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2.
目的 探究DNA聚合酶η(POLH)对过氧化氢(H2O2)诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制。方法 以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H2O2处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H2O2最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H2O2组、H2O2+HA组和H2O2+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达。结果 RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜(1.00±0.22)相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降(0.38±0.62)(P<0.000 1)。RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200 μmol·L-1 H2O2处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示, 200 μmol·L-1 H2O2处理后细胞的凋亡明显增加。RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高(P<0.000 1)。免疫荧光染色结果显示,与H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降。免疫印迹实验检测结果显示,与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞促凋亡蛋白BAX表达量明显下降,而抑凋亡蛋白BCL-2表达量明显升高(均为P<0.01);与H2O2组和H2O2+HA组相比,H2O2+OV-POLH组细胞Keap1蛋白水平明显下降,而转录调控蛋白Nrf2表达明显升高(均为P<0.01)。结论 过表达POLH可通过增强DNA损伤修复功能抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞凋亡,其抑制氧化应激机制可能与Nrf2-Keap1-ARE通路有关。 相似文献
3.
目的 分析2005—2020年盐城市丙肝病例报告资料,总结丙肝流行特征,为盐城市丙肝防制工作提供参考依据。方法 收集各年度丙肝报告病例和人口学资料,采用Excel 2016软件汇总并作描述性统计分析。采用Joinpoint regression program(JRP)4.9.0.0软件对丙肝年发病率进行趋势检验,采用SPSS 25.0软件和ArcGIS 10.6软件对病例数据进行统计分析。结果 2005—2020年盐城市累计报告丙肝病例2 555例,年报告发病率整体呈平缓增长趋势,最低为2005年的0.42/10万,最高为2019年的5.84/10万。年度变化百分比(annual percent change,APC)为14.5% (95% CI: 11.5%~17.6%),P<0.01。除2019年外,其余各年丙肝疫情呈散发状态,无明显季节特征。报告病例数位居前三位的地区是亭湖区、滨海县以及东台市,分别占比19.77% (505/2 555)、14.01%(358/2 555)以及12.92%(330/2 555)。男女报告病例数比为1.33[DK]∶1,发病率最高的年龄组为70~79岁年龄组(56.94/10万)。农民为报告病例数最多的人群,占比59.33%(1 516/2 555)。确诊病例2 204例,临床诊断病例332例。结论 盐城市丙肝疫情呈上升趋势。全市应进一步扩大丙型肝炎病毒检测,加强丙肝防治宣传教育和完善社会医疗保障政策来提高丙肝治疗的可及性和可负担性,同时应进一步加强对于丙肝疫情的监测以及规范丙肝的诊疗,并对重点地区、重点人群开展精准的综合干预工作。 相似文献
4.
目的探讨不同金属蛋白酶(MMP)和解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)的mRNA表达与椎间盘退行性变性(简称退变)程度的相关性。方法选取行手术治疗的椎间盘退变患者160例,依据磁共振成像(MRI)检查结果,采用Pfirrmann分级将所有患者分为Ⅰ级组(30例)、Ⅱ级组(32例)、Ⅲ级组(35例)、Ⅳ级组(33例)和Ⅴ级组(30例)。检测所有患者髓核组织中MMP-1 mRNA、MMP-3 mRNA、MMP-9 mRNA、MMP-13 mRNA、ADAMTS-1 mRNA、ADAMTS-4 mRNA、ADAMTS-5 mRNA、白细胞介素(IL)-1αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA和IL-8 mRNA的相对表达量。采用Spearman相关分析评估各项指标与Pfirrmann分级的相关性。采用Pearson相关分析评估各项指标之间的相关性。结果Ⅳ级组和Ⅴ级组MMP-3 mRNA、MMP-9 mRNA、IL-1αmRNA和IL-1βmRNA相对表达量显著高于Ⅰ级组、Ⅱ级组和Ⅲ级组(P<0.05),且Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组依次升高(P<0.05)。Ⅲ级组、Ⅳ级组和Ⅴ级组ADAMTS-4 mRNA和ADAMTS-5 mRNA相对表达量显著高于Ⅰ级组和Ⅱ级组(P<0.05),且Ⅱ级组显著高于Ⅰ级组(P<0.05)。其他各项指标各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析结果显示,MMP-3 mRNA、MMP-9 mRNA、ADAMTS-4 mRNA、ADAMTS-5 mRNA、IL-1αmRNA及IL-1βmRNA相对表达量与Pfirrmann分级均呈正相关(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,MMP-3 mRNA、MMP-9 mRNA、ADAMTS-4 mRNA、ADAMTS-5 mRNA相对表达量与IL-1αmRNA、IL-1βmRNA相对表达量均呈正相关(P<0.05)。结论MMP-3、MMP-9、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1α和IL-1β与椎间盘退变有关,并可反映病情的严重程度。 相似文献
5.
目的:探讨紫杉醇药物涂层球囊对症状性股腘动脉硬化闭塞症的疗效.方法:选取62例症状性下肢动脉硬化闭塞症患者为研究对象,依据治疗方式不同分为观察组与对照组,每组各31例.观察组患者接受紫杉醇药物涂层球囊扩张成形治疗,对照组接受普通外周动脉金属支架治疗.比较两组患者手术前后不同时间疼痛评分(VAS评分)与间歇性跛行距离、Rutherford分级、最小管腔直径(MLD)及晚期管腔丢失(LLL)、患肢踝肱指数(ABI)、一期通畅率、术后12个月再狭窄率、主要不良事件发生率.结果:两组患者术后1周、术后1个月,VAS评分、与间歇性跛行距离、术后12个月Rutherford分级、术后6个月和术后12个月MLD与LLL,术后1周、术后3个月、术后6个月ABI均较术前改善(P<0.05),但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后12个月ABI高于对照组(P<0.05);两组术后12个月一期通畅率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后12个月再狭窄率低于对照组(P<0.05);两组随访过程中未出现死亡病例,术后无新发坏疽导致的大截肢,两组患者死亡率、截肢率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:紫杉醇药物涂层球囊扩张成形术对症状性股腘动脉硬化闭塞症的近期疗效与普通外周动脉金属支架相当,但术后1年ABI和再狭窄率优于金属支架. 相似文献
6.
目的 探讨克罗恩病患者血清总 25羟基维生素 D、细胞因子白介素 6(IL-6)、白介素 8(IL-8)和肿瘤坏死因子α( TNF-α)在克罗恩病不同时期的表达水平以及其与疾病活动指数( CDAI)的相关性。方法 选取 2018年 1月~ 2020年 12月在北京大学深圳医院就诊的克罗恩病患者共 100例纳入研究。收集患者的空腹静脉血,检测总 25羟基维生素 D,IL-6,IL-8和 TNF-α水平;采用 CDAI评估患者疾病活动情况,并根据 CDAI评分将患者分为四组,缓解期 21例,轻度活动期 32例,中度活动期 29例和重度活动期 18例。比较 CDAI评分不同分期患者的血清总 25-羟基维生素 D,IL-6,IL-8和 TNF-α的表达水平。并进一步分析比较患者 CDAI与血清总 25-羟基维生素 D水平及细胞因子 IL-6,IL-8及 TNF-α表达水平之间的相关性。结果 四组患者血清总 25-羟基维生素 D及细胞因子 IL-6,IL-8和 TNF-α的差异均存在统计学意义(F=34.281~ 128.53,均 P<0.05)。缓解期患者血清总 25-羟基维生素 D(23.49±3.46μg/ 相似文献
7.
目的优选超声靶向微泡破坏(UTMD)技术介导载基因靶向纳米泡(T-NB)爆破的条件。方法采用薄膜水化法制备纳米泡,以生物素-亲和素-生物素连接方法制备pAd-AAV-9/miRNA-1 T-NB,观察其基本理化性质。基于机械指数(0.6、0.9、1.2、1.5)、T-NB溶液浓度(10^(5)/ml、10^(6)/ml、10^(7)/ml、10^(8)/ml)及辐照时间(30、45、60、120 s)设计三因素四水平正交实验,评价不同超声辐照参数对T-NB溶液信号强度的影响。结果pAd-AAV-9/miRNA-1 T-NB溶液为乳白色混悬液,浓度(0.74±0.10)×10^(8)/ml;T-NB为大小相近的球形,平均粒径(443.97±12.84)nm,平均电位(-7.33±0.09)mV。在不同辐照条件下,T-NB溶液的信号强度不同。机械指数、T-NB浓度及辐照时间均可显著影响信号强度(P均<0.05)。影响T-NB爆破的因素依次为机械指数、T-NB溶液浓度及辐照时间,机械指数0.6、T-NB浓度10^(6)/ml、辐照时间120 s为其最优组合。结论机械指数0.6、T-NB溶液浓度10^(6)/ml、辐照时间120 s为UTMD技术载基因T-NB的最优爆破条件。 相似文献
8.
目的 探索E3泛素连接酶S期激酶相关蛋白2(SKP2)介导的碱基切除修复蛋白8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG1)在年龄相关性白内障(ARC)发生过程中的泛素化降解机制。方法 采用免疫沉淀实验检测OGG1的泛素化修饰及其与SKP2的结合能力。采用中波紫外线(UVB)照射人晶状体上皮细胞株SRA01/04构建细胞氧化损伤模型。蛋白免疫印迹实验检测细胞氧化损伤模型和过表达模型细胞中SKP2的蛋白表达。通过转染SKP2质粒,增加SKP2的表达并观察细胞中OGG1蛋白的表达变化。结果 OGG1蛋白存在泛素化修饰。UbiBrowser软件预测能与OGG1结合的潜在E3泛素连接酶,并通过免疫沉淀实验证明SKP2与OGG1之间存在相互作用。在氧化损伤环境下,SRA01/04细胞中SKP2蛋白表达出现先下降后逐渐升高的趋势,其中UVB照射10 min时SKP2表达下降最为显著。对照组、转染空载质粒组和转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中SKP2蛋白的相对表达量分别为1.040±0.007、0.920±0.008和1.330±0.020,与转染空载质粒组相比,转染SKP2过表达质粒组细胞中SKP2蛋白的表达显著上调(P<0.05)。空白对照组、UVB组、UVB+转染空载质粒组和UVB+转染SKP2过表达质粒组细胞中OGG1蛋白的相对表达量分别为1.05±0.01、5.05±0.16、5.20±0.07和3.83±0.10;与UVB+转染空载质粒组相比,UVB+转染SKP2过表达质粒组SRA01/04细胞中OGG1蛋白相对表达水平明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 E3泛素连接酶SKP2能够促进OGG1发生泛素化降解,导致晶状体上皮细胞内部损伤性DNA的累积,从而导致ARC的发生发展。 相似文献
9.
目的:对洋金花正丁醇部位化学成分进行分离鉴定研究。方法:采用硅胶柱色谱,ODS柱色谱,硅胶薄层色谱,高效液相色谱法(HPLC)进行分离纯化,结合1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱学数据进行结构鉴定。结果:从洋金花药材粗提液中提取到了11个化合物。分别鉴定为:生物碱类:(S)-(-)-2-phenylpropionitrile(1)、merobatzelladine A(2)、木兰花碱(3)、crotonine(4)、cyclo(Phe-Leu)(5)、pyrrolezanthine(6)、(E,E)-N,N-dityramin-4,4''-dihydroxy-3,5''-dimethoxy-β,3''-bicinnamamide(7)、N1,N5,N10 tri-p-coumaroylspermidine(8)、7-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-me-thoxyphenyl)-N2,N3-bis(4-hydroxyphenethyl)-6-methoxy-1,2-dihydronaphthalene-2,3-dicarboxa-mide(9)。其他类:p-hydroxyb-enzoyl p-coumaric acid anhydride(10)、methyl(Z)-9-octadeceno-ate(11)。结论:从茄科中首次分离得到11种化合物。 相似文献
10.