胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对氯化钴（CoCl2）诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞凋亡的作 用及机制。方法 取对数生长期的 PC12细胞,分别以 10、20、40、80 μmol/L的 CoCl2溶液和 100、200、400 μg/L的 IGF- 1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出 CoCl2和 IGF-1最佳干预浓度。根据选定的实验条件,应用 CoCl2处理 PC12细胞建立 HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组。分组处理 24 h后采用 CCK-8法 检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞 Bax、Bcl-2及 Caspase-3的蛋白的表达 水平。最后在上述实验的基础上,设 CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂 2-甲氧雌二醇（2-MeOE2）+ CoCl 2组和 CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察 IGF-1、2-MeOE2及两者共用对 PC12细胞 HIF-1α及 Bax的表 达水平的影响。结果 CCK-8检测结果显示,40 μmol/L CoCl2和 200 μg/L IGF-1为最佳干预浓度。利用以上浓度分 组干预细胞 24 h后,与 CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低, 同时抗凋亡蛋白 Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白 Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 应用 2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与 2-MeOE2+IFG-1组 HIF-1α和 Bax蛋白表达差异无统计 学意义,但均较 CoCl2+IGF-1组明显下调（P＜0.01）。结论 IGF-1可抑制 CoCl2诱导的 PC12细胞凋亡,其保护作用 可能与 HIF-1α表达下调有关。     

脑-机接口技术在脊髓损伤患者康复的研究进展

正脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是因各种原因引起的脊髓结构、功能的损害,造成损伤平面以下脊髓功能(运动、感觉及反射功能)的障碍,往往给伤者、家庭和社会带来沉重负担~([1])。近年来SCI的发病率有逐年增高的趋势,世界卫生组织称全球每年约50余万人发生SCI,全球各地SCI发病率约为20—140例/百万人/年~([2—3])。我国SCI发病率约23—60例/百万人/年~([3])。美国SCI发病率约为54例/百万人/年,每年     

布洛芬对少突神经胶质细胞生长发育的影响

摘要： 目的 探究布洛芬对少突胶质细胞 （OLs） 生长发育的影响。方法 健康清洁级SD成年大鼠6只, 提取 OLs, 扩增后加入溶血磷脂酸 （LPA） 观察细胞形态变化。使用出生24~48 h的新生鼠6只, 提取少突胶质细胞前体细胞 （OPCs）, 将OPCs接种后随机分为对照组、 LPA组、 布洛芬组、 LPA+布洛芬组。贴壁3 d后观察细胞形态, 对照组加入生理盐水, 其他3组分别加入LPA （1.0 μmol/L）、 布洛芬盐水溶液 （100 μmol/L） 及两者的混合液。药物持续干预7 d 后观察细胞形态, 分别对OPCs特异性免疫标志物血小板源生长因子受体α （PDGFR-α） 和OLs特异性免疫标志物髓鞘碱性蛋白 （MBP） 行免疫荧光染色观察OPCs及OLs形态并细胞计数。使用Western blot法比较各组MBP相对表达量。结果 LPA作用于成熟OLs后细胞突起减少。OPCs贴壁3 d时各组细胞发育良好。药物干预7 d后, 布洛芬组和LPA+布洛芬组中细胞突起明显多于对照组和LPA组。布洛芬组、 LPA+布洛芬组的MBP阳性细胞计数多于对照组和LPA组 （P＜0.01）。Western blot结果显示, LPA组的MBP表达量明显少于其他3组 （P＜0.01）, 布洛芬组表达量明显多于LPA＋布洛芬组 （P＜0.01）。结论 LPA对OPCs的生长发育有毒性作用, 对成熟OLs的正常生长具有抑制作用, 一定浓度的布洛芬能够显著抑制LPA对OPCs及OLs的细胞毒性作用。     

魏清琳教授治疗顽固性面瘫临证心识

从理、法、方、穴、术5个方面详细介绍魏清琳教授针灸治疗顽固性面瘫的临床经验。魏教授擅用"扶正通络,祛瘀生新"法治疗久治难愈的顽固性面瘫。魏师中医临证,谨守病机,标本兼顾;针对顽固性面瘫,其倡导针刺、艾灸百会和中药综合治疗,扶助正气和疏通经络双管齐下,如此,不仅能够治愈面瘫,还可以增强体质,真正达到标本兼治。     

张锡纯先生治疗"大气下陷"的理法方药

从理、法、方、药4方面详细介绍张锡纯先生运用升陷汤治疗"大气下陷"证的临床经验。张氏业医几十载,治学严谨,医术精湛,善用"补中益气、升阳举陷"法治疗"大气下陷"证,临证遣方用药重视辨证,衷中参西,选药精准,君臣佐使配伍严谨;不仅可以治疗大气下陷之症状,而且还可以增强正气,真正达到标本兼治的目的。文中以大气下陷证的治疗为例,深入剖析张锡纯先生的中医临床治疗思路与方法。     

BDNF干预MSCs源性外泌体减轻过氧化氢致PC12细胞氧化应激损伤

目的探讨经脑源性神经营养因子(BDNF)干预后的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)源性外泌体对H2O2损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用。方法全骨髓培养法提取大鼠MSCs,取P3代分为对照组及干预组(培养基中加入30 ng/mL BDNF),分别收集细胞上清,超速离心法分离并纯化外泌体,通过透射电镜观察鉴定外泌体形态;用Western blot鉴定外泌体表面标志蛋白CD9、CD63;实验将嗜铬细胞瘤细胞PC12分为4个组:对照组、H2O2组、MSCs外泌体组和BDNF-MSCs外泌体组,前2组培养基中加入PBS,后2组加入相应外泌体(MSCs外泌体组和BDNF-MSCs外泌体组外泌体蛋白浓度均为50μg/mL)均预处理12 h,后3组在培养基中加入H2O2(0. 521 mmol/L)对PC12建立氧化应激的细胞损伤模型;于10 h后以CCK-8法检测细胞活性,检测活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)值,Western blot检测Bcl-2与Bax蛋白质表达情况。结果 P3代MSCs细胞表面CD90表达阳性。成功提取出外泌体,透射电镜下可见大量直径40～100 nm的不规则球体或茶托形的囊泡结构,膜清晰,相对完整,Western blot显示CD9、CD63蛋白表达阳性。相比于单纯损伤组与MSCs外泌体组,BDNF-MSCs外泌体组细胞活性最高、SOD活性最高、ROS含量最低、Bcl-2/Bax值最高。结论经BDNF干预后的MSCs源性外泌体在H2O2对PC12细胞造成的氧化应激损伤的保护作用优于MSCs源性外泌体。