弓形虫虎源分离株ROPIO基因的克隆、序列分析及其表达研究

采用RT-PCR技术从弓形虫虎源分离株中扩增出ROP10基因，将其克隆入pMD18．T载体中进行测序和生物信息学分析，并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达。该基因全长1761bp，编码586个氨基酸，其中前28个氨基酸残基构成信号肽序列。与GenBank中报道的RH株相比，16个核苷酸存在变异，导致7个氨基酸发生改变，但两者N-联糖基化位点的数量和位置没有差异，两虫株核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99．2％和98．8％。转化重组质粒pETROP10的大肠杆菌B121（DE，）在IPTG的诱导下，可表达出分子量为67．6kDa的重组蛋白，表达量占菌体蛋白的13．8％。     

大肠癌及大肠腺瘤中β-catenin、Cox-2和MMP-7的表达及临床意义

目的检测β-链接素（β-catenin）、环氧合酶-2（Cox-2）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在大肠癌（CRC）、大肠腺瘤及正常大肠组织中的表达水平,并分析探讨三者的相互关系。方法采用免疫组化技术检测60例大肠腺癌组织、30例大肠腺瘤和15例正常大肠组织中β-catenin、Cox-2和MMP-7的表达水平,记录β-catenin、Cox-2和MMP-7在三者中的表达差异,结合临床病理资料对三者进行综合分析,并探讨三者的关系。结果大肠癌中β-catenin膜表达缺失率、β-catenin异位表达率、Cox-2细胞质阳性表达率分别为71．7％、90．O％和81．7％,MMP-7细胞质阳性表达率为83．3％,其中38．3％为强阳性表达。大肠癌组和大肠腺瘤组比较其β-catenin膜表达缺失、Cox-2和MMP-7表达阳性者均较高,有显著差异（P〈0．05）,而β-catenin异位表达无显著差异（P〉0．05）;大肠癌组和正常大肠粘膜组比较其β-catenin膜表达缺失、β-catenin异位表达、Cox-2和MMP-7阳性表达均较高,有显著差异（P〈0．05）。大肠腺瘤组与正常组比较其β-catenin异位表达和MMP-7表达较高（P〈0．05）。大肠癌中β-catenin的异常表达、Cox-2及MMP-7的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及部位均无关;大肠癌中β-catenin在细胞膜的表达缺失程度及Cox-2的表达与大肠癌的分化程度、Dukes分期、浸润深度及淋巴结转移程度呈正相关关系;大肠癌中MMP-7的表达与大肠癌的Dukes分期、浸润深度及淋巴结转移程度呈正相关;大肠癌中β-catenin的异位表达只与大肠癌的Dukes分期呈正相关关系。大肠癌中β-catenin异常表达分别与Cox-2阳性表达及MMP-7阳性表达之间呈正相关关系（rs=0．416,P=0．001;rs=0．447,P〈0．001）;Cox-2阳性表达与MMP-7阳性表达之间亦呈正相关关系（rs=0．366,P=0．004）。结论大肠癌中存在β-catenin的异常表达,β-catenin的异常表达、Cox-2?     

腹腔镜胃癌根治术中快速康复外科理念的应用

目的：探讨快速康复外科（FTS）理念在高原地区腹腔镜胃癌根治术中应用的安全性及可行性。方法收集2014年2月至2015年12月本院胃肠外科收治的78例行腹腔镜胃癌根治术的患者,分为快速康复组38例（FTS组）和对照组40例,分析比较两组患者的临床指标。结果FTS组术后肛门恢复排气时间、胃管放置时间、术后首次下床活动时间、术后住院天数较对照组明显缩短,住院费用及疼痛评分较对照组降低,差异有统计学意义（P＜0．01）。与对照组相比,FTS组术后并发症明显减少[40．0％（16／40）vs．18．4％（7／38）],差异有统计学意义（χ2＝4．364,P＝0．037）。结论快速康复理念在高原地区腹腔镜胃癌根治术中的应用可促进患者术后康复,同时降低并发症的发生率、减少住院费用,安全有效。     

鸦胆子油注射剂胃癌术后辅助化疗

目的:研究胃癌术后应用鸦胆子油注射剂辅助化疗的疗效。方法:选择在本院接受手术治疗的108名进展期胃癌患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组,对照组给予XELOX辅助化疗(卡培他滨口服+奥沙利铂静脉滴注),观察组给予鸦胆子油注射剂辅助XELOX化疗(卡培他滨口服+奥沙利铂静脉滴注+鸦胆子油注射剂静脉滴注),观察远期预后情况、不良反应例数、总体生活质量以及免疫功能。结果:观察组完全缓解(CR)(8.62%)、有效率(58.62%)、获益率(79.31%)、卡氏行为状态(KPS)评分(84.37±8.21)分、生活质量核心量表(QLQ-C30)评分(81.84±8.34)分、T细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)、自然杀伤(NK)细胞(9.31±1.34)%、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量(1.53±0.21)ng·L-1高于对照组,局部复发(10.34%)、远处转移(10.34%)、恶心呕吐(10.34%)、神经毒性(22.41%)、肝功能损害(10.34%)、肾功能损害(12.07%)低于对照组。结论:胃癌术后应用鸦胆子油注射剂辅助化疗能够改善远期预后、减少不良反应,具有积极的治疗价值。     

磁性纳米颗粒在小鼠巨噬细胞体外MRI中的应用

目的探讨应用超微超顺磁性氧化铁纳米颗粒(ultra-micro superparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO)标记小鼠巨噬细胞株RAW264.7的最适浓度以及比较MRI中不同扫描序列在细胞吞噬功能评价中的敏感度差别.材料与方法用终浓度为0、25、50、75、100、125μg/mL的USPIO分别与小鼠巨噬细胞共培养24 h后,细胞计数试剂法(CCK-8)计算细胞存活率以及USPIO对该细胞的半数抑制浓度(IC50);光学显微镜下观察细胞形态学变化;普鲁士蓝染色确认细胞对USPIO的吞噬效应;3.0 T MRI扫描细胞-琼脂糖凝胶模型,记录T1WI和T2WI序列的弛豫时间和弛豫率并计算弛豫时间降低率.结果当USPIO浓度为25μg/mL时,对细胞的存活率无影响,差异无统计学意义(P>0.05);当USPIO浓度≥50μg/mL时,细胞存活率随USPIO浓度增加显著降低(P均<0.05);USPIO对细胞的半数抑制浓度IC50为(186.5±7.2)μg/mL;当USPIO浓度为50μg/mL时,细胞形态开始皱缩、透光度减低;当USPIO浓度为25μg/mL时,普鲁士蓝染色呈显著阳性;MRI显示,与对照组相比,当USPIO浓度为25μg/mL时,细胞即见显著信号改变;随USPIO浓度增加,T1、T2弛豫时间显著缩短(P均<0.01),对应弛豫率R1、R2逐渐升高;相同USPIO浓度下,各组T2弛豫时间降低率显著高于T1弛豫时间降低率(P均<0.001).结论浓度为25μg/mL的USPIO对细胞没有明显毒性作用,而且标记效率高、MRI即见显著信号改变与较好的成像效果,为标记巨噬细胞的最适浓度;MRI能用于细胞标记后的体外成像,T2WI序列在检测细胞吞噬USPIO后的信号变化优于T1WI序列.     

增强CT直方图分析鉴别甲状腺良恶性结节

目的观察基于CT平扫和增强图像直方图特征鉴别诊断甲状腺良恶性结节的价值。方法回顾性分析经手术后病理证实的甲状腺结节患者132例,共140个结节。选取轴位病灶最大层面,采用Mazda软件沿病灶边缘勾画ROI并进行直方图分析,获取9个参数,比较良恶性结节的差异,并以ROC曲线分析差异有显著统计学意义的灰度直方图参数对甲状腺良恶性结节的鉴别诊断效能。结果CT平扫恶性结节均值及第10、50、90百分位数高于良性结节(P均<0.05);增强后恶性结节均值及第1、10、50、90百分位数高于良性结节(P均<0.05),良性结节方差高于恶性结节(P<0.05)。两者偏度、峰度、第99百分位数在CT平扫和增强中差异均无显著统计学意义(P均>0.05)。CT平扫和增强直方图参数中,第10百分位数AUC最高,为0.68,鉴别甲状腺良恶性结节的敏感度和特异度分别为74.32%和62.12%。结论CT直方图分析可作为鉴别甲状腺良恶性结节的重要辅助手段。     

T2-mapping定量成像技术对颞下颌关节紊乱综合征早期关节盘变性的诊断价值

目的：探讨T2-mapping成像技术对颞颌关节紊乱综合征（TMD）关节盘变性的早期诊断价值。方法：74例（148个颞下颌关节）TMD患者,通过常规T2WI张闭口位评价关节盘形变及位移程度,分为正常组、轻及中度组和重症组。对每例患者颞下颌关节行T2-mapping成像并测量T2值。结果：部分关节盘常规T2WI信号未见异常患者,T2-mapping成像显示T2值升高。轻及中度组关节盘前带、中间带和后带T2值高于正常组,重症组高于轻及中度组,差异均有统计学意义（P<0.001）。关节盘T2值与病变程度呈显著线性正相关（r=0.989,P<0.001）。对常规MRI影像学评估正常的46个关节盘按照临床症状评估进行分组,TMD组关节盘前带、中间带和后带T2值高于正常组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：T2-mapping成像能准确显示颞下颌关节紊乱综合征早期关节盘变性。     

弓形虫虎源分离株ROP10基因的克隆、序列分析及其表达研究

采用RT-PCR技术从弓形虫虎源分离株中扩增出ROP10基因,将其克隆入pMD18-T载体中进行测序和生物信息学分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达。该基因全长1761bp,编码586个氨基酸,其中前28个氨基酸残基构成信号肽序列。与GenBank中报道的RH株相比,16个核苷酸存在变异,导致7个氨基酸发生改变,但两者N-联糖基化位点的数量和位置没有差异,两虫株核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.2%和98.8%。转化重组质粒pETROP10的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出分子量为67.6 kDa的重组蛋白,表达量占菌体蛋白的13.8%。     

增强CT直方图分析对甲状腺结节良恶性鉴别的价值研究

目的 评价基于CT平扫和增强图像的直方图特征是否有助于甲状腺良恶性结节的鉴别诊断。方法 回顾性分析我院经手术后病理证实甲状腺结节患者132例，共140个结节。选取轴位病灶最大层面，采用Mazda软件沿病灶边缘勾画ROI并进行直方图分析，获取9个参数。比较两组数据的差异，并通过ROC曲线分析有统计学差异的灰度直方图参数对甲状腺良恶性结节间鉴别诊断效能。 结果 CT平扫恶性组均值、第10、50、90百分位数高于良性组，差异有统计学意义（P均＜0.05）；CT增强良性组和恶性组间均值、方差及第1、10、50、90百分位数总体差异均有统计学意义（P均＜0.05），恶性组均值、第1、10、50、90百分位数高于良性组，良性组方差高于恶性组。在CT平扫和增强直方图的参数中，第10百分位数AUC最高,为0.68,其鉴别甲状腺良恶性结节的敏感度、特异度分别为74.32%、62.12%。结论 CT直方图分析可作为鉴别甲状腺良恶性结节的重要辅助手段。