乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中稀释液的筛选

目的 探讨安全试验之乳鼠传代返祖试验中稀释液对乙型脑炎减毒活疫苗的影响.方法 随机选取14批乙型脑炎减毒活疫苗,分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、最少细胞培养物质培养液(MEM)、0.5%水解乳蛋白液、199培养液4种稀释液进行乳鼠传代返祖试验.结果 使用PBS组LD50<1.0 Log LD50/0.03mL,小鼠没有死亡梯度;0.5%水解乳蛋白液组和MEM组出现LD50>3.0 Log LD50/0.03 mL,病毒毒力增强;使用199培养液组乙型脑炎病毒活疫苗毒力稳定,重复性好,无返祖现象.结论 199培养液适宜作为乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠传代返祖试验中所用的稀释液.     

中药熏蒸联合温针灸治疗类风湿性关节炎29例

目的:观察中药熏蒸联合温针灸治疗类风湿性关节炎的临床疗效。方法:将61例类风湿性关节炎患者随机分为观察组29例、对照组32例,对照组给予中药熏蒸治疗,观察组给予中药熏蒸联合针灸治疗,2组均连续治疗20天。观察2组临床疗效、中医证候积分和生活质量评分的变化情况。结果:总有效率观察组为93.1%,对照组为87.7%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。关节疼痛、肿胀、压痛、僵硬等证候积分治疗前后2组组内比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后组间比较,差异也有统计学意义(P0.05)。生理机能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康等积分治疗前后2组组内比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后组间比较,差异也有统计学意义(P0.05)。结论:中药熏蒸联合温针灸治疗类风湿性关节炎疗效显著,且可改善临床症状,提高患者的生活质量。     

兰州羔羊轮状病毒株VP4基因稳定性及基因结构分析

目的了解兰州羔羊轮状病毒（LLR）株VP4基因遗传变异特点及与人源性轮状病毒基因结构上的相关性,为疫苗的质量控制和对人体的免疫原性提供理论依据。方法严格按疫苗生产过程将LLR疫苗株毒种LLR38代在新生牛肾原代细胞传至第49代,取LLR38、LLR43、LLR44、LLR49代进行研究。通过逆转录-聚合酶链式反应获得了LLR株传代病毒VP4全基因的cDNA片段,构建成重组质粒,经酶切筛选,对克隆的VP4基因进行序列测定。结果LLR株VP4基因全长2362bp,编码776个氨基酸。各代次病毒的核苷酸和氨基酸遗传稳定,核苷酸同源性在99．7％-100．0％,氨基酸同源性在99．0％-100．0％。不同P基因型来源轮状病毒在亲缘关系上没有明显的区分。氨基酸序列比对分析显示,LLR株与13株人源病毒在基因结构上密切相关。结论LLR疫苗株vP4基因具有很好的遗传稳定性,LLR株毒种及生产的疫苗是安全有效的,能够预防轮状病毒感染。     

风疹病毒松叶株E1基因遗传变异研究

目的 研究风疹病毒(rubella vires,RV)疫苗松叶株(Matsuba)El基因遗传与变异特点,在基因水平评估Matsuba株生产的疫苗对流行株的保护效果. 方法 将风疹病毒松叶株毒种RV14在原代兔肾细胞连续传至第23代,取RV14、RV16、RV17、RV18、RV23代进行研究分析.利用RT-PCR方法扩增松叶株不同代次的E1蛋白基因,将E1基因与pGEM-T载体连接,获得风疹病毒E1基因的克隆并测序,对各代次病毒的E1基因与风疹病毒疫苗Matanba株(GenBank登录号:D50673)及其他参考株的E1基因序列进行比对分析. 结果 风疹病毒Matsuba株传至23代时仍有很高的同源性,RV14、RV16、RV18代次病毒与D50673的核苷酸和氨基酸同源性为100.O%,RVl7、RV23代次病毒与D50673的核苷酸序列同源性分别为99.9%、99.7%,氨基酸序列同源性分别为99.8%、99.2%.各代次病毒与糖基化、抗原性相关的氨基酸位点未发生变异,高度保守;风疹病毒Matsuba株与其他参考株E1基因序列比较结果表明:Matsuba株为1a基因型,中国风疹病毒流行基因型为1E、1F、2A和2B,以1E基因型为主;Matsuba株与各基因型参考株同源性很高,核苷酸和氨基酸同源性分别为92.1%～99.6%和98.1%～99.8%. 结论 风疹病毒Matsuba疫苗株的遗传学特性稳定,从分子水平证明Matsuba疫苗株及其生产的疫苗具有安全性.尽管中国流行不同基因型风疹病毒,由于Matsuba株与各基因型参考株同源性很高,且风疹病毒毒株间抗原表位高度保守,因此Matsuba疫苗株所生产的疫苗可以有效保护不同基因型别的风疹病毒的感染.     

麻疹病毒S191疫苗株H基因序列遗传变异分析

目的 研究麻疹病毒(MeV)疫苗株Shanghai191(S191)毒种和传代病毒血凝素蛋白(H)基因稳定性及其遗传与变异特点;对该序列一些重要位点的氨基酸进行比较,推测其功能结构及生物学活性变化;探讨S191疫苗株的保护效果.方法 利用逆转录-聚合酶链反应方法扩增S191减毒株MeV23、MeV26、MeV27、MeV29、MeV32和MeV37代H基因.测序后与GenBank上U03663的序列进行比对分析.结果 S191传代病毒与U03663序列之间核苷酸同源性达99.9%以上,氨基酸同源性为100%;S191与中国流行株的氨基酸序列同源性为96.6%～96.8%;S191与其他流行株之间氨基酸同源性达96.4%～98.9%.结论 S191及生产的疫苗具有弱毒稳定性和安全性,并具有好的保护作用.     

生物制品中支原体快速检测方法的建立

目的建立生物制品中污染原体的快速、准确的检测方法 ;方法通过比较目前国内支原体测方案 ,利用正交试验设计选择最优化培养和检测条件 ;结果更新了支原体培养基中某些成份 ,确定了各组份的含量 ,检测的灵敏度比现行规程方法有所提高。结论新确立的牛心消化液液体培养基方法能够快速检测绝大多数的支原体 ,改午后培养基灵敏度高 ,检测周期短 ,可以用于生物制品中支原体的快速检测。     

口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度测定的影响因素

[目的]对影响轮状病毒活疫苗病毒滴度测定的因素进行研究。[方法]用细胞微量病变滴定法（CCID50）结合酶联免疫吸附试验（ELISA）检测口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度。[结果]在疫苗滴度检测中处理疫苗所用的胰酶量，胰酶37℃处理疫苗时闻，及感染细胞培养收冻时闻均对疫苗的感染滴度产生影响。病毒滴度均随着胰酶量、温度和培养时间的增加均有先增高后降低的现象（P〈0．001），用15～20μg／ml胰酶、37℃处理疫苗50～60min，4～5d收冻为较佳试验条件。[结论]胰酶量、温度和培养时闻对口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度的测定结果均有不同程度的影响，在检测中要选择合适的条件，使检测结果更具有真实性，实际工作中采用20μg/ml胰酶、37℃处理疫苗50min、收冻时间为5d的组合条件进行试验。     

口服轮状病毒活疫苗稳定性观察

目的：了解口服轮状病毒活疫苗的稳定性。方法：将检定合格的6批口服轮状病毒活疫苗2～8℃放置6、9、12、15及37℃放置7、14、21、28d，对其稳定性进行系列试验。结果：疫苗在2～8℃放置时外观及滴度具有良好的稳定性，疫苗滴度改变差异无统计学意义（F=1．001，P〉O．05），37℃加速稳定性实验结果较差，滴度均达不到规程要求。结论：该疫苗运输及使用过程中应注意冷链要求。     

中西医结合治疗脑梗死疗效观察

目的:观察中西医结合治疗脑梗死的疗效。方法:将来我院进行脑梗死治疗的80例患者随机分为观察组和对照组,分别采用中西医结合治疗和单纯西药治疗,观察和记录两组患者在疗效和神经功能缺损改善上的差别。结果:采用中西医结合治疗的观察组的疗效和神经功能缺损改善情况明显优于单纯采用西药治疗的对照组。结论:中西医结合治疗脑梗死疗效显著,并能有效改善患者神经功能缺损,值得临床推广应用。