DPA法检测细胞凋亡及其在白血病中的应用

目的建立一种检测白血病细胞凋亡的新方法。方法高速离心将DNA样品区分为小分子量DNA片段及高分子量DNA(分别来自凋亡和未凋亡细胞)两部分,二苯胺(DPA)法测定各部分DNA含量,计算DNA片段率,从而分析细胞凋亡情况。以此方法分析了白血病细胞株HL-60受不同剂量抗癌药物VP-16诱导时的凋亡情况。结果与FCM法相比,各剂量组细胞凋亡率无显著差别(P＞0.05),经密度梯度离心法分离提取的凋亡细胞,两种方法测得细胞凋亡率亦无明显差别(P＞0.05)。结论二苯胺法测定DNA片段是分析白血病细胞凋亡的一种简单有效方法。     

CD3+CD16+CD56+自然杀伤T淋巴细胞与移植肾免疫状态的关系

目的 探讨肾移植患者CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞(NKT)在外周血中的表达与移植肾免疫状态的关系,以及钙调磷酸酶抑制剂(CNI)不同的血药浓度下NKT细胞的水平。 方法 将92例肾移植患者根据CNI血药浓度水平及有无排斥反应分为3组：正常血药浓度的无排斥组（A组,58例）、低血药浓度的无排斥组（B组,8例）、排斥组(C组,26例),10例正常人群作为对照组(D组),采用流式细胞术检测各组外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD16+CD56+自然杀伤（NK）和CD3+CD16+CD56+NKT细胞及人白细胞抗原（HLA）抗体的水平。结果 A、B、C、D组CD3+CD16+CD56+NKT细胞的百分数分别是（4.29±2.57）%、（4.31±2.08）%、（1.23±1.06）%、（3.98±2.26）%。A、B组与D组比较,NKT细胞百分数、NK细胞百分数及CD4+/CD8+无差异,HLA抗体阳性比率无显著升高;C组NKT细胞的百分数与正常对照组相比降低(P＜0.05),NK细胞、CD4+/CD8+均显著高于D组(P＜0.05),HLA抗体阳性比率显著升高。结论 肾移植后排斥反应时NKT细胞低表达,出现HLA抗体;无排斥反应时NKT细胞表达正常,不受低血药浓度的影响。CD3+CD16+CD56+NKT细胞在抑制移植肾免疫激活中起着重要作用。     

肾移植术后新生HLA抗体和MICA抗体对移植肾功能的损伤作用

目的研究肾移植术后新生人类白细胞抗原(HLA) 抗体及主要组织相容性I类相关链A抗原（MICA）抗体的产生对移植肾功能的损伤作用。方法采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术检测96例肾移植患者HLA及MICA抗体。根据检测结果,将患者分为HLA抗体阳性组（HLA+）、MICA抗体阳性组（MICA+）、以及HLA、MICA抗体阴性组（HLA /MICA ）,观察并比较各组不良免疫事件的发生率。再根据有无急性排斥（AR）,将患者分为排斥组（AR+）和非排斥（AR ）组,观察HLA抗体、MICA抗体对移植肾功能的影响。结果HLA+组急性排 斥反应发生率高于HLA /MICA 组(43．5％ vs 11.7％,P＜0.05);MICA+组急性排斥反应发生率与HLA /MICA 组比较差异无统计学意义(15．3％ vs 11．7％,P＞0．05);AR+组中,HLA+患者术后1、3、6和12个月时血清肌酐水平高于HLA /MICA 患者, MICA+患者在术后1、3月时血肌酐水平高于抗体阴性患者;AR 组中,HLA+患者术后6、12个月血肌酐水平高于HLA /MICA 患者;MICA+组在术后6个月及12个月的尿蛋白定量均值高于150?mg,并随时间逐渐升高。结论HLA抗体对移植肾功能的损伤作用表现为血清肌酐的升高以及与急性排斥反应的发生有关;MICA抗体对移植肾功能的损伤主要表现为尿蛋白定量的升高。     

血清C反应蛋白测定在冠心病中的应用

C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是人体被细菌感染或者组织创伤后反应最为敏感的一种急性相蛋白.近年来发现,CRP与多种疾病有关,有学者认为它是一个未被充分利用的指标[1].为探讨血清CRP水平与冠心病(CHD)发生发展及预后的关系,我们对98例冠心病患者进行了CRP及有关血液指标的测定,现报告如下:     

检测白血病细胞凋亡的二苯胺法

现有细胞凋亡的定量方法操作复杂且需贵重试剂或仪器。定性方法又难以精细研究细胞凋亡这一现象。我们参照Mangan等［1］的方法，建立一种以二苯胺(DPA)法测定DNA片段率来分析细胞凋亡的简单方法，并以此方法分析白血病细胞株HL-60受抗癌药物鬼臼乙叉甙(Etoposide)诱导时的凋亡情况。 材料和方法 一、细胞 HL-60细胞株(本院血液病研究室提供)，常规RPMI 1640培养基(Gbico产品)培养，隔天换液，实验选用对数生长期的细胞，将细胞浓度调整至106/ml，加入以二甲基亚砜(DMSO)溶解的鬼臼乙叉甙(Sigma产品)，最终浓度分别为0、5、10、20、40 μg/ml，作用3.5 h，用PBS(pH 7.2，不含Ca2＋、Mg2＋，下同)洗涤收获细胞。     

丹蛭降糖胶囊联合缬沙坦治疗气阴两虚型早期糖尿病肾病临床观察

目的观察丹蛭降糖胶囊联合缬沙坦治疗气阴两虚型早期糖尿病肾病的疗效。方法 选取了2018年6月-2019午5月安徽省中医院内分泌科80例确诊的气阴两虚型早期糖尿病肾病患者,随机分为观察组和对照组,各40例。所有病人均按标准进行常规血糖控制、饮食和血压控制等生活习惯方面的指导。对照组采用单一的缬沙坦（80 mg/d）治疗,观察组则施用丹蛭降糖胶囊（5.25 g/d）和缬沙坦联合治疗,治疗周期为12周。比较2组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖（2hPG）、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、尿微量白蛋白（mALB）、血尿素氮（BUN）以及血清肌酐（SCr）等指标和中医证候积分及并发症情况。结果 在治疗周期结束后,观察组FPG、2hPG、UAER、NAG、mALB、BUN、SCr等指标和中医证候积分都低于对照组;且与对照组比较,观察组的FPG、2hPG、UAER、NAG、mALB、BUN、SCr等指标和中医证候积分差异有统计学意义( P<0.05)。结论 丹蛭降糖胶囊联合缬沙坦治疗气阴两虚型早期糖尿病肾病,在病理指标和临床症状改善方面具有一定的提升,治疗效果确切,安全性较好。     

HL-60细胞分化与凋亡关系的初步研究

目的探讨HL-60细胞分化与凋亡的初步关系,指导白血病的联合化疗.方法NBT还原试验检测细胞分化、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡及bcl-2、c-myc蛋白的表达,观察分别经ATRA、TPA诱导分化的HL-60细胞对VP-16的凋亡反应.结果与对照组相比,经ATRA、TPA分化的HL-60细胞bcl-2、c-myc蛋白表达都明显降低(P＜0.05),其中以TPA下调c-myc蛋白的幅度最大(76%);对VP-16的诱导反应,经TPA分化的HL-60细胞凋亡率明显减少(P＜0.05),而经ATRA分化的细胞凋亡率则无明显变化(P＞0.05).结论HL-60细胞对VP-16的凋亡诱导反应与bcl-2、c-myc蛋白的下调表达程度有关;分化诱导剂ATRA与低剂量的VP-16联合应用可望改善AML的化疗效果,并且以后者先用效果更好.     

血清C反应蛋白测定在冠心病中的应用

C反应蛋白(C－reactive proteinCRP)是人体被细菌感染或者组织创伤后反应最为敏感的一种急性相蛋白。近年来发现,CRP与多种疾病有关,有学者认为它是一个未被充分利用的指标［1］。为探讨血清CRP水平与冠心病(CHD)发生发展及预后的关系,我们对98例冠心病患者进行了CRP及有关血液指标的测定,现报告如下： 1 对象与方法 1．1 研究对象 依据1979年WHO冠心病诊断标准,随机选择我院心内科门诊和病房冠心病病人98例,其中男52例,40～78岁,平均61岁;女43例,45～76岁,平均65岁。单纯CHD组(除外其它肝肾心脑疾病)78例,其中急性…     

丹蛭降糖胶囊联合阿托伐他汀钙对早期糖尿病心肌病的临床疗效及血清炎症指标的影响

目的:观察丹蛭降糖胶囊联合阿托伐他汀钙对早期糖尿病心肌病患者的临床疗效及炎症指标的影响。方法:将60例早期糖尿病心肌病患者随机分为对照组和治疗组,每组各30例。两组均采取基础降糖治疗,对照组口服阿托伐他汀钙片;治疗组在对照组的基础上加用丹蛭降糖胶囊治疗。两组均治疗12周。观察两组患者治疗前后血糖血脂、心功能和炎症指标及疗效情况。结果:与治疗前比较,两组治疗后空腹血糖(Glucose,GLU)、餐后2 h血糖(2-hour Postprandial Blood Glucose,2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)、超敏C反应蛋白(High Sensitive C-reactive Protein,hs-CRP)、白细胞介素(Interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)均降低(P<0.05或P<0.01),治疗组高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)升高(P<0.05),两组左心室射血分数(Left Ventricular Ejection Fraction,LVEF)、二尖瓣舒张早期最大速度/心房收缩期最大速度(Mitral valve early diastolic maximum velocity/Maximum atrial systole velocity,E/A)值均提高(P<0.05);与对照组比较,治疗组治疗后GLU、2 h PG、HbA1c、TC、TG、LDL-C、hs-CRP、IL-6、TNF-α均明显降低,HDL-C和LVEF、E/A值升高显著(P<0.05或P<0.01)。治疗组中医证候疗效优于对照组(P<0.05)。结论:丹蛭降糖胶囊联合阿托伐他汀钙治疗早期糖尿病心肌病能提高中医证候疗效,辅助降糖调脂、改善心室舒张功能及降低炎症反应。