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1.
目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-L sphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治疗实验研究单抗28C10联合顺铂对MHCC97-L移植瘤生长的作用。Western-Blot方法鉴定该单抗识别抗原的分子量。结果:流式细胞检测结果显示单抗28C10能够识别MHCC97-L中CD90阳性细胞的比例为2.75%。体外功能实验结果显示单抗28C10能显著抑制MHCC97-L sphere细胞的无血清成球能力和侵袭能力,抑制率分别达33.33%和53.8%。28C10能显著抑制MHCC97-L sphere的顺铂耐药能力,其IC50为0.74 μg/ml,而对照组的IC50为1.42 μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示,低、高剂量抗体28C10均能抑制肝癌移植瘤的生长,抑制率分别达到了24.0%和67.7%,单独顺铂组肝癌移植瘤的抑制率为35.9%,而顺铂联合高剂量抗体28C10组对肝癌移植瘤的抑制率达到70.1%。Western-Blot结果显示单抗28C10识别的抗原蛋白分子量约100 kD。结论:筛选获得了1株抗肝癌干细胞的功能性单抗,为靶向肝癌干细胞治疗肝癌奠定了重要的基础。 相似文献
2.
目的 评估盐酸戊乙奎醚对肺叶切除术患者单肺通气(OLV)时血清炎性因子和气道黏蛋白MUC5AC表达的影响。方法 择期行胸腔镜下肺叶切除术患者48例,男28例,女20例,年龄40~75岁,BMI 18~25 kg/m2,ASA Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法分为两组:对照组(C组)和盐酸戊乙奎醚组(P组),每组24例。P组于麻醉诱导前10 min静脉注射盐酸戊乙奎醚0.01 mg/kg,C组于相同时点静脉注射等容量生理盐水3 ml。分别于OLV前(T1)、OLV 60 min(T2)、术毕(T3)、术后24 h(T4)采集中心静脉血,采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB浓度;肺叶切除后即刻取肺组织,HE染色观察病理学结果;采用Image-Pro Plus图像分析软件进行图像分析,取平均积分光密度值表示气道黏蛋白MUC5AC含量。记录术后72 h内肺炎、肺不张、低氧血症等并发症及住院时间。结果 与T1时比较,T2—T4时两组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB浓度明显升高(P<0.05)。与C组比较,T2—T4时P组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB浓度明显降低(P<0.05),肺组织病理损伤明显减轻,气道黏蛋白MUC5AC含量明显下降(P<0.05)。两组术后72 h内肺炎、肺不张、低氧血症等并发症及住院时间差异均无统计学意义。结论 盐酸戊乙奎醚可下调肺叶切除术患者OLV时血清炎性因子和气道黏蛋白MUC5AC的表达,减轻炎症反应和肺损伤。 相似文献
3.
目的卵巢癌极易发生转移和耐药,严重影响患者预后。前期研究发现,同源盒基因MEOX1可能在肿瘤的转移中发挥着重要作用。但有关MEOX1在卵巢癌中的表达和功能尚罕见报道。本研究探讨MEOX1对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,及其在卵巢癌组织中的表达水平和临床意义。方法采用脂质体转染法将靶向MEOX1的特异性siRNA序列、无效序列分别转染至人卵巢癌细胞OAW28中,命名为实验(siMEOX1)组和阴性对照(siNC)组,同时设置空白对照(Control)组。采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测转染siRNA对人卵巢癌细胞OAW28中MEOX1的敲降效果。采用Transwell小室法检测细胞的体外迁移和侵袭能力。采用CCK8法检测细胞的体外增殖能力。采用免疫组织化学染色法检测购于西安艾丽娜生物科技有限公司的73例卵巢癌组织中MEOX1的表达水平。结果qPCR和蛋白质印迹结果显示,siMEOX1转染后,卵巢癌OAW28细胞中MEOX1表达水平明显降低,RNA水平敲降效率约72%。敲降MEOX1后卵巢癌OAW28细胞的增殖能力受到抑制,差异有统计学意义,F=59.217,P<0.001。此外迁移实验显示,siMEOX1组迁移细胞数(108.80±4.27)少于siNC组(230.20±5.63),差异有统计学意义,F=491.571,P<0.001。侵袭实验显示,siMEOX1组侵袭细胞数(217.80±3.49)低于siNC组(379.80±3.96),差异有统计学意义,F=712.267,P<0.001。免疫组化结果显示,MEOX1在卵巢癌组织中表达阳性率为60.3%(44/73)。临床关联性研究发现,MEOX1阳性表达与卵巢癌患者的转移具有关联性,χ^2=7.637,P=0.004;但与患者的年龄、TNM分期、病理分级无关联。结论MEOX1可促进人卵巢癌细胞的体外增殖和迁移侵袭能力,且MEOX1高表达与卵巢癌患者转移具有关联性,可能成为抑制卵巢癌转移的潜在靶点。 相似文献
4.
目的 利用3D FLAIR MRI比较经鼓室和静脉两种给药方法在梅尼埃病患者的迷路成像中的区别。方法 收集的36例单侧梅尼埃病患者,一组(18人)经双侧鼓膜分别注射等量的8倍稀释的Gd-DTPA,另一组(18人)经肘静脉注射GD-BOPTA(0.4ml/kg),分别在24h和4h后行内耳3D FLAIR MRI扫描。观察迷路显影情况,分别在双侧耳蜗底转增强区域及同层脑干画ROI,并分别计算两组耳蜗底转及同层脑干的信号强度比值(CM比值),并两两比较CM比值。记录两种方法显示耳蜗、前庭内淋巴积水情况。利用配对t检验分析两组CM比值有无差异,利用卡方检验分析两组显示内淋巴积率的差异。结果 经静脉组患耳CM 比值(1.46±0.31)高于正常耳(1.26±0.21,P=0.001)。经鼓室组患耳CM 比值(1.87±0.76,n=18)高于经静脉组CM 比值(1.46±0.31,n=18;P=0.044)。结论 根据病人临床特点、临床需求选择适合的给药方法以观察内耳影像。 相似文献
5.
目的:应用基于UPLC-MS/MS的细胞代谢组学研究策略,从肿瘤细胞整体层面探究薯蓣皂苷元的抗肿瘤作用机制。方法:采用噻唑蓝法考察薯蓣皂苷元对12种肿瘤细胞的抑制作用,获得相应的半抑制浓度(IC_(50)),检测分析薯蓣皂苷元干预48 h后细胞内的代谢物,采用化学计量学和多维数据统计方法比较干预后的细胞与空白组细胞代谢物的差异,并分析其代谢通路。结果:在薯蓣皂苷元的干预下,细胞内共有11种代谢物发生了显著变化,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,氨酰-tRNA的生物合成,谷氨酰胺和谷氨酸代谢,嘌呤代谢,精氨酸和脯氨酸代谢5条代谢通路;薯蓣皂苷元对于不同细胞系的抑制作用差异显著。结论:该研究丰富了薯蓣皂苷元的体外抗肿瘤谱,在体外细胞水平和代谢通路上提供了该药物抗肿瘤作用的可能机制,为薯蓣皂苷元的后续肿瘤药理学研究提供实验依据。 相似文献
6.
目的寻求一种适用于从风干和腐败的鼠类标本提取DNA的有效办法。方法采用改进的毛囊酚-氯仿抽提法、水煮抽提法、酚-氯仿抽提法、Chelex-100法和硅珠法,对风干和腐败的鼠毛、皮张和骨骼等材料进行DNA提取。提取后的DNA经PCR扩增、测序判定鼠类陈旧标本DNA提取方法的有效性。结果新鲜鼠类标本用上述方法能从毛、皮张和骨骼中提取到满足实验要求的DNA,风干标本可以用酚-氯仿抽提法纯化从皮张中获得高质量的DNA;而对于腐败标本,可用Chelex-100法从骨骼中获得质量较好的DNA。结论选择适当的方法,可以从自然环境中风干或腐败的鼠类标本中提取到高质量的DNA满足后续研究的需要。 相似文献
7.
目的调查江苏各口岸常见蚊虫中沃尔巴克氏体(Wolbachia)的感染情况及其系统发育关系,为基于Wolbachia的防控策略奠定基础。方法 2015年6-9月采用诱蚊灯法和二氧化碳诱捕法在江苏省苏州、常州、无锡、南京、南通、扬州、泰州、连云港、徐州和淮安10个口岸地区诱捕蚊虫,提取单只蚊虫的DNA,PCR扩增后检测蚊虫Wolbachia wsp基因,计算感染率;并对所有wsp基因进行测序及系统发育分析。结果共检测江苏省10个口岸地区的5种常见蚊虫,Wolbachia总感染率为26.80%,以尖音库蚊复合组感染率(47.81%)最高,其次为骚扰阿蚊(46.24%)、白纹伊蚊(34.06%)和三带喙库蚊(1.25%),而中华按蚊未见感染。这些蚊虫的Wolbachia wsp基因共享10个单倍型,其遗传距离在0.002~0.263之间。Hap-1、Hap-7、Hap-8、Hap-9和Hap-10为同种蚊虫所独有,而Hap-2、Hap-4和Hap-5在江苏不同口岸蚊虫中出现的频率较高,在2~3种蚊虫间共享。其中Hap-1和Hap-2属A大组Wolbachia,而其余单倍型属B大组Wolbachia。结论江苏各口岸常见蚊虫共携带2种Wolbachia,其在蚊虫种内、种间分布多样,基本掌握了江苏不同口岸蚊虫Wolbachia的感染情况,是将来基于Wolbachia特性对蚊媒及蚊媒病控制的关键。 相似文献
8.
目的:筛选识别肝癌干细胞的单克隆抗体并研究其体外的抗肿瘤作用,为肝癌干细胞靶向治疗提供候选抗体药物。方法:无血清悬浮培养及PKH26染色分析人肝癌细胞株MHCC97H中是否存在肝癌干细胞。流式细胞术检测MH-CC97H细胞及其成球细胞中7种肿瘤干细胞标志物的表达,以及MHCC97H细胞中肝癌干细胞标志物CD90和不同杂交瘤单抗3G7、4F11、11C9、15B7、15D2识别抗原的共表达情况。无血清悬浮培养法和CCK8法检测单抗4F11对MHCC97H细胞及其成球细胞自我更新和增殖的影响,Transwell实验检测单抗4F11对MHCC97H细胞体外侵袭和迁移的影响。结果:PKH26染色实验显示,MHCC97H细胞球体由单个肝癌干细胞增殖分化形成。MHCC97H细胞球中CD90+MHCC97H细胞比例较亲本MHCC97H细胞显著增加[(18.0±7.5)%vs(2.3±1.0)%,P<0.05]。杂交瘤单抗4F11、3G7、11C9、15B7、15D2均能识别MHCC97H细胞中CD90+MHCC97H细胞,其中单抗4F11对CD90+MHCC97H细胞的识别比例为(47.2±4.4)%,其对MHCC97H成球细胞增殖的抑制率远大于对亲本MHCC97H细胞增殖的抑制率[(29.4±3.8)%vs(12.0±2.2)%,P<0.05]。单抗4F11抑制MHCC97H细胞成球,抑制率达(58.0±20.8)%。单抗4F11能显著抑制MHCC97H细胞体外侵袭和迁移,抑制率分别为(48.6±5.1)%和(47.6±3.6)%。结论:杂交瘤单抗4F11能特异性识别CD90+肝癌干细胞,抑制肝癌细胞的侵袭和迁移,可作为肝癌干细胞靶向治疗的候选抗体药物。 相似文献
9.
目的探讨轻型与肺炎型H1N1甲型流感临床特点及实验室检查结果异同,为早期诊断肺炎型甲型流感提供依据。方法对承德市2009年9—12月经证实的206例甲型H1N1流感(全部)患者进行血常规、生化全项、胸部X线检查,疑为肺炎者进一步检查胸部CT。根据X线胸片有无片状阴影将全部患者分为轻型与肺炎型两组。结果肺炎组以0~7岁组和≥46岁组发病率最高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。轻型组(19.9%)血白细胞总数低于正常人数百分比小于肺炎组(34.0%),差异有统计学意义(P=0.04),轻型组(77.6%)白细胞正常人数百分比大于肺炎组(50.0%),差异有统计学意义(P<0.001)。白细胞分类:肺炎组(60.0%)中性粒细胞比率高于正常人数百分比大于轻型组(42.9%),差异有统计学意义(P=0.036);肺炎组(28.0%)单核细胞比率低于正常人数百分比大于轻型组(5.1%),差异有统计学意义(P<0.001)。肺炎组(22.0%)血小板低于正常人数百分比大于轻型组(4.5%),差异有统计学意义(P=0.001)。肺炎组(20.0%)血红蛋白低于正常人数百分比大于轻型组(1.3%),差异有统计学意义(P<0.001)。血电解质:肺炎组血钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)低于正常人数百分比超过轻型组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清酶学检查发现除了肌酸激酶(CK)以外,肺炎组血清酶学高于正常人数比率均较轻型组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲型H1N1发病年龄以8~45岁年龄组人群为高,但肺炎型患者则以0~7岁和≥46岁年龄组为多,性别对病情轻重可能没有影响。白细胞总数低于正常、中性粒细胞比率高于正常提示易患肺炎型H1N1流感。单核细胞比率、血小板计数、血红蛋白低于正常易患肺炎型H1N1流感。血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶高于正常,提示易出现肺炎型H1N1流感。 相似文献
10.
目的通过基因分析,建立江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库和进化树,为口岸常见鼠形动物进行分子鉴定奠定基础。方法通过基因扩增、构建质粒载体、测序等方法,建立江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库。结果获得了褐家鼠、黄胸鼠、小家鼠、黑线姬鼠和大麝鼩等5种鼠形动物全长Cytb基因,并建立了5种鼠形动物Cytb基因进化树。结论建立了江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库和进化树,为实现部分鼠形动物的分类鉴定奠定了基础。 相似文献