高频重复经颅磁刺激对脑缺血后海马BDNF、VEGF和Nestin表达的影响

目的:研究高频重复经颅磁刺激(rTMS)对脑缺血大鼠缺血侧海马BDNF、VEGF和Nestin表达的影响。方法:SD雄性成年大鼠16只,随机分为模型组、rTMS组、rTMS+生理盐水(NS)组和rTMS+H89组各4只,rTMS+NS组和rTMS+H89组分别侧脑室注射NS和H89,4组均建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,除模型组外均给予7 d 20 Hz rTMS治疗,应用Western Blot方法检测缺血侧海马pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达。结果:rTMS组pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达较模型组均增加(P<0.05),rTMS+H89组pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达较rTMS+NS组均减少(P<0.05)。结论:高频rTMS能使脑缺血后海马区BDNF、VEGF表达增加,并进一步促进Nestin表达,PKA-CREB通路的调节可能是其机制之一。     

多功能颈椎康复治疗仪的研制及初步临床应用

目的:研制一种在仰卧位颈椎牵引下进行棘突后向前关节松动术的多功能颈椎康复治疗仪,并探索不同牵引力对关节松动的影响。方法:治疗仪设计采用机电一体化结构,由机架、颈椎关节松动装置、牵引装置、微电脑控制台和驱动器等组成。5年内无颈椎病病史的健康志愿者30例,给予治疗仪仰卧中立位持续牵引下关节松动,牵引力分别为0、3、5和7kg时,治疗仪针对C5棘突行后向前关节松动,作用力幅度为10～30N,频率为1Hz,记录实时作用力并测量机械手指在颈椎上的最大位移。结果:实时记录的最大和最小平均作用力分别为(27.52±0.58)N和(4.57±0.52)N,组内相关系数(ICC)均>0.99。不同牵引力时机械手指针对C5棘突关节松动的平均最大位移差异无统计学意义。结论:本文研制的新型多功能颈椎康复治疗仪实现了在仰卧位颈椎牵引下进行安全稳定的中央后向前关节松动,为颈椎病治疗提供了新的工具。     

乳脂球-表皮生长因子8对脑缺血后小胶质细胞极化的调控作用机制研究

目的 探寻乳脂球-表皮生长因子8（MFG-E8）在脑缺血后小胶质细胞极化的调控作用和作用机制。 方法 选取C57BL/6小鼠40只,采用随机数字表法将其为假手术组、缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林（Colivelin TFA）组,每组10只小鼠。缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林（Colivelin TFA）组制作大脑中动脉梗阻再灌注模型（tMCAO）,其中rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组小鼠在造模成功后立即进行脑梗侧侧脑室立体定位注射,分别给予总量2 μl,浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8和总量2 μl,浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8+总量2 μl,浓度5 pmol/μl的Colivelin TFA干预。造模成功1、3、5、7 d后采用行为学实验检测神经功能恢复情况,造模成功7 d后采用组织染色观察脑梗死灶体积比例,通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测小胶质细胞M1极化标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2极化标记物精氨酸酶1(Arg1)和小鼠类几丁质酶3样分子（Ym1)、MFG-E8的基因表达水平,通过免疫印迹实验检测MFG-E8、磷酸化信号转导与转录因子3（p-STAT3）和细胞因子信号传导抑制因子-3(SOCS3)蛋白表达水平。 结果 行为学检测发现,缺血组、rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组在造模成功1、3、5、7 d后的转棒时间和mNSS评分与假手术组同时间点比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。造模成功7 d后,与假手术组比较,缺血组MFG-E8基因和蛋白表达均显著降低（P<0.05）,M1极化标记物iNOS基因的表达显著增高（P<0.05),M2极化标记物Arg1和Ym1基因的表达显著下降（P<0.05）,p-STAT3/STAT3蛋白的表达显著上调（P<0.05),SOCS3/GAPDH蛋白的表达显著下调(P<0.05)。造模成功7 d后,与缺血组比较,rmMFG-E8组的梗死灶体积显著缩小（P<0.05）。造模成功7 d后,rmMFG-E8+Colivelin TFA组iNOS基因的表达较rmMFG-E8组明显增加（P<0.05),Arg1和Ym1基因的表达明显降低（P<0.05),p-STAT3/STAT3的表达显著上调（P<0.05),SOCS3/GAPDH的表达显著下降（P<0.05)。 结论 MFG-E8可通过STAT3信号通路促进脑缺血后小胶质细胞向M2型极化,促进脑缺血小鼠神经功能的恢复。     

rTMS对脑梗死大鼠记忆功能及海马IL-1的影响研究

目的:研究重复经颅磁刺激(rTMS)对脑梗死大鼠空间记忆功能的影响,并探讨其可能机制。方法:45只大鼠随机分为假手术组、对照组和rTMS组各15只,采用大脑中动脉栓塞再灌注(tMCAO)法制作脑梗死大鼠模型。采用Morris水迷宫评定学习记忆功能变化,通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)观察患侧海马白细胞白介素1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及梗死灶区(IL-1β)mRNA表达量。结果:与假手术组相比,对照组及rTMS组大鼠逃避潜伏期显著延长(P0.01),而rTMS组较对照组的逃避潜伏期则明显缩短(P0.05)。对照组、rTMS组IL-1βmRNA在患侧海马及皮层的表达量均较假手术组增高(P0.01),rTMS组患侧海马IL-1βmRNA表达较对照组显著增高(P0.01),患侧皮层IL-1βmRNA表达较对照组无明显变化。对照组、rTMS组iNOS、TNF-αmRNA表达量均较假手术组增高(P0.01),rTMS组与对照组无明显差异。结论:rTMS治疗可促进脑梗死后空间学习记忆功能恢复,并可能通过增加患侧海马区IL-1βmRNA表达来实现。     

颈椎后前向松动产生的椎间运动和生物力学分析

目的:通过影像学研究颈椎后前向松动产生的椎间运动,分析其生物力学作用。方法:选取正常受试者12例,均采用多功能颈椎康复治疗仪给予后前向颈椎关节松动,力量为10～30N;松动前后,采用静态颈椎侧位片,比较运动节段矢状面的角度旋转及前后椎间隙变化。结果:松动后,C3～C6节段矢状面旋转角度均大于松动前(P<0.05);C3、C5节段前椎间隙均显著大于松动前(P<0.05),C5节段后椎间隙显著小于松动前(P<0.05)。结论:后前向松动明显增加C3～C7脊柱的前凸,在伸展同时椎体产生旋转,前椎间隙增宽,后椎间隙减小。     

颈椎曲度测量方法进展与及临床意义

正常的颈椎曲度是维持有效运动功能的重要因素,颈曲异常引起的一系列椎体生物力学不平衡可导致颈椎退行性病变的进一步发展^[1]。颈椎侧位片测量颈椎曲度是临床上评价颈椎功能的基本方法和确定治疗方案和评价疗效的参考指数。     

不同频率重复经颅磁刺激对脊髓损伤大鼠运动功能的影响

目的:研究不同频率重复经颅磁刺激(rTMS)对不完全性脊髓损伤(SCI)大鼠运动功能的影响。方法:65只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、磁刺激5Hz组、10Hz组和20Hz组,每组13只。用Allen重物坠落法将模型组和磁刺激组制作成不完全性脊髓损伤模型。术后24h开始对磁刺激组实施rTMS治疗,刺激频率分别为5Hz、10Hz、20Hz,刺激强度均为90%运动阈值,刺激5s,间歇10s,共500个脉冲。每天1次,每周5d,连续4周,对照组不给予刺激。于术后第4周分别给予BBB行为学评分;检测运动诱发电位(MEP),记录潜伏时及波幅;并应用免疫组织化学法和Western blot法检测脊髓损伤处生长相关蛋白43(GAP-43)的表达情况。结果:BBB评分结果显示20Hz组大鼠分值最高,10Hz组次之,两者与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.01);10Hz组大鼠的MEP潜伏时最短,20Hz组次之,两者与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01);免疫组织化学及Western blot结果均显示10Hz组GAP-43表达量最高,20Hz组次之,两组与模型组比较差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:高频rTMS可促进不完全性脊髓损伤大鼠运动功能恢复,以10Hz频率为佳。     

高频重复经颅磁刺激对大鼠脑梗死后学习记忆功能及pCREB、bcl-2、bax表达的影响

目的:研究高频重复经颅磁刺激(rTMS)对脑梗死大鼠学习记忆的影响,并探讨其可能机制。方法:采用大脑中动脉栓塞再灌注方法建立脑梗死模型,给予7d的20Hz重复经颅磁刺激治疗,采用Morris水迷宫评定大鼠学习记忆功能变化,并观察磁刺激组与模型组、给予阻滞剂H89与给予生理盐水(NS)组间蛋白激酶A-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2(bcl-2)、bcl基因相关蛋白(bax)的表达变化。结果:①模型组大鼠与正常组相比逃避潜伏期明显延长(P=0.001),磁刺激组逃避潜伏期较模型组大鼠明显缩短(P=0.017)。②磁刺激组的pCREB和bcl-2表达较模型组增加(P0.01),bax则较模型组减少(P0.01),bcl-2与bax的比值磁刺激组大于模型组(P0.01)。rTMS+H89组的pCREB和bcl-2表达较rTMS+NS组降低(P0.01),bax的表达则较rTMS+NS组增加(P0.01),rTMS+H89组bcl-2与bax的比值较rTMS+NS组亦降低(P0.05)。结论:高频重复经颅磁刺激能够改善脑缺血后学习记忆功能并促进海马神经元的存活,抑制凋亡;磁刺激促进脑缺血后海马神经元存活的作用可能通过影响p-CREB通路的表达来实现。