脂肪基质细胞移植治疗杜氏型肌营养不良的临床观察

目的：观察脂肪基质细胞（ADSCs）移植治疗杜氏型肌营养不良（DMD）前后血清酶学变化及临床效果。方法：选择2009-06～2011-06莱芜市人民医院神经内科DMD患者,其中男性48例,女性3例;年龄1～20岁,平均年龄13.3岁。阳性家族史22例。经莱芜市人民医院伦理委员会同意,并征求患者本人及家人签字同意后,进行自体ADSCs移植治疗,设自身治疗前后血清酶学变化对照方法进行疗效观察,应用四肢肌内注射的方式进行ADSCs移植。结果：ADSCs移植治疗12个月肌力增加者占患者总数的64.8%。血清肌酸激酶（CK）降低率80.4%,血清乳酸脱氢酶（LDH）降低率78.4%。结论：ADSCs移植治疗DMD,对肌肉组织有一定的修复作用,使DMD患者的运动功能得到改善,肌力有所提高,血清酶学较移植前下降。ADSCs移植无不良反应,患者依从性好,是治疗DMD的新手段。     

尤瑞克林联合持续泵入普通肝素治疗进展性脑梗死的临床观察

进展性脑梗死是指脑梗死发病后神经功能缺失症状较轻微,但呈渐进性加重,在48h内仍不断进展,直至出现严重的神经功能缺损.它是多种原因、多种机制共同参与的复杂状态,发病率23-46％,其致死率和致残率均高[1-2].进展性脑梗死患者病情相对进展缓慢,及时有效控制病情进展,是减少患者神经功能缺失,减少后遗症、提高生活质量的关键.尤瑞克林是从健康男性尿液中提取精制的糖蛋白,它能选择性扩张脑细小动脉,改善缺血脑组织血供和氧供,同时还能促进缺血区新生血管的生成.该药在我国被批准为治疗脑梗死Ⅰ类新药,我院自2010年应用尤瑞克林联合持续泵人普通肝素治疗进展性脑卒中,取得良好疗效,现报告如下.     

不同剂量的神经节苷脂对人脂肪组织来源的基质细胞分化为神经组织细胞的影响

目的 探讨不同剂量的神经节苷脂(GM1)对人脂肪组织来源的基质细胞(ADSCs)分化为神经组织细胞的影响.方法 分离培养人ADSCs,采用神经诱导培养基(NIM)加不同剂量的GM1对各组进行诱导培养.实验分6组:对照组,只加改良Eagle培养液(α-MEM);A组,神经诱导培养基(NIM);B组,NIM加50 μmol/L GM1;C组,NIM加100 μmol/L GM1;D组,NIM加200 μmol/L GM1;E组,NIM加400 μmol/L GM1.诱导后1 h、5 h、1 d和5 d倒置相差显微镜下连续观察各组细胞生长情况和形态变化;免疫组化法鉴定各组神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管联合蛋白-2(MAP2)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果 (1)诱导后,ADSCs可分化为神经细胞,在一定的时间内,分化的神经细胞数逐渐增加,于诱导后5 h、1 d和5 d E组增加更明显(均P<0.05).(2)各组Nestin的表达随时间逐渐增强,1 d时表达最高,5 d时表达减弱,除1 h外,其余各时间点E组表达最高(均P<0.05);NSE和MAP2 的表达随时间逐渐增强,5 d时表达最高,各时间点E组表达最高(均P<0.05);GFAP的表达随时间逐渐增强,5 d时表达最高,各时间点E组表达最低(均P<0.05).结论 GM1可促进人ADSCs向神经细胞分化,并呈剂量依赖性.     

急性脑梗死患者IL-18基因启动子607C／A、137G／C位点多态性观察

目的观察急性脑梗死患者白细胞介素18（IL-18）基因启动子607C／A和137G／C位点单核苷酸多态性（SNP）。方法采用型特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）技术检测98例脑梗死患者（观察组）和100例健康对照者（对照组）血清IL-18基因启动子607C／A和137G／C位点多态性。结果两组607C／A位点基因型CC、CA和AA的频率及等位基因频率相比P均〉0．05。观察组组137G／C位点GG型频率显著高于对照组,GC型的频率显著低于对照组（P〈0．05）,两组等位基因频率的分布也有显著性差异（P〈0．05）。结论急性脑梗死患者IL-18基因启动子607C／A位点SNP与脑梗死无关,137G／C位点携带等位基因C可能有预防急性脑梗死的作用。     

夜间血压变化对hs—CRP及心功能指标的影响

目的探讨高敏C反应蛋白（hs—CRP）、B型尿钠肽（BNP）与夜间血压变化的关系。方法将60例高血压患者根据夜昼血压比值分为异常组及正常组,检测血清hs-CRP、BNP水平,超声心动图测算E／A值、左室射血分数（LVEF）,监测24h血压。结果夜昼血压比值异常组较正常组hs-CRP、BNP明显升高（P〈0．01）。夜昼血压比值与hs—CRP、BNP、E／A、LVEF均呈显著正相关（r分别为0．696、0．573、0．421、0．493,P均〈0．01）。结论夜间血压异常对hs—CRP、BNP有明显影响,说明夜昼血压比值异常的高血压患者较正常患者其发生动脉粥样硬化的危险更高,心功能下降更明显。     

脂肪基质细胞诱导分化为神经元细胞的实验***

背景：寻找合适的种子细胞是移植治疗脑血管疾病及其他中枢神经系统疾病的关键。 目的：观察人脂肪组织来源的基质细胞分化为神经元细胞的能力。 方法：脂肪组织取自要求去除腹部多余脂肪的健康成人,供者无传染性疾病和内分泌疾病。分离培养脂肪组织来源的基质细胞,采用神经诱导培养基加GM1对其进行诱导培养。倒置相差显微镜下连续观察细胞生长情况和形态变化,免疫组织化学法鉴定神经前体细胞的特异性标志神经巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2的表达情况。 结果与结论：①经神经诱导培养基加GM1诱导后,分化后的细胞大部分呈典型的神经元样细胞形态。②倒置相差显微镜下可见,于诱导后1 h出现神经巢蛋白表达阳性,5 h出现神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2表达阳性。提示脂肪基质细胞可分化为神经元细胞,分化后的神经元细胞具有表达神经巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2的功能。     

神经节苷脂诱导人脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞的分化

目的:探讨神经节苷脂诱导人脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞分化的可能作用。方法:实验于2004-09/2005-09在华北煤炭医学院中心实验室完成。选取人体腹部皮下脂肪组织20mL,对脂肪组织提取物进行分离培养,分别采用对照组、神经诱导培养基组、神经诱导培养基加神经节苷脂100μmol/L和神经节苷脂100μmol/L组,对其进行诱导培养。采用倒置相差显微镜连续观察原代及传代后的细胞生长情况及形态变化。采用免疫组化法检测神经前体细胞的特异性标志神经巢蛋白,神经细胞的特异性标志神经元特异性烯醇化酶、微管联合蛋白2和神经胶质细胞的特异性标志胶质纤维酸性蛋白的表达。结果:①原代细胞情况:24h后大量细胞贴壁,呈宽大扁平的成纤维细胞形态,细胞核浆分界清楚,多为单核,随培养时间的延长,大部分细胞呈集落生长,并迅速增殖,集落大小不一,集落中的细胞呈典型的梭形细胞,集落之间互相靠近,一周后可达到80%融合,呈漩涡状排列。②传代细胞情况:呈圆形,悬浮状态,并很快贴壁,并分布均匀,与原代细胞相比,细胞形态更为单一,呈典型梭形。③神经细胞特异性标志测定:对照组和神经节苷脂100μmol/L组仅见极少量的神经前体细胞的特异性标志神经巢蛋白表达阳性,神经元特异性烯醇化酶、微管联合蛋白-2和胶质纤维酸性蛋白表达阴性。神经诱导培养基组和神经诱导培养基组加神经节苷脂组于诱导后1h出现Nestin表达阳性,5h出现神经元特异性烯醇化酶、微管联合蛋白2和胶质纤维酸性蛋白表达阳性。在一定时间内,上述指标表达强度随时间逐渐增加,但神经诱导培养基组加神经节苷脂组与神经诱导培养基组比较,神经巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和微管联合蛋白2表达阳性率增加,胶质纤维酸性蛋白表达阳性率降低,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:神经节苷脂具有增强神经诱导培养基的诱导作用,并促进人脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞分化。     

培元通脑胶囊治疗缺血性中风恢复期神经功能缺损的康复效果及作用机制

目的:探讨培元通脑胶囊对缺血性中风恢复期神经功能缺损的康复效果,并从改善微循环、抗炎和神经保护方面探讨了其作用机制。方法:将131例患者随机按数字表法分为对照组66例和观察组65例。对照组进行康复治疗,口服阿司匹林肠溶片,0.1 g·d-1;和辛伐他汀片,10 mg·d-1;并采用经皮神经电刺激仪,30 min/次,1次/d,5次/周,共治疗30次。观察组西医治疗及康复理疗措施同对照组,并加服培元通脑胶囊,3粒/次,3次/d。两组疗程均为连续治疗12周。于治疗前、治疗后4,8,12周进行美国国立卫生院神经功能缺损(NIHSS)评分;进行治疗前后日常生活活动能力量表(ADL),平衡能力量表(BBA),运动能力量表(FMA)和中医证候评分;检测治疗前后脑源性神经营养因子(BDNF),神经元特异性烯醇化酶(NSE),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),同型半胱氨酸(Hcy)和血清胱抑素-C(Cys-C)水平;检测治疗前后血液流学指标[全血黏度、高切还原黏度、低切还原黏度、血浆黏度、血小板聚集率、纤维蛋白原(FIB)和血液沉降率(ESR)]。结果:观察组在治疗后8,12周,NIHSS评分均低于对照组(P0.01);治疗后观察组NIHSS评分下降幅度多于对照组(P0.01);观察组ADL,BBA,FMA评分均高于对照组(P0.01),中医证候评分低于对照组(P0.01);观察组BDNF水平高于对照组(P0.01),NSE水平低于对照组(P0.01);观察组IL-6,TNF-α,Hcy和Cys-C水平均低于对照组(P0.01);观察组血液流变学指标(血黏度、高切还原黏度、低切还原黏度、血浆黏度、血小板聚集率,FIB和ESR)均低于对照组(P0.01);经秩和检验,观察组临床疗效优于对照组(P0.05)。结论:培元通脑胶囊可促进缺血性中风恢复期(肝肾不足,风痰瘀阻证)神经功能缺损的康复,具有调节炎症因子、改善血液流变和神经功能保护作用,可增加常规西医康复治疗的效果。     

丁苯酞软胶囊联合盐酸多奈哌齐治疗轻度认知功能障碍的效果观察

目的观察丁苯酞软胶囊联合盐酸多奈哌齐治疗轻度认知功能障碍的疗效。方法选择2009年11月至2012年12月我院收治的轻度认知功能障碍患者82例,随机分为观察组与对照组,各41例。观察组服用丁苯酞软胶囊联合盐酸多奈哌齐,对照组单独应用盐酸多奈哌齐。两组患者均于治疗前和治疗后12周各进行1次简明精神状态检查表(MMSE)及P300检测,并检测治疗后的不良反应。结果对照组总有效率为75.61%,观察组总有效率为90.24%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组患者治疗后与治疗前相比MMSE的评分显著提高,而观察组较对照组显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后与治疗前相比,P300波幅均上升,潜伏期均有所缩短,但观察组变化较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞软胶囊联合盐酸多奈哌齐治疗轻度认知功能障碍与单用盐酸多奈哌齐相比效果更为显著,能有效改善轻度认知功能障碍患者脑部活动状态以及患者认知能力,且安全性良好。