无锡市HIV-1毒株耐药基因突变的调查研究

目的 了解无锡市人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（human immunodeficiency virus 1,HIV-Ⅰ）/获得性免疫缺陷综合症（acquired immunodeficiency syndrome,AIDS）人群耐药基因变异的流行情况。方法 收集2012年10月~2013年6月无锡市HIV-1/AIDS人群血标本343例,提取前病毒DNA,采用巢式聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增HIV-1 pol区基因片段并测定编码蛋白酶和部分逆转录酶的基因序列,将序列提交至美国斯坦福大学HIV耐药数据库,进行耐药基因突变分析。结果 最终有279例成功扩增并获得了pol基因序列,共发现36例存在耐药基因突变,未用药人群的耐药率为1.8%（4/220）,用药人群的耐药率为16.9%（10/59）。耐药突变主要包括D30N、L90M、K65R、M184I/V、K103N和Y181C等点突变所引起的不同类型抗病毒药物的高度或中度耐药,而其他耐药突变则引起低度或潜在低度耐药。结论 该地区HIV-1耐药株的传播尚处于低流行态势,耐药突变主要由已有抗病毒药物的使用所诱发,然而药物间的交叉耐药及耐药株的传播警示该地区应加强HIV-1/AIDS人群的耐药监测。     

现有液体培养法检测解脲脲原体效果的评价

目的以固体培养基为金标准,对现有液体培养法进行评价,并进一步探讨改良的方法。方法用液体培养基、新型固体培养基及梅里埃培养基平行检测63例临床宫颈分泌物试子,根据灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率等指标对现有液体培养法、梅里埃培养基检测Uu的效果进行评价。结果液体培养法Uu检出率为36.7%,梅里埃培养基Uu检出率为66.7%,新型固体培养基Uu检出率为84.1%。以固体培养基为金标准,液体培养法的灵敏度较低(42.0%),假阴性率较高(58.0%),特异度尚可(90.0%)。梅里埃培养基检测Uu的灵敏度(72.9%)明显优于液体培养法(42.0%)。结论有过滤步骤的传统液体培养法的假阴性率过高,考虑改良现有液体培养基,提高检测支原体的真实性和可靠性,建立方便使用且结果真实可靠的检测Uu的方法。     

无锡人群KIR3DS1基因与HIV-1感染的病例-对照研究

目的探讨无锡地区人群的KIR3DS1基因是否影响HIV-1易感性及与疾病进程的关系。方法收集并调查343例HIV-1/AIDS患者及354例体检健康者的临床资料及样本,用PCR-SSP法检测其KIR3DS1基因表达水平;根据多次CD4+T淋巴细胞计数的随访记录,对HIV/AIDS人群进行病程进展分组(缓慢进展组与典型进展组),采用非条件Logistic回归分析KIR3DS1基因与HIV-1易感性及疾病进程间的关系。结果病例组与对照组的KIR3DS1基因检出率分别为37.0%(127/343)和52.5%(186/354),对应的基因频率分别为0.206和0.311,两者间差异有统计学意义(χ2=16.952,P=0.000)。调整性别和年龄因素后,单因素Logistic回归分析发现KIR3DS1基因可降低HIV-1的易感性(OR=0.498,95%CI:0.363~0.685)。调整性别、年龄及感染途径等因素后,多因素Logistic回归分析发现KIR3DS1基因可抑制HIV-1/AIDS患者的疾病进程(OR=0.343,95%CI:0.137~0.860)。结论携带KIR3DS1基因可能降低无锡地区HIV-1的易感性,抑制HIV-1/AIDS患者的疾病进程。     

南京市MSM人群HIV新发感染情况及影响因素分析

目的 了解南京市男男性行为人群（men who have sex with men,MSM）人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）新发感染率及其影响因素。方法 2013年4~8月在江苏省疾病预防控制中心健康咨询中心门诊基线招募MSM,2013年10月~2014年2月对不同时间进入队列的研究对象进行6个月的随访后,同时加入新MSM。基线及随访阶段均进行问卷调查和HIV、梅毒、单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus 2,HSV-2）等血清学检测。结果 基线共招募MSM 370名,HIV感染率为12.97%,在第6个月随访时,共随访到225人,随访阶段新入队列256名MSM,双向队列中MSM人群HIV新发感染率为8.40/100人年。多因素Cox回归分析显示,最近一年患过尖锐湿疣（HR=5.730,95% CI：1.351～24.312）、梅毒现症感染（HR=4.807,95% CI：1.838～12.573）均是HIV新发感染的危险因素。交互作用分析发现,尖锐湿疣合并梅毒或HSV-2感染时比单独或没有感染这两种性传播疾病（sexually transmitted disease,STD）时,HIV感染的风险大,且这三种STD分别与同伴教育存在时,同伴教育可降低STD原有的致HIV感染的风险。结论 南京市MSM人群HIV新发感染率较高,且梅毒、尖锐湿疣等性传播疾病可增加HIV新发感染的风险。     

无锡市2013-2016年HIV-1亚型及进化分析

目的了解无锡市HIV-1亚型流行及进化特征,为预测本地HIV-1疫情变化提供参考依据。方法样本来源于2013年4月至2016年7月无锡市部分CD4+T淋巴细胞监测队列,进行HIV-1基因的扩增和测序,采用ChromasPro 1.6和MEGA 7.0软件构建HIV-1序列数据库;采用FastTree 2.1.10和BEAST 1.7.2软件和贝叶斯系统进化推断法重构HIV-1历史传播情况,采用SPSS 22.0软件进行统计学分析。结果有205例HIV-1感染者,其中≥50岁占32.68%(67/205)。共检测出CRF01_AE、CRF07_BC、CRF67_01B、B、CRF08_BC、CRF68_0B、CRF78_cpx 7种HIV-1基因型及1例独特重组型。流行亚型以CRF01_AE(51.67%,93/180)及CRF07_BC(17.22%,31/180)为主,不同亚型之间传播方式的差异有统计学意义(χ2=16.99,P≤0.05)。CRF67_01B型(12.78%,23/180)所占比例较高。贝叶斯系统进化推断法分析结果显示,无锡市CRF67_01B型进化率为2.29×10-3,最近共同祖先时间约为2003.10年,与江苏省及安徽省来源的参考株可能存在亲缘关系,CRF67_01B型于2003年开始在无锡市出现传播。结论2013-2016年无锡市HIV-1亚型复杂多样,CRF67_01B型已经开始在无锡市流行,应持续监测HIV-1亚型变化,从分子角度为疫情预测提供参考依据。     

云南省河口瑶族自治县2014-2015年嫖客HIV感染相关因素分析

目的 了解2014-2015年云南省红河哈尼族彝族自治州河口瑶族自治县（河口县）嫖客HIV感染、相关危险行为及相关因素。方法 2014年6月至2015年11月在云南省河口县开展4次连续横断面调查,采用方便抽样方式招募嫖客作为研究对象。调查问卷收集嫖客人口学特征、性行为及吸毒行为等信息;采集血液和尿液样本检测HIV/STD及毒品使用。多因素logistic回归与Exhaustive CHAID分类树模型分析嫖客HIV感染相关因素。采用SPSS 22.0和Clementine 12.0软件进行统计学分析。结果 4次调查共有776名嫖客,HIV感染率为2.06%（16/776）,与商业性性伴发生性行为时坚持使用安全套的嫖客占68.81%（534/776）。相比中国籍嫖客,越南籍嫖客吗啡阳性率较高且最近1个商业性性伴均为越南籍暗娼。多因素logistic回归分析结果表明,年龄≥ 50岁（与<30岁者相比,OR=8.11,95% CI：1.26~52.16）和吗啡尿检阳性（与吗啡尿检阴性者相比,OR=7.35,95% CI：1.42~38.06）是嫖客HIV感染风险的危险因素。分类树模型判断年龄≥ 50岁是男性嫖客HIV感染的首要相关因素。结论 云南省河口县嫖客的HIV感染风险受到毒品与商业性性行为的双重影响;≥ 50岁嫖客HIV感染率较高,干预工作需关注嫖客年龄较大者。     

南京市高校大一新生生殖健康知识、态度和行为调查

生殖健康指的是人类生殖系统及其功能和过程所涉及的一切事宜上,包括躯体、精神和社会等方面的完好状态,不仅仅是指无病或者虚弱[1].大学生作为一群特殊的青少年群体,生殖健康问题和需求也有其独特性,包括不安全性行为、意外妊娠、艾滋病与性病蔓延、人际关系困难、青春期心理健康问题等,而大一新生作为高中和大学的过渡阶段,该问题更加引起人们重视[2].本研究旨在调查了解南京市高校2014年刚入学新生的生殖健康知识、态度、行为及需求现况,为下一步有针对性地开展生殖健康教育提供依据.     

解脲脲原体液体培养基改良后的效果评价

目的对现有解脲脲原体(Uu)液体培养基进行改良,改善液体培养法较高的假阳性和(或)假阴性率,探寻一个简便、可靠的临床检测Uu的方法。方法向商品化Uu液体培养基中增添头孢匹罗并下调p H值至6.0后作为改良培养基。以固体培养法为金标准,用原液体培养基(包括未过滤组、过滤组)和改良培养基平行检测76例临床标本,通过敏感性、特异性、Kappa值及预测值等指标对不同液体培养基的培养效果进行评价。结果固体培养法的阳性检出率为76.3%(58/76)。以固体培养结果为金标准,传统液体培养法未过滤时的敏感性(98.3%)高,特异性(55.6%)低,假阳性率(44.4%)高;过滤后其假阳性率(11.8%)降低,假阴性率(25.9%)升高;而改良培养基的敏感性(94.8%)、特异性(83.3%)、阳性预测值(94.8%)及阴性预测(83.3%)均较高。结论改良后的液体培养基抑制杂菌效果较好,其检测结果与固体培养结果一致性较高,且改良步骤简单,具有一定的临床应用推广潜质。     

男性HIV/AIDS人群中梨支原体感染状况及其影响因素研究

目的 了解江苏省男性HIV/AIDS人群中梨支原体(Mpi)感染情况, 分析其感染的危险因素, 并首次完成Mpi全基因组测序, 为进一步研究其致病机制奠定基础。方法 以江苏省疾病预防控制中心确认的男性HIV/AIDS人群为研究对象, 采用重复横断面调查, 进行了4次流行病学调查并分别收集首段尿、静脉血样本进行Mpi感染的检测和CD₄⁺T淋巴细胞计数。建立EpiData数据库, 使用SPSS 19.0软件进行统计学分析。采用Illumina Hiseq 2000平台对Mpi基因组进行测序。结果 共收集1 541名男性HIV/AIDS, 其中851人(55.2%)处于HIV感染阶段, 690人(44.8%)已发展至艾滋病阶段, Mpi感染率15.4%(95%CI: 14%~17%);多因素logistic回归分析结果显示, 在HIV/AIDS人群中未接受高效抗病毒治疗者, Mpi感染风险高于已治疗者(OR=1.344, 95%CI: 1.008~1.792)。另外, 随CD₄⁺T淋巴细胞计数升高, Mpi感染风险降低(OR=0.600, 95%CI: 0.444~0.810)。Mpi基因组为850 704 bp, GC含量为24.21%, 含有708个基因, 总长度为734 085 bp, 平均长度1 037 bp, 占基因组全长的86.29 %。结论 本次调查的1 541名江苏省男性HIV/AIDS人群, Mpi感染较高。接受抗病毒治疗以及机体CD₄⁺T淋巴细胞计数保持较高水平者, 可降低Mpi的感染风险。并首次完成Mpi标准株的全基因组序列测定(注册序列号: AZHZ00000001), 获得了基因组草图, 为今后进一步研究基因功能、探求致病机制等提供依据。     

生殖支原体环介导等温扩增检测方法的建立

目的建立检测生殖支原体(M.genitalium,Mg)的环介导等温扩增方法。方法根据Gen Bank公布的Mg核苷酸序列,设计4条特异性引物,进行PCR反应,对内、外引物浓度,d NTPs和Mg SO4浓度及Bst DNA聚合酶用量等进行优化,建立Mg LAMP的检测方法并进行特异性和敏感性评价;对20份HIV感染者的DNA样本分别进行LAMP和常规PCR检测。结果内、外引物浓度分别为1.6和0.2μmol/L,d NTPs浓度为1.6 mmol/L,Mg SO4浓度为12 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为8 U时,LAMP反应效果较好;用该体系检测同源关系较近的穿通支原体(M.penetrans,Mpe)、梨支原体(M.pirum,Mpi)均呈阴性;对Mg的检测灵敏度可达10-7;20份HIV感染者用LAMP法及常规PCR法各检出Mg阳性标本5份,两法的检测结果一致。结论建立的Mg LAMP检测方法的特异性、灵敏度较好,成本低廉,适合临床应用。