二甲双胍通过核因子-κB信号通路抑制p-糖蛋白逆转卵巢癌细胞耐药性的研究

目的:探讨二甲双胍能否改善卵巢癌细胞化疗药耐药性及相关的作用机制。方法:采用CCK-8法检测二甲双胍对A 2780/TAX和A 2780/DDP细胞耐药性的改变,采用荧光定量PCR方法检测二甲双胍对细胞中多药耐药基因-1(MDR-1)表达的作用,采用Western blot法检测二甲双胍对细胞P-糖蛋白(P-gp)的表达和核因子(NF)-κB信号通路的影响。结果:1二甲双胍能够增加A 2780/DDP对顺铂的敏感性以及A 2780/TAX对紫杉醇的敏感性;2二甲双胍可通过抑制NF-κB信号通路降低P-gp的表达。结论:二甲双胍可增强顺铂、紫杉醇化疗药物对卵巢癌耐药细胞的杀伤作用,并且这一作用可能是二甲双胍通过抑制NF-κB信号通路降低P-gp的表达而实现的。     

二甲双胍对EGF信号通路调节机制的研究

目的:探讨二甲双胍联合表皮生长因子受体(EGFR)信号通路阻断剂对子宫内膜癌细胞增殖的影响及相关的作用机制。方法:选取子宫内膜癌Ishikawa及HEC-1A细胞,CCK-8方法检测二甲双胍联合或者不联合EGFR信号通路抑制剂AG1478对子宫内膜癌细胞增殖的影响。RT-PCR检测二甲双胍对EGFR mRNA的影响。Western blotting检测二甲双胍作用下子宫内膜癌细胞磷酸化EGFR/总EGFR和磷酸化ERK/总ERK水平的变化。结果:1AG1478能够抑制子宫内膜癌细胞的增殖,二甲双胍能够增强其抑制作用;2二甲双胍抑制EGFR mRNA的表达;3二甲双胍能够抑制EGFR及ERK磷酸化蛋白的表达。结论:二甲双胍能够增强EGFR信号通路阻断剂AG1478对子宫内膜癌的抑制作用;并且二甲双胍可能通过抑制EGFR磷酸化蛋白的表达从而抑制ERK蛋白的磷酸化进而抑制子宫内膜癌细胞的增殖。     

血脂康治疗早期糖尿病肾病36例观察

<正>糖尿病肾病是糖尿病患者主要并发症之一,也是造成终末肾功能衰竭的常见病之一。因此,早期调脂治疗对预防和延缓糖尿病肾病的发生和发展     

基于生物信息学方法对颅内动脉瘤破裂铁死亡相关特征基因的综合分析

目的 通过生物信息学方法综合分析颅内动脉瘤(IA)破裂特征基因,构建IA破裂风险的基因预测模型及药物调控靶点预测。方法 自美国国家生物信息中心基因表达综合(GEO)数据库中下载GSE13353和GSE122897数据集,分别用于筛选IA破裂的特征基因和验证。对IA破裂铁死亡相关的差异基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;通过LASSO回归和机器学习-支持向量机递归特征消除算法筛选出IA破裂的特征基因;通过受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC),评估特征基因模型对IA破裂预测的准确性;基因集富集分析(GSEA)量化特征基因和相关通路活性;对IA组织中免疫细胞的浸润情况以及与特征基因相关性进行分析;使用药物基因相互作用数据库(DGIDB)和Cytoscape软件构建IA破裂特征基因的药物调控网络。结果 自GEO数据库中下载了GSE13353数据集,其中未破裂IA患者8例,破裂IA患者11例。从FerrDb数据库下载铁死亡相关基因731个,去除非人类种属335个,最终获得铁死亡相关基因396个,对其进行差异分析后得到90个差异基因(...     

二甲双胍通过抑制p38MAPK信号通路逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性

目的:探讨二甲双胍是否能够逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,以及其可能的作用机制。方法:CCK-8法检测二甲双胍作用后卵巢癌细胞顺铂耐药株C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性变化,以及转染针对切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complemention 1,ERCC1)的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)后C13K和CP70细胞耐药性的变化。实时荧光定量PCR法检测不同浓度二甲双胍作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1基因表达的变化。蛋白质印迹法检测二甲双胍作用后C13K和CP70细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路的激活和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号通路的抑制情况,以及联合或不联合AMPK信号通路阻断剂Compound C作用后ERCC1蛋白的表达情况。同时,蛋白质印迹法检测p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后耐药细胞中ERCC1蛋白表达的变化,以及二甲双胍作用联合p38MAPK si RNA转染前后耐药细胞中ERCC1蛋白的表达变化。结果:二甲双胍能够逆转C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性(P<0.05)。二甲双胍作用能够降低C13K和CP70细胞中ERCC1 m RNA和蛋白的表达水平(P<0.05),并激活AMPK信号通路(P<0.05);而联合应用AMPK信号通路阻断剂Compound C可以阻断二甲双胍的这种作用(即ERCC1蛋白表达水平升高)(P<0.01)。p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1蛋白表达水平降低(P<0.05);而二甲双胍作用可降低p38MAPK的磷酸化水平(P<0.01),抑制p38MAPK信号通路。二甲双胍作用转染了p38MAPK si RNA的C13K和CP70细胞后,ERCC1蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:二甲双胍可能逆转卵巢癌顺铂耐药株对顺铂的耐药性,并且这一作用可能是通过抑制p38MAPK信号通路和降低细胞中ERCC1的表达而实现的。     

水动力辅助吸取成人脂肪来源干细胞的体外分离、培养和鉴定研究

目的:探索成人脂肪来源干细胞的体外分离、培养和鉴定的可行方法,为其广泛应用研究提供实验依据。方法:采用Body-jet水动力辅助吸脂系统自成人下腹部皮下脂肪丰厚区抽吸获取颗粒脂肪100ml,酶消化法分离、培养干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态并绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间。以第2代细胞进行免疫组织化学染色,鉴定其表面分子CD44表达。取3代细胞用含10%胎牛血清、1%青链霉素原液、1μmol/L地塞米松、l0μmol/L胰岛素、0.5mmol/L IBMX的高糖DMEM培养基中成脂诱导培养1周,观察细胞形态变化。2周后再进行成脂、成骨、成软骨、成肌诱导分化培养与鉴定。结果:成人脂肪组织中含有大量间充质干细胞,呈成纤维细胞样贴壁生长,细胞群体倍增时间约为60h;免疫组织化学染色鉴定CD44阳性;油红O染色、碱性磷酸酶染色、Ⅱ型胶原染色、肌浆球蛋白染色均呈阳性。结论:初步建立了一种自成人脂肪组织中分离、培养和鉴定脂肪来源干细胞的便捷方法,为其能够作为组织工程理想的种子细胞和广泛应用于临床提供了实验依据。     

一例重症疣状表皮发育不良整形外科方面的治疗体会

疣状表皮发育不良（Epidermodysplasiaverruciformis,EV）是一种常染色体隐性遗传皮肤疾患[1-2]。目前研究表明,遗传因素、免疫因素、环境因素及某些特定亚型的人乳头瘤病毒（Human papilloma virus,HPV）感染等与EV的发病有关,EV患者对特定亚型的HPV易感性明显增高,全身泛发扁平疣样和/或花斑癣样损害,日光暴露部位的皮损发生皮肤癌的危险性显著增高,其中大多数为鳞状细胞癌[3-6]。     

机械磨削联合铒激光磨削治疗泛发性表皮痣临床观察

目的：观察机械磨削联合铒激光磨削治疗泛发性表皮痣的疗效与安全性。方法：2008年3月～2010年3月,笔者对19例泛发性表皮痣患者先采用不锈钢磨头行真皮网状层浅层磨削治疗,2～3个月后对复发的表皮痣再联合铒（Er：YAG）激光磨削治疗,末次治疗后6个月复诊;根据表皮痣复发程度,分别评定为＂无效、轻度改善、中度改善、显著改善＂四级;有效率以轻度改善＋中度改善＋显著改善计,满意率以中度改善＋显著改善计。结果：19例患者均有疗效,其中轻度改善2例（10.53%）,中度改善6例（31.58%）,显著改善11例（57.89%）,有效率为100%,满意率为89.47%;继发并发症中色素沉着19例（100%）、色素减退4例（21.05%）、瘢痕增生1例（5.26%）。结论：机械磨削联合铒激光磨削是一种目前治疗泛发性表皮痣安全、有效的方法。     

双波长立体点阵激光治疗50例痤疮后遗凹陷瘢痕疗效观察

目的：评估双波长立体点阵激光治疗痤疮后遗凹陷瘢痕的效果和安全性。方法：以50例痤疮后遗凹陷瘢痕患者为研究对象,采用Cynosure-Affirm双波长（1320nm＋1 440nm）立体点阵激光修复治疗,1个疗程3～5次,每次间隔4周。末次治疗后1个月,根据对临床效果的观察和对照片的比较,按照凹陷瘢痕改善程度,分别评定为＂无效、轻度改善、中度改善、显著改善＂四级。有效率以轻度改善＋中度改善＋显著改善计,满意率以中度改善＋显著改善计,同时观察有无色素沉着、色素减退和瘢痕增生等并发症。结果：接受3～5个疗程治疗的患者分别有9例、17例和24例,50例患者均有疗效,其中轻度改善13例（26%）,中度改善26例（52%）,显著改善11例（22%）,有效率为100%,满意率为74%;无1例出现色素沉着、色素减退和瘢痕增生等并发症。结论：双波长立体点阵激光是一种目前治疗痤疮后遗凹陷瘢痕安全而有效的治疗方法。