逆转录病毒载体介导shRNA对人胚胎肾细胞中p53基因的沉默作用

目的：检测逆转录病毒载体介导的小发夹环RNA（small hairpin RNA,shRNA）对人胚胎肾细胞（HEK293）中p53基因的干扰作用。方法：将人H₁启动子由XholⅠ和EcoRⅠ酶切位点插入CMV启动子上游,人CD₄基因替代匀霉素抗性基因,作为检测标志。针对人野生型p53基因设计的shRNA被连接在H₁启动子的下游,构建含有shRNA的逆转录病毒载体LTRH₁-p53,即RNAi表达载体;利用流式细胞术检测逆转录病毒感染HEK293细胞72 h后细胞内P53蛋白水平的变化。结果：成功构建LTRH₁-p53载体,该载体感染HEK293细胞后72 h,与感染空病毒载体LTRH₁组相比,P53蛋白表达降至空病毒载体LTRH₁组的69％（P<0.01）。结论：LTRH₁-p53表达载体成功使p53基因沉默,shRNA表达载体的使用为基因功能研究提供有力工具。     

乳腺肿块的高频彩超诊断与病理基础分析

目的探讨高频彩超诊断乳腺良恶性肿块的声像图特征及其诊断价值。方法对经病理证实的乳腺良性肿块22例和恶性肿块20例的高频彩超声像图进行回顾性分析。结果本组大多数恶性肿块形态不规则,边界不清,内部回声不均匀,以低回声为主,部分后方有衰减,肿块纵横比〉1。彩色多普勒血流分级大多数为-级;PI值〉1.2,RI值〉0.70。8例（36.3%）同侧腋窝淋巴结肿大,血流丰富。乳腺良性肿块大多表现为：形态规则,边缘光整,内部回声均匀,侧缘回声减弱,纵横比〈1;彩色多普勒血流分级大多数为0-级;PI值〈1.2RI值〈0.70。结论高频彩超对乳腺肿块的检出率高,高频二维超声特征接合彩色多普勒表现对乳腺良恶性肿瘤的鉴别诊断具有较高的临床应用价值。     

miR-18a对结直肠癌SW116细胞辐射敏感性的影响

目的:探讨miR-18a与结直肠癌SW116细胞辐射敏感性之间的关系,阐明miR-18a影响细胞凋亡和自噬的可能机制。方法:人结直肠癌SW116细胞分为miR-18a NC组、miR-18a mimic组、miR-18a NC+4Gy组和miR-18a mimic+4Gy组。qRT-PCR法检测照射前后SW116细胞中miR-18a的表达;集落形成实验观察miR-18a对SW116细胞辐射敏感性的影响;GFPLC3形态学方法检测SW116细胞自噬率;流式细胞术检测SW116细胞凋亡率;采用生物信息学方法预测miR-18a的靶基因,以荧光素酶报告基因验证miR-18a与靶基因3'UTR结合;Western blotting法检测SW116细胞中共济失调-毛细血管扩张突变基因(ATM)蛋白表达。结果:与照射前比较,照射后SW116细胞中miR-18a表达水平明显降低(P<0.05)。集落形成实验,与miR-18a NC组比较,miR-18a mimic组SW116细胞辐射敏感性增强(P<0.05),细胞凋亡率和自噬率明显增加(P<0.05)。与miR-18a NC+4Gy组比较,miR-18a mimic+4Gy组SW116细胞中ATM蛋白表达减少。结论:miR-18a的靶基因为ATM;miR-18a mimic可促进辐射诱导的细胞凋亡和自噬,且能增加结直肠癌SW116细胞辐射敏感性。     

注射用尼可地尔临床应用进展

近年来,随着冠心病的发病率逐年升高,接受经皮冠状动脉介入治疗的患者数量明显增加,随之而来的慢血流、无复流和再灌注心肌损伤等手术并发症也逐渐增多,严重影响了患者的预后。注射用尼可地尔作为一种具有开放ATP敏感性钾离子通道和类硝酸酯双重作用的药物,能够降低介入治疗并发症的风险,最近研究表明,其还可以显著改善急性心衰患者的症状及血流动力学。     

高频超声心动图在心力衰竭模型小鼠早期心功能降低诊断中的价值

目的探讨高频超声心动图在阿霉素(ADM)造模致心力衰竭小鼠早期心功能降低诊断中的价值。方法 40只清洁级雄性ICR小鼠随机分为实验组及对照组,每组20只。实验组接受ADM腹腔注射,制造小鼠心力衰竭模型,对照组接受生理盐水腹腔注射,连续注射5 w,采用高频超声心动图检测两组小鼠心功能各项指标,采用ELISA试剂盒测定小鼠血脑钠肽(BNP)水平。结果对小鼠连续注射ADM 5 w造模成功后,高频超声心动图显示第6周实验组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、室间隔舒张末期厚度(IVSd)、E/A均低于造模前及对照组,左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、E峰减速时间(EDT)均高于造模前及对照组(P<0.05)。心力衰竭小鼠主要表现为LVEF、LVFS降低,LVPWd、IVSd变薄,E/A值降低,LVESD、LVEDD值增大,EDT延长。与造模前相比,实验组小鼠第3周E/A值已经出现明显下降,EDT值已出现明显上升,说明小鼠的心脏舒张功能已经开始出现损伤,而反映心脏收缩功能的指标LVEF与LVFS水平在第4周才开始出现有统计学意义的降低。结论高频超声心动图对小鼠心功能损伤有较好的诊断价值,E/A及EDT等反映心室舒张功能的指标在早期评估ADM心肌损伤方面较反映心室收缩功能的指标LVEF及LVFS等更有价值。     

以患者需求为导向的临床护理路径对心外科术后患者满意度及护理质量的影响性分析

摘要：目的：探讨与分析以患者需求为导向的临床护理路径对心外科术后患者满意度及护理质量的影响性。方法：2013年8月到2017年1月选择我院收治的心外科术后患者128例作为研究对象，按照入院顺序，根据随机信封抽签原则分为观察组与对照组各64例，对照组沿用目前常规临床护理模式，观察组给予以患者需求为导向的临床护理路径。结果：观察组与对照组术后14d的疼痛评分分别为1.33±0.67分和2.34±0.41分，都明显低于术后1d的7.29±2.19分和7.41±2.09分(P<0.05)，可以看出在术后14d，就疼痛评分来说，观察组比对照组明显要低(P<0.05)。并且观察组在术后14d的遵医行为、合理用药、生活规律、病情监测的比例都比对照组高得多(P<0.05)。在满意度方面，观察组达到了100%，而对照组为89.1%，即观察组比对照组明显要高(P<0.05)。术后14d观察组的躯体化、抑郁、人际关系、强迫等评分都明显低于对照组(P<0.05)。结论：以患者需求为导向的临床护理路径在心外科术后患者的应用能提高护理质量，改善患者的满意度，更加有效缓解疼痛，促进患者自我良好行为的建立，从而提高生活质量。     

老年患者急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗后心功能不全的主动脉内球囊反搏支持治疗

主动脉内球囊反搏(IABP)作为一种辅助循环装置,其安全性与为心肌提供血流动力学支持已被人们所接受,现已广泛应用于各种心力衰竭的循环支持中。这里我们旨在探讨IABP在老年患者急性心肌梗死(AMI)合并轻度心功能不全时经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后支持治疗的有效性。1资料与方法     

P53基因在电离辐射诱导的非小细胞肺癌细胞死亡中的作用

目的研究p53基因在电离辐射诱导的非小细胞肺癌细胞死亡中的作用。方法选取H1299（p53-/-）,H1299-P53,H1299-175H细胞为研究对象。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,WESTERN BOLT方法检测相关蛋白表达情况。结果在H1299（P53-/-）细胞中,4GY、8GY照射后细胞凋亡率分别是假照组的68.4%、50%。在H1299-P53细胞中,4GY、8GY照射后细胞凋亡率分别是假照组的1.7倍、8.1倍。在H1299-175H细胞中,4GY8、GY照射后细胞凋亡率分别是假照组的1.5倍、2倍。LC3蛋白表达在H1299呈现剂量依赖性升高,在H1299-175H呈现剂量依赖性降低,在H1299-P53中,OGY表达最高,4 GY表达最低,8 GY表达低于假照组但比4 GY高。AKT表达在H1299细胞呈剂量依赖性降低,H1299-P53在4GY表达量升高而在8GY又降低但仍高于假照组,在H1299-175H细胞中AKT表达呈剂量依赖性降低。MDM2在H1299的表达呈剂量依赖性升高,在H1299-P53细胞中呈现与AKT相同的变化趋势,在H1299-175H细胞中4GY时表达量最高8GY最低。Caspase-3在H1299细胞中随着照射剂量的增加变化不明显,在H1299-P53细胞中呈现剂量依赖性升高,在H1299-175H细胞中,0 GY表达最高,4 GY表达最低,8 GY低于假照组但高于4 GY组。结论 X射线促进P53（-/-）的H1299细胞时发生自噬,而促进H1299-P53及H1299-175H中发生凋亡。     

埋藏式心脏复律除颤器电风暴的发生与处理

目的探讨埋藏式心脏复律除颤器(ICD)电风暴的诊断、诱发因素及处理原则.