汉防己甲素联合屈洛昔芬逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡相关性的研究

本研究旨在探讨汉防己甲素(tetrandrine，Tet)联合屈洛昔芬(droloxifene，DRL)对耐药细胞系K562／A02的逆转作用与诱导凋亡有无相关性。采用Annexin V/PI法测定耐药调节剂汉防己甲素、屈洛昔芬单独或联合应用后细胞凋亡的情况。结果发现0.62ug/ml汉防己甲素或1/94ug/ml屈洛昔芬单独作用于K562细胞48小时后均可诱导一定比例的细胞凋亡，作用呈时间依赖性，两者联合应用作用增强。0.62ug/ml汉防己甲素或1.94ug/ml屈洛昔芬单独作用于K562／A02细胞均不能诱导细胞凋亡，两者联合应用72小时可诱导小部分细胞凋亡。结论：汉防己甲素，屈洛昔芬逆转耐药的机理与诱导K562／A02细胞凋亡无关。     

甲钴胺联合α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的效果

目的观察甲钴胺与α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的效果。方法将68例糖尿病周围神经病变患者纳入研究,按照随机数字表法分为对照组(34例)与观察组(34例),对照组给予甲钴胺治疗、观察组给予甲钴胺与α-硫辛酸治疗,对比两组的治疗效果。结果观察组总有效率(85. 3%)高于对照组(64. 7%),空腹血糖、餐后2 h血糖与同型半胱氨酸水平(Hcy)以及神经病变主觉症状问卷(TSS)评分均低于对照组,神经电生理指标优于对照组,各项差异均有统计学意义(均P 0. 05)。结论甲钴胺与α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的效果理想,可明显改善患者血糖和同型半胱氨酸水平。     

鼓室内联合给药治疗梅尼埃病临床观察

目的 观察鼓室内注射庆大霉素及联用地塞米松治疗梅尼埃病的临床效果.方法 对23例常规方法 治疗无效的梅尼埃病患者,采用鼓膜穿刺鼓室内注入30mg/ml庆大霉素1ml及鼓室内注射5g/L地塞米松1ml治疗,每周1次.每周测纯音听力、言语识别率和平衡功能.连续3周.治疗期间观察眩晕控制和听力改善情况.结果 23例中,眩晕总控制率为91.67%,两组无统计学差异;听力改善A组18.18%(2/11),B组为58.33%(7/12),具有统计学差异(P<0.05).结论 鼓室内注射庆大霉素治疗常规方法 治疗无效的梅尼埃病,操作简便,对眩晕的控制率满意,联用地塞米松对听力改善明显.鼓室内给药治疗免疫介导的内耳疾病有望成为有前景的治疗方法.     

秀丽线虫衰老的遗传调控机制

秀丽线虫生命周期短,衰老表型较为明显,遗传操作灵活便利,是一种理想的衰老研究模式生物。自1988年第一株线虫长寿突变体age-1产生以来,秀丽线虫迅速成为衰老研究的首要模式生物。研究者利用秀丽线虫,通过遗传学研究方法,逐步阐明了多条寿命调节相关通路。     

冠心病不稳定性心绞痛的中医药治疗

冠心病不稳定性心绞痛中医属于“胸痹”范畴,目前本病病机的看法已取得共识,归结为“本虚标实”本虚以阳虚、气虚为主,标实以瘀血、痰浊为多。临床辨证分型尚无统一标准。目前治疗上中医药主要的方法有古方加减、自拟方、中成药、中药注射制剂及其他现代药物制剂,都具有一定治疗作用。中成药,如吸收快的滴九及注射液具有积极的作用,将是未来中医药治疗不稳定性心绞痛的主要发展途径。     

葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂PDMP对K562/A02细胞柔红霉素耐药逆转的研究

本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度PDMP对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应及其对K562/A02细胞DNR耐药逆转作用;用流式细胞术检测PDMP对K562/A02细胞内DNR浓度及细胞凋亡率的影响;半定量RT-PCR和Western blot方法检测K562及K562/A02细胞mdr1、GCS基因的表达以及PDMP对K562/A02细胞两种基因表达的影响。结果表明:DNR对K562和K562/A02细胞的IC50分别为0.23±0.02和7.15±0.24μg/ml,当PDMP≤20μmol/L时,对K562及K562/A02细胞株无明显生长抑制作用;20μmol/L和10μmol/L PDMP均能增加K562/A02细胞对DNR的敏感性,其耐药逆转倍数分别为2.59和1.69;两种浓度PDMP作用于耐药株48小时后能增加细胞内DNR浓度(p0.05)和细胞凋亡率(p0.01)。20μmol/L PDMP处理K562/A02细胞48小时后可在mRNA和蛋白水平下调GCS和mdr1基因的表达(p0.01)。结论:PDMP可以增强K562/A02细胞对DNR的敏感性,其机制可能与增加细胞内药物浓度及细胞凋亡率、下调GCS和mdr1基因表达有关。     

载有柔红霉素的磁性纳米Fe2O4提高裸鼠异种移植模型中多药耐药K562白血病细胞对化疗效果

肿瘤的多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因，由于载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体外显示了良好的耐药逆转效果，本实验研究了载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内对白血病多药耐药逆转效果。将裸鼠高成瘤性白血病细胞株K562-n及其相应的多药耐药株K562-n／VCR分别接种于裸鼠的两侧腹股沟皮下，以建立人类白血病移植瘤模型；将双侧成瘤裸鼠随机分为5组，A组给予生理盐水，B组给予磁性纳米Fe3O4颗粒，C组给予柔红霉素，D组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒，E组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒同时在肿瘤表面建立固定磁场。在实验开始后的第1，5，9，13，17，21天分别测量肿瘤体积。实验结束后，分离瘤组织并用lit-PCR，Western blot检测mdr-1的转录和表达。结果表明：D组、E组的K562．n／VCR肿瘤体积显著小于A、B、C3个组（D或E组相对于A，B或C组P〈0．05）。病理检查显示：A组、B组肿瘤细胞生长良好，未见明显细胞坏死；C组肿瘤细胞有散在细胞坏死，部分细胞出现核固缩、核碎裂等；D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。D和E组的mdr-1的转录水平明显低于A、B、C3个组，但是P．gp的表达在5个组申无差异。C组、D组、E组3个组I（562-n肿瘤平均肿瘤体积显著小于的A、B两组的平均肿瘤体积（C、D或E组相对于A或B组P〈0．05）。A组、B组肿瘤细胞生长良好，未见明显细胞坏死；在C、D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。结论：载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内具有明显的逆转多药耐药的作用，但是相对于单用柔红霉素，载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在敏感的K562-n的肿瘤中并不能进一步提高疗效；本实验中外加磁场并未增加疗效。     

Effect of hypoxia inducible factor1-α inhibitor on reversal of multidrug resistance of K562/A02 cell line

Objective To study the reversal effect of the hypoxia inducible factor( HIF)-1α inhibitor,YC-1 ,on muitidrug resistance of K562/A02 cells and its mechanism. Methods Pre- and post- incubation with adriamycin (ADM) alone or in combination with YC-1 for 48 h, the proliferation capacity of K562/A02 and K562 cells were evaluated by MTT assay. The apoptosis rate of K562/A02 cells after treated with 0,5,10 and 20 μmol/L YC-1 alone or in combination with 1 mg/L ADM and intracellular ADM concentration were analyzed by flow cytometry(FCM). The mRNA levels of HIF-1α and mdr1 genes were determined by semi-quantitative RT-PCR. The protein levels of HIF-1α and P-glycoprotein (P-gp) were detected by Western blot. Results The IC50 of ADM for K562 and K562/A02 cells were ( 1.56 ± 0.07 ) mg/L and (42.98 ±3.15) mg/L respectively. The resistance of K562/A02 cells to ADM was 27.55- fold higher of that of K562cells. After treatment with YC-1 (5μmol/L, 10μmol/L, 20 μmol/L) for 48h, the resistances of K562/A02cells to ADM were 24.63-, 16.38- and 10.71- fold increase respectively. After treatment of K562/A02 cell with YC-1(0 μmol/L, 5 μmol/L, 10 μmol/L, 20 μmoL/L) alone or in combination with 1 mg/L ADM for 48 h, the apoptotic rates were ( 1.9 ± 0. 9) %, (4.9 ± 0. 9 ) %, ( 5.8 ± 1.1 ) %, and ( 9.3 ± 1.4 ) % and(2.3 ± 0.7 ) %, (8.2 ± 1.2) %, ( 19.0 ± 1.7 ) %, and ( 34.5 ± 2.4 ) % respectively. The intracellular flucorescence intensity of ADM were 232 ±33, 1300 ±219, 1961 ±240 and 3342 ±269 in the combined treatment group. With the increase in YC-1 concentration, the levels of mdr1 mRNA reduced, while that ofHIF-1α mRNA had no obvious change.Furthermore.the expressions of HIF-1α and P-gp were also decreased in K562/A02 cells.Conclusion YC-1,as a HIF-1 inhibitor,cau reverse multidrug resistance of K562/A02cells through down-regulating HIF-1α and p-gp.     

应用MALDI-TOF质谱技术检测多发性骨髓瘤Jak2基因单核苷酸多态性

本研究探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI—TOFMS）检测多发性骨髓瘤（MM）jak2基因的单核苷酸多态性（SNP）的实用性。用PCR扩增出含jak2基因2个SNP（C428T和C643T）位点的DNA片段作为模板，产物纯化后利用MALDI，TOFMS检测5例MM和5例健康对照者样本的jak2基因多态性。结果表明：C428T和C643T位点基因型在多发性骨髓瘤病例与健康对照组的分布无差异，均为T／T纯合子。结论：本实验建立的基于MALDI—TOFMS与引物延伸技术检测jak2基因多态性的方法是一个快速、准确和可靠的检测方法。