,15例手术无效。术后62例（60.8%）出现进食困难,经饮食训练2～6周后60例消失,2例症状严重,经胃镜扩张后缓解。1例术后2个月食管裂孔疝复发,再次腹腔镜手术修补。36例术后3个月选择性地进行了胃镜、24h食管pH监测和食管压力监测复查。28例食管炎患者复查胃镜,25例恢复正常,1例从Ⅲ级转为Ⅰ级,1例从Ⅱ级转为Ⅰ级,1例无变化;31例复查24h食管pH值监测,DeMeester评分恢复正常30例,1例从中度降至轻度;18例复查食管测压,下食管括约肌（LES）静息压从术前的1.2～34.1（中位数14.3）mmHg升至14.3～33.0（中位数20.0）mmHg（Z=3.72,P=0.000）。结论腹腔镜Nissen胃底折叠术是治疗GERD的有效方法,具有微创、损伤小、病人恢复快和操作安全的优点,对诊断明确的以食管外症状为主要表现的GERD特别值得提倡。     

以CRSIPR/Cas9 技术删除CTLA-4 后CTL抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果

目的：探讨使用CRSIPR/Cas9 技术删除CTL的免疫检查点CTLA-4 后CTL的抗裸鼠结肠癌移植瘤的效果及其作用机制。方法：针对CTLA-4 设计特异性小向导RNA(small guide RNA，sgRNA)并构建sgRNA/Cas9 质粒，使用慢病毒载体转染质粒至CTL获得删除CTLA-4 的CTL（CTLA-4 KOCTL），并验证质粒的转染效率和CTLA-4 的删除效率。BALB/c裸鼠随机分为2 组进行实验，预防性注射CTLA-4 KO CTL（实验组）及CTL（对照组），3 d 后接种结肠癌细胞株LS174-T，观察成瘤率及成瘤时间。建立结肠癌移植瘤裸鼠模型，成瘤后裸鼠随机分为2 组，分别给予CTLA-4 KO CTL（实验组）及CTL（对照组）进行细胞治疗，观察移植瘤的体积、裸鼠的生存时间，并检测移植瘤裸鼠血清中TNF-α 及IFN-γ 分泌水平。结果：设计sgRNA并成功构建以慢病毒为载体的CRSIPR/Cas9 系统，使用构建好的CRSIPR/Cas9 系统转染CTL细胞，转染效率最高可达（28.80±0.62)%，转染后以流式细胞术检测CTLA-4 的删除效率，CTLA-4 KO CTL 组的CTLA-4 表达较CTL 组显著降低[ （0.91±0.25）% vs（42.70±2.72）%，P<0.01]。预防实验中，实验组结肠癌移植瘤发生率明显低于对照组（33.33% vs 100.00%，P<0.01）。治疗实验中，实验组肿瘤体积较对照组显著减少[ （503.0±23.9）vs（911.2±51.4）mm3，P<0.05]，实验组裸鼠相较于对照组生存时间明显延长（中位生存期：78 vs 42 d，P<0.05），实验组裸鼠血清TNF-α（[ 268.93±17.04）vs（148.26±20.07）pg/ml，P<0.05]及IFN-γ（[ 315.38±18.67）vs (202.92±29.32) pg/ml，P<0.05]的分泌水平较对照组明显增高。结论：以CRSIPR/Cas9 技术成功删除CTL中免疫检查点CTLA-4 后可以显著抑制裸鼠结肠癌移植瘤的成瘤率、增强CTL对荷结肠癌裸鼠的抗肿瘤作用，并明显增高荷瘤鼠血清中TNF-α 和IFN-γ 水平。     

胃食管反流源性"哮喘"诱导痰中细胞及细胞因子分析

目的 观察胃食管反流源性"哮喘"的气道炎症特点.方法 筛选34例胃食管反流(GERD)伴"类哮喘"症状患者,并以12例哮喘无GERD患者和11例健康正常人为对照组,结合诱导痰方法,刘氏染色分析痰液中细胞分类,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定痰上清液中的IL-5,6和8的浓度.结果 GERDa组与哮喘组比较,中性粒细胞百分率明显增高(P＜0.05),嗜酸性细胞百分率减低(P＜0.05);GERD组及哮喘组IL-5(52.86±20.25,55.69±17.72,70.56±12.63),IL-6水平(22.14±9.18,18.62±9.94,15.63±13.61)较健康正常组均升高(P＜0.05),其中哮喘组IL-5水平明显高于GERD a组(P＜0.05).相较于正常组(143.26±32.71),GERD组IL-8水平(308.33±178.60,234.28±130.98)升高(P＜0.05),而哮喘组(179.78±51.08)与正常组比较,IL-8水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GERD源性"哮喘"气道炎症是以中性粒细胞浸润和IL-8升高为主要特点,不同于哮喘以嗜酸性细胞浸润、IL-5升高为主的气道炎症状态,当合并哮喘时,GERD可通过上述细胞因子的作用促进哮喘既有的气道炎症,进而加重其病程.     

胃食管反流病1014例住院患者的诊治分析

目的探讨胃食管反流病(GERD)流行病学特点、临床症状及诊治方法。方法收集解放军第二炮兵总医院胃食管反流病中心从2006年10月至2009年11月入院诊治的1014例GERD患者临床资料,对患者性别、年龄、地域分布、临床症状及诊治进行分析。结果本组1014例GERD患者中,临床典型症状248例(24.5%),主要表现为反酸、反食、烧心等症状;非典型性症状766例(75.5%),以喘息、憋气最多,其次分别为咳嗽、咳痰、咽部异物感、咽痛、胸痛等。入院前741例患者(73.1%)被误诊,分别诊断为哮喘、支气管炎、慢性咽炎、冠心病等,确诊GERD后472例患者采用Stretta射频治疗,378例患者采用腹腔镜Nissen胃底折叠术治疗,164例患者采用药物治疗。结论胃食管反流病的表现复杂多样,涉及多个系统、器官,加强该病的全面认识,做到早期诊断及治疗,避免误诊误治,从而改善预后,提高患者生活质量。