Aβ1-42抑制少突胶质前体细胞增殖与分化的实验研究

目的 探讨在离体细胞培养条件下,Aβ1-42对SD乳鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)增殖与分化的影响.方法 采用条件培养液原代培养获得高纯度SD乳鼠OPCs,分为正常组、加入无菌水的对照组、加入Aβ1-42的实验组,采用CCK-8检测存活细胞数量和增殖水平,Western blot检测细胞凋亡蛋白含量,免疫细胞化学染色观察细胞形态变化及分化情况.结果 与对照组相比,实验组OPCs存活率显著降低(P＜0.01),具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 1 h后,细胞增殖明显受到抑制(P＜0.01);药物浓度1 moL/L作用于OPCs时,增殖也受到影响(P＜0.05),当Aβ1-42剂量增加至2.5 mol/L时,细胞增殖明显受到抑制(P＜0.01),而对照组与正常组无显著差异(P＞0.05).对凋亡蛋白Caspase-3的检测发现,它们在对照组与正常组的表达水平基本相当(P＞0.05),而在实验组明显升高(P＜0.01),且呈现时间和浓度依赖性,具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 2 h后,Caspase-3表达水平明显上调(P＜0.01);药物浓度2.5 mol/L作用于OPCs时,蛋白表达水平有所升高(P＜0.05),当Aβ1-42剂量增加至5 mol/L时,Caspase-3表达水平明显上调(P＜0.01).对成熟少突胶质细胞标记物髓鞘碱性蛋白的免疫染色发现,与对照组相比,实验组的细胞体积明显变小,突起明显减少.结论 Aβ1-42可能通过促使细胞凋亡而抑制OPCs增殖,并抑制了OPCs向成熟少突胶质细胞分化,从而影响中枢神经系统的髓鞘形成.     

医学生开展组织胚胎学论坛活动的实践与体会

通过对刚学完组织胚胎学课程的大二本科学生开展组织胚胎学论坛活动,激发学生对医学知识的好奇心和求知欲,促其掌握能动性、系统性、整体性的自主学习方法,引导其接触医学科研前沿,培养其创新能力与协作精神。     

DNA结合抑制因子2在大鼠脑室管膜前下区神经干细胞发育中的表达

目的探讨DNA结合抑制因子2(Id2)在大鼠脑室管膜前下区(SVZa)神经干细胞(NSCs)发育分化中的作用。方法运用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学技术,观察Id2在不同发育阶段SVZa-喙侧迁移流(RMS)-嗅脑(OB)流通道中的时空表达模式。结果从空间上看,Id2在RMS表达始终最高,SVZa次之,在OB表达最弱;从发育的时间来看,Id2在各区域胚胎时期表达均比刚出生时强;在OB和RMS区,成年比刚出生时表达强,老年仍有较强表达;在成年SVZa表达比刚出生时弱。结论Id2在SVZa神经干细胞的发育学表达模式提示,Id2可能有促进SVZa神经干细胞增殖和抑制其在RMS迁移区分化的作用。     

肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠中枢神经系统的表达

目的 观察PTEN在成年大鼠中枢神经系统(central nervous system, CNS)的表达情况.方法 用免疫组织化学ABC法显示大鼠CNS中PTEN阳性免疫反应产物.结果 PTEN阳性反应产物广泛分布于大鼠的CNS内,阳性细胞的分布主要表现为较多、中等量和少量3种情况,其亚细胞定位包括细胞质、细胞核和细胞质突起.结论 明确PTEN在成年大鼠CNS中的表达模式.     

转录因子EN2在小鼠胚胎组织中的分布

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Western blot技术检测EN2在小鼠胚胎E8.5~E17.5的表达强度;利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果Western blot:E8.5未检测到明显的阳性蛋白条带,E9.5~E15.5在相对分子质量为41×103处检测到清晰的EN2蛋白条带,表达水平从E9.5~E12.5逐渐增强,E13.5之后逐渐减弱,至E16.5消失。②免疫组化:在胚胎不同时期,EN2蛋白在中后脑交界部、Rathke囊周围、下颌弓、视交叉、嗅球、椎间盘、轴旁肌和一些间充质组织中都有不同程度的表达。结论EN2蛋白可能参与了神经系统、骨骼肌、椎间盘和一些间充质组织的发育与分化。     

交互式讨论教学法提高医学本科生综合分析能力的评价与实践

为了提高医学本科生自学与综合分析能力,作者以班级为单位将交互式讨论教学法应用于组织胚胎学实验教学中,分析并比较交互式讨论教学法组和传统教学法组实施后的效果.结果显示：交互式讨论教学法在提高学习兴趣和考试成绩、提高分析解决问题能力及提高综合素质等方面明显优于传统教学法.交互式讨论教学法能够有助于培养高素质的医学人才.     

Id2在三碘甲状腺氨酸调节大鼠室管膜前下区神经干细胞分化中的作用

目的 探讨三碘甲状腺氨酸(triiodothyronine,T3)对大鼠室管膜前下区(anterior subventrieular zone,SVZa)神经下细胞(neural stem cells,NSCs)分化为少突胶质细胞的影响及转录因子Id2的表达变化.方法 离体培养新生大鼠SVZa来源的NSCs,应用免疫细胞化学技术观察加入T3后对NSCs分化细胞种类、比例的影响,以及不同分化时间Id2表达的变化情况.结果 在正常自然培养的未分化NSCs中ld2表达较强,分化2h和12h时表达较弱,随后逐渐增强.加入T3后,细胞分化加速,Id2表达较对照组高(P<0.05),但此时少突胶质细胞数甚增多,而星形胶质细胞数量减少.结论 T3可能通过增加Id2的表达从而促进体外培养的SVZa NSCs向少突胶质细胞分化,而抑制其向星形胶质细胞分化.     

梓醇通过上调p-Akt表达抑制慢性脑缺血诱导的大鼠脑白质损伤

目的 探讨梓醇对慢性脑缺血诱导的大鼠脑白质损伤的保护作用及其与Akt通路之间的相关性.方法 成年雄性Wistar大鼠18只,随机分为假手术组(Sha组),生理盐水处理组(Veh组)和梓醇处理组(Cat组),每组6只.以永久性结扎双侧颈总动脉诱导大鼠慢性脑缺血,Veh组和Cat组大鼠分别腹腔注射生理盐水和梓醇(5 mg/kg),连续10d.慢性缺血30 d后,采用卢卡斯快蓝(LFB)染色法和免疫组织化学染色法检测梓醇对脑白质少突胶质细胞凋亡、髓鞘损伤及p-Akt表达的影响.结果 在Veh组的脑白质中,少突胶质细胞凋亡和髓鞘损伤程度明显增加,与Sha组比较有显著性差异(P＜0.01).梓醇治疗后能明显降低少突胶质细胞凋亡和髓鞘损伤,上调p-Akt表达,其结果与Veh组比较均有显著性差异(P＜0.05).结论 梓醇可通过上调p-Akt的表达抑制慢性脑缺血诱导的脑白质损伤.     

对组织胚胎学实习课教学的思考

组织胚胎学是医学教育的重要入门课程之一。它涵盖组织学与胚胎学两门学科，内容多，知识广，专业性强。传统教学主要是采用“满堂灌”的方法讲授基本理论和基本知识，通过实习课在光学显微镜下观察组织切片来了解组织器官的形态结构，这难以激发学生的学习兴趣和热情，不利于学生独立思维能力及创新意识和动手能力的培养。本文结合本教研室教学实践的特点，就如何充分利用现有教学资源、改革组胚实习课教学、提高教学质量探讨如下。     

梓醇对大鼠慢性脑缺血白质损伤的保护作用

目的 初步探讨梓醇对慢性脑缺血所致白质损伤的保护作用及机制.方法 成年雄性Wistar大鼠24只,分为4组:假手术组,缺血组,生理盐水组和梓醇组.通过结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性脑缺血模型,同时腹腔注射5 mg/kg 梓醇或生理盐水予以治疗,每天1次,连续10 d.术后30 d处死,然后利用卢卡斯快蓝(luxol fast blue, LFB)染色法和免疫组织化学技术分别观察梓醇对脑白质髓鞘以及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、腺瘤性息肉蛋白(adenomatus polyposis coli,APC(CC-1)和星形胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidity protein,GFAP)表达的影响.结果 与假手术组比较,在缺血组和生理盐水组,LFB染色变浅[(37 259.6±6 626.6)、(36 554.4±7 865.7) vs (90 470.5±5 004.6)],MBP表达下降[(24 016.5±3 794.8)、(23 923.6±4 605.1) vs (65 055.4±6 839.9)],CC-1阳性的少突胶质细胞(oligodendrocytes,Ols)减少[(33.0±9.6)、(32.0±9.8) vs (100.0±11.2)],GFAP阳性的星形胶质细胞增多[(52.0±7.4)、(50.0±9.4) vs (14.0±6.6)],均有显著差异(P<0.01);梓醇治疗后能显著地减轻白质损伤,它能使LFB染色加深(86 687.6±6 619.1),MBP表达升高(61 604.5±6 319.9), CC-1阳性细胞数增加(91.0±8.4),GFAP阳性细胞数减少(17.0±7.8),与生理盐水组比较均有显著差异(P<0.01).结论 梓醇可通过抑制星形胶质细胞的增生进而抑制炎症反应来保护慢性脑缺血所致的白质损伤.