抗铜绿假单胞菌 PcrV 蛋白单克隆抗体的筛选和功能验证

目的:获得能应用于治疗铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染的抗PcrV 蛋白全人源单克隆抗体。方法:以铜绿假单胞菌PAO1 基因组为模板,PCR 扩增PcrV 基因并构建重组表达载体pET-28a-PcrV,转化至大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG 诱导表达,并通过镍离子螯合树脂亲和纯化PcrV 蛋白。利用噬菌体抗体库筛选PcrV 结合的噬菌体克隆并进行序列测定,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR 扩增该抗体的重链可变区基因和轻链可变区基因并构建重组表达载体转染至293E 细胞,收取培养细胞上清,并利用Protein A 树脂亲和纯化抗体。利用ELISA 实验检测抗体亲和力,并通过小鼠铜绿假单胞菌感染肺炎模型验证抗体活性。结果:获得重组蛋白PcrV,通过噬菌体展示技术筛选并制备了一株全人源抗PcrV单克隆抗体YG5。ELISA 实验结果表明YG5 抗体具有较高的亲和力(EC50 =61 ng/ ml),进一步的实验结果表明,YG5 能有效抵抗铜绿假单胞菌感染,降低小鼠的死亡率。结论:靶向铜绿假单胞菌PcrV 蛋白的全人源单克隆抗体YG5 能够有效地抑制铜绿假单胞菌致病性,降低其对机体感染,有可能成为抗铜绿假单胞菌感染的治疗性抗体。     

miR-221对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究高表达miR-221对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的分子机制.方法 将18只裸鼠按照随机区组法分成3组:SH-SY5Y组(空白对照组)、miR-221-up组(实验组)和miRNA-NC组(阴性对照组),分别接种SH-SY5Y细胞、稳定转染miR-221的SH-SYSY-miR-221细胞及稳定转染对照质粒的SH-SY5 Y-miRNA-NC细胞,观察裸鼠体内成瘤及生长情况,30 d后处死取瘤体测量肿瘤体积、质量;qRT-PCR检测各组肿瘤组织中miR-221和MYCN mRNA水平的表达;Western blot和免疫组织化学法检测肿瘤组织中MYCN蛋白的表达水平.结果 与SH-SY5Y组相比,miR-221-up组裸鼠的瘤体体积和质量明显增加(P＜0.01),miRNA-NC组无统计学差异(P＞0.05);与SH-SY5Y组相比,miR-221-up组中miR-221、MYCN mRNA以及MYCN蛋白的表达明显升高(P＜0.01),而miRNA-NC组与SH-SY5Y组相比无统计学差异(P＞0.05).结论 miR-221可能通过上调MYCN的表达,促进SH-SY5Y细胞在裸鼠体内的生长.     

脑出血患者自杀意念风险因素分析及干预研究

目的探讨脑出血患者自杀意念相关风险因素及合理情绪疗法的预防作用。方法选取脑出血患者100例,通过路径的方法收集患者一般信息、出血量、出血位置,入院时应用美国国立卫生研究院中风量表(NIHSS)评分评估脑出血严重程度,采用焦虑自评量表(SAS)评定焦虑程度,通过自杀意念量表(SSI)评定患者是否存在自杀意念,通过logistic回归分析自杀意念的独立危险因素,采用卡方检验检测自杀意念患者在合理情绪疗法干预组和非干预组中的分布。结果 NIHSS评分和SAS评分是出血性卒中患者的自杀意念的独立危险因素(OR=9.336,95%CI=2.972～29.328,P 0.001; OR=1.674,95%CI=1.231～2.276,P=0.001)。合理情绪疗法干预组的自杀意念发生率显著低于非干预组(11.1%比55.6%; OR=0.600,95%CI=0.101～3.548,P=0.012)。结论对于脑出血后伴有焦虑情绪的患者及早采用合理情绪疗法,可显著减少患者自杀意念的产生。     

神经母细胞瘤中 MYCN 相关长链 非编码核糖核酸的功能研究

〔摘 要〕 目的：筛选神经母细胞瘤（NB）中 MYCN 相关的长链非编码核糖核酸（lncRNA），分析其功能及对患者预 后的影响，寻找潜在治疗靶点和分子标志物。 方法：分别从 TARGET 及 GEO 数据库下载基因表达数据，并将两组数据分 成 MYCN 高表达组和低表达组，R 语言筛选出两组差异表达 lncRNA，取共同差异表达 lncRNA；通过 ENCORI 数据库预 测与 lncRNA 互作的核糖核酸（RNA），DAVID 数据库分析相关基因的功能与信号通路的富集情况；TARGET 数据库进行 相关生存分析。 结果：TARGET 数据库中共筛选出差异倍 数在两倍以上的 lncRNA 1104 个，GEO 数据库筛选出差异基因 2849 个，两个数据库中共同差异表达 lncRNA 59 个，ENCORI 数据库预测与这些基因互作 mRNA 547 个，功能分析发现这 些基因主要富集在调控神经系统疾病的相关通路，并通过调控转录、蛋白绑定等发挥相关生物学功能。利用 TARGET 数据 库进行生存分析发现其中 VPS9D1–AS1、LINC00649、LINC01234 的异常表达可以影响患者生存。 结论：运用生物信息学 通过对 MYCN 相关差异表达 lncRNA 的分析发现 VPS9D1–AS1、LINC00649、LINC01234 可能与 NB 的发生发展密切相关， 可为后续的研究提供方向与思路。     

综合心理护理应用于精神分裂症患者的效果分析

目的 研究综合心理护理对精神病症患者的效果。方法 将 2021 年 4 月至 2023 年 3 月到我院治疗的 85 例精神分裂症根 据入院的时间先后顺序分为对照组（43 例）和观察组（42 例）。对照组实施常规护理，观察组实施综合心理护理。比较两组的 负性情绪，生活质量和满意度。结果 观察组的焦虑抑郁评分低于对照组（P<0.05）。观察组的生活质量高于对照组（P<0.05）。 观察组的护理满意度高于对照组（P<0.05）。结论 对精神分裂症的患者在开展常规护理的基础上实施综合心理护理，可以帮助 患者提升疗效，改善患者的抑郁心理，值得推荐。